导读:本文包含了红色荧光蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,荧光,红色,细胞,根瘤菌,亲本,红光。
红色荧光蛋白论文文献综述
杨晓玫,师尚礼,姚拓,吕丹彤,李琦[1]（2019）在《接种红色荧光蛋白标记根瘤菌对苜蓿幼苗生长及结瘤能力的影响》一文中研究指出将含有红色荧光蛋白(RFP)基因质粒的荧光标记根瘤菌S.LZgn5-rfp2,S.12531-rfp4、S.LH343-rfp3接种于甘农5号和WL343HQ紫花苜蓿,分别测定2个苜蓿品种幼苗的生物量、生长指标、固氮酶活性等指标。结果表明:RFP标记根瘤菌与出发菌相比对苜蓿幼苗生长无显着影响,与不接菌的苜蓿幼苗相比有明显的促生效果,能稳定的在苜蓿幼苗体内表达,并具有与出发菌无差异的促生能力,2个苜蓿品种间也无特异性。(本文来源于《草原与草坪》期刊2019年04期）
刘春,陈晓虹,姜兰,曹际振,李凯彬[2]（2019）在《鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用》一文中研究指出为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pM DmC herry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱德华氏菌显示特异性红色荧光。稳定性检测结果表明,标记菌株传至28代,重组质粒稳定率仍为100%。用标记菌株感染斑马鱼仔鱼后,能在激光共聚焦显微镜下实时观察到细菌在鱼体内的分布情况;标记菌株体外感染小鼠巨噬细胞后,也能观察到病原菌与巨噬细胞的相互作用情况。说明标记菌株具有良好的特异性和可视性,为鮰爱德华氏菌对宿主的致病性研究提供了一种良好的生物材料。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2019年03期）
韩辉,代兴亮,程宏伟,兰青[3]（2019）在《稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞可自发融合宿主骨髓间充质干细胞并诱导恶性转化》一文中研究指出背景:异种移植瘤中宿主来源间质细胞恶性转化已有报道,但是对恶变的机制知之甚少。目的:旨在使用双色荧光示踪的体内模型研究宿主来源肿瘤间质细胞的恶性转化,并探讨可能的机制。方法:将稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞(glioma-initiatingcellstransfectedwithred fluorescent protein gene,GICs-RFP)接种到表达绿光荧光蛋白的裸鼠体内,建立具有2种荧光的动物模型;通过激光共聚焦观察移植瘤的荧光表达;流式细胞仪检测和分选各种荧光细胞,包括绿色荧光蛋白细胞、红色荧光蛋白细胞和表达这2种荧光的融合细胞;体外亚克隆得到具有恶性肿瘤细胞特征的同时表达绿色荧光蛋白/红色荧光蛋白两种荧光的融合细胞;体外鉴定细胞来源、表面标记物和恶性特征,裸鼠皮下移植验证融合细胞致瘤特性。实验经苏州大学动物实验伦理委员会批准,批准号为ECSU-201800090。结果与结论:GICs-RFP在绿色荧光蛋白裸小鼠的体内致瘤率均为100%(14/14);动物移植瘤模型中均可观察到融合细胞,分选、克隆到的融合细胞不仅共表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白,而且共表达GICs-RFP标记物Nestin和骨髓间充质干细胞标记物CD44、CD105和CD29;融合细胞在体外表现出高度增殖活性,较GICs-RFP更具侵袭和迁移特征;融合细胞(1×105个/只)在无胸腺裸小鼠的致瘤率为100%(4/4)。提示GICs-RFP自发融合宿主骨髓间充质干细胞并诱导恶性转化,为肿瘤异质性的细胞来源提供了新的双色荧光示踪的证据。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年25期）
