花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷抑制B16-F10细胞增殖和迁移的机理

论文摘要

本研究旨在探讨花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside, Cy-3-glu）对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10增殖和迁移的影响,并阐明相关机理。用不同浓度Cy-3-glu处理B16-F10细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕法检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因的m RNA表达水平,Western blot检测p-AKT、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（vimentin）的相对表达水平,并用小动物活体成像仪检测B16-F10细胞在C57BL/6J小鼠体内的生长和迁移情况。结果显示,Cy-3-glu能明显抑制体外B16-F10细胞的生长（P <0.001）和迁移（P <0.01）,使细胞周期阻滞在S期。Cy-3-glu作用后p-AKT （P <0.05）、N-cadherin和vimentin （P <0.001）表达水平显著下降,E-cadherin表达水平升高（P <0.05）。饲喂Cy-3-glu饲料的肿瘤模型C57BL/6J小鼠肿瘤大小和重量显著减小（P <0.05）,肿瘤的转移水平也明显降低。以上结果提示,Cy-3-glu通过抑制PI3K/AKT信号、调节细胞黏附和迁移信号使B16-F10细胞周期停滞在S期,最终抑制其在体内和体外的增殖和迁移。

论文目录

• 1 材料
•   1.1 细胞株
•   1.2 实验动物
•   1.3 主要药物与试剂
•   1.4 主要设备
•   1.5 B16-F10细胞培养
•   1.6 小鼠原代黑色素细胞分离及培养
•   1.7 小鼠原代黑色素细胞L-DOPA染色法
•   1.8 小鼠原代黑色素细胞Cy-3-glu处理
•   1.9 CCK-8法检测细胞增殖
•   1.1 0 Real-time qPCR
•   1.11 Western blot
•   1.1 2 流式细胞仪检测细胞周期
•   1.1 3 愈伤划痕法检测迁移
•   1.1 4 C57BL/6J小鼠肿瘤模型建立及活体成像实时观测
•   1.1 5 数据处理
• 2 结果
•   2.1 Cy-3-glu抑制B16-F10细胞的生长和迁移
•   2.2 Cy-3-glu抑制B16-F10的细胞周期进程
•   2.3 Cy-3-glu通过PI3K/AKT调节E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达水平
•   2.4 Cy-3-glu抑制B16-F10细胞小鼠体内生长和转移
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王丽,程鹏,曲晨菲,李秀艳

关键词: 矢车菊葡萄糖苷,小鼠黑色素瘤细胞,增殖,迁移

来源: 生理学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 青岛滨海学院医学院

基金: supported by Science and Technology Development Project of Shandong Provincial Department of Education,China(No.J18KA158)

分类号: R285.5

DOI: 10.13294/j.aps.2019.0073

页码: 855-862

总页数: 8

文件大小: 2385K

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