赵宝清[4]（2019）在《具有大斯托克位移的新型远红色荧光蛋白的分子设计与性能研究》一文中研究指出荧光蛋白现在已经被广泛应用于生命科学领域,并且为精度较高的亚细胞级别成像技术提供了便利,而650 nm~700 nm范围的荧光探针在生物体内的组织内,具有透射率更高,成像时间更长,自发荧光背景弱,光散射率低等优势。而具有大斯托克位移的远红荧光蛋白也成为了荧光蛋白领域内的研究热点。藻胆蛋白作为藻胆体的重要组成部分,可以捕获橙光、红光和远红光来用于蓝藻和红藻的光合作用,而藻胆体核心的藻胆蛋白如别藻蓝蛋白则可以吸收远红光,从而将能量传递到反应中心。因此别藻蓝蛋白的亚基可以被设计成一些远红荧光蛋白,例如嗜热藻Chroococcidiopsis thermalis PCC7203的中藻胆体核亚基ApcF2优化发展而来的可以结合BV色素的远红荧光蛋白BDFP1.2/1.6等系列。但是目前的荧光蛋白的斯托克位移都比较小,这极大地限制了在细胞内多色成像的应用。mCherry是一个被广泛应用的优良的红色荧光蛋白,因为其有着较高的荧光量子产率而可以作为FRET中的能量供体,从而将能量有效地传递给能量受体例如BDFP1.6等远红荧光蛋白。我们将mCherry与BDFP1.6荧光蛋白通过不同的方式进行融合尝试,得到了一个具有大斯托克位移的新型荧光蛋白BDFP2.0。BDFP2.0可以被~580 nm的激发光激发,然后将能量有效地传递给BDFP1.6,从而使得BDFP2.0在远红区范围内的哺乳动物细胞有效亮度也得到了有效的提升,并且具有耐酸碱、耐化学变性剂等特点,我们将BDFP2.0与不同的目的蛋白进行融合,转染HeLa细胞后,得到了清晰明亮的高分辨率的照片,而且与BDFP1.1同时转染了HeLa细胞,得到了可以明显区分的高分辨双色成像照片。所以BDFP2.0不仅仅是一个动物细胞结构的标记物,而且也是在双色成像中也有着优良表现的荧光蛋白。同时,BDFP2.0的出现也为FRET定量分析提供了借鉴和为研究者们开发新型荧光蛋白提供了一些新的思路。在对亚基ApcF2进行分子改造的过程中,获得了一个具有特殊光谱特点的突变体ApcF2-12,其产量较低但具有两个吸收峰值,通过随机诱变的方法将ApcF2-12进行诱变筛选,不仅仅获得了产量较高的突变体,同时也得到了其他具有特殊荧光光谱,例如斯托克位移增大和光谱蓝移的一些突变体,并且进行了测序比对,尝试对其光谱的变化进行了一些分析。通过对ApcF2-12进行分子改造,确定了突变率较为稳定和克隆成功率较高的随机诱变方法,丰富了筛选优秀荧光探针的诱变体来源,也为研究藻胆蛋白结合BV色素的荧光变化提供了一些参考和思路。来自于Synechococcus sp.PCC7335的核膜连接蛋白ApcE2的N端结构域(1-273)可以与PEB/PCB自催化地非共价结合,从而使得荧光光谱红移。我们通过尿素变性和酶解两种蛋白质变性方法以及丁酮和氯仿两种萃取剂对色素进行萃取,摸索出一种价格低廉,萃取效率较高并且操作简便毒性较小的色素萃取方法。(本文来源于《华中农业大学》期刊2019-06-01）
王文旭,郁飞[5]（2019）在《红色荧光蛋白融合表达载体的构建和蛋白质细胞内定位研究》一文中研究指出为进一步研究目的蛋白质在细胞内的定位,构建融合了红色荧光蛋白mCherry或mScarlet的表达载体。选取VTI12、RabD2a、ARA7以及SYP61等4个定位基因来构建红色荧光蛋白融合表达载体。根据TAIR数据库中相关蛋白质的基因序列设计引物,通过PCR技术扩增序列并将其分别连接到已制备好的红色荧光蛋白融合表达载体上,制备得到质粒后转化入原生质体进行瞬时表达。结果表明,成功构建了pUC18HE-NmCherry-VTI12、pUC18HE-NmCherry-RabD2a、pUC18-mScarlet NT-ARA7以及pUC18-mScarlet NT-SYP61等4个红色荧光蛋白融合表达载体,并且成功在拟南芥叶肉细胞原生质体中瞬时表达。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年08期）
马琼,谢菲,周志,周明[6]（2019）在《蓝藻红色荧光蛋白All1280 GAF2在E. coli BL21(DE3)中的表达及其突变体构建（英文）》一文中研究指出采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaena sp.) PCC 7120中扩增获得红色荧光蛋白基因all1280 gaf2,并利用Bam HⅠ和SalⅠ酶切位点,将该基因插入到pET-30a(+)中,构建表达载体pET-all1280 gaf2。将该表达载体与藻胆色素生物合成质粒pACYC-ho1-pcyA同时转化到大肠杆菌E. coli BL21 (DE3),表达后获得大肠杆菌色素细胞。结果显示,该色素细胞在荧光显微镜下具有红色荧光,且在15E/15Z态之间具有可逆光效应。进一步以pET-all1280 gaf2为模板,通过定点突变技术在all1280 gaf2基因中引入C53A突变,获得了突变体All1280 GAF2 (C53A)。将All1280 GAF2 (C53A)与藻胆色素在E. coli BL21 (DE3)中共表达,获得了比野生型红色荧光更强的大肠杆菌色素细胞。研究结果表明,与野生型相比,All1280 GAF2 (C53A)具有较高的摩尔消光系数和荧光量子产率,红色荧光更强。(本文来源于《植物科学学报》期刊2019年02期）
张莹,宋馨,夏永军,艾连中,王光强[7]（2019）在《基于CRISPR/Cas9系统对干酪乳杆菌进行红色荧光蛋白标记》一文中研究指出本实验利用CRISPR/Cas9系统对干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) LC2W进行红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)标记,用于研究干酪乳杆菌在肠道内的分布和定植状况,评价其作为益生菌的功能。首先,基于本实验室已有的干酪乳杆菌CRISPR/Cas9编辑质粒pLCNICK-1628构建重组质粒pLCNICK-1628-RFP,电转入干酪乳杆菌LC2W感受态细胞中,使干酪乳杆菌基因组中的LC2W-1628基因被红色荧光蛋白基因替换,从而使干酪乳杆菌LC2W能表达出红色荧光蛋白。得到红色荧光标记的干酪乳杆菌LC2W突变株后,测定了其荧光强度-OD600标准曲线,发现RFP在干酪乳杆菌LC2W中能稳定表达。(本文来源于《工业微生物》期刊2019年01期）
荣慧杰,查向东,孔小卫,葛嫚嫚,张旭冉[8]（2018）在《抗菌肽LfcinB与红色荧光蛋白mApple在酿酒酵母中的融合表达》一文中研究指出目的通过融合牛乳铁蛋白肽基因(bovine lactoferricin B,LfcinB)与红色荧光蛋白(mApple)基因,构建以mApple为报告基因的酵母表达载体,融合表达重组蛋白LfcinB-mApple,并进行活性检测。方法取含LfcinB和mApple基因的pYES2-α-LfcinB-G13、pYES2-α-mApple-DP-AP质粒,分别经PCR扩增后连接形成片段LfcinB-mApple,插入质粒pYES2-α(质粒pYES2-α-LfcinB-G13经双酶切所得)中,将构建的重组表达质粒pYES2-α-LfcinB-mApple转入酿酒酵母菌株W303,半乳糖诱导表达。管碟法检测表达的LfcinB-mApple对大肠埃希菌DH5α、金黄色葡萄球菌的抑菌活性;激光共聚焦检测红色荧光蛋白荧光的发射。结果重组表达质粒pYES2-α-LfcinB-mApple经酶切鉴定和测序证明构建正确;表达的重组LfcinB-mApple对大肠埃希菌DH5α、金黄色葡萄球菌均有明显抑菌活性;重组酵母细胞内观察到红色荧光。结论重组酿酒酵母成功分泌表达了具有生物活性的LfcinB-mApple,对进一步研究LfcinB的生物功能及大规模生产提供了条件。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年11期）
罗成,齐江矫,王元元,高剑峰[9]（2018）在《利用重迭延伸PCR构建红色荧光蛋白布鲁氏菌表达载体》一文中研究指出为了构建能够在布鲁氏杆菌宿主细胞和宿主个体中稳定表达红色荧光蛋白的载体,试验通过PCR分别获得核糖体结合位点-红色荧光蛋白(RBS-Red)与布鲁氏菌特异DNA(BDNA)片段,利用重迭延伸PCR获得RBS-Red-BDNA重迭片段;将重迭片段插入pLB载体,利用SmaⅠ与SacⅡ对重组pLB载体和pMC-221质粒进行双酶切后连接目的片段,连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;提取的质粒电转布鲁氏菌16M菌株感受态细胞,将电转后的16M-pMC-Red菌株涂布于含有氯霉素抗性的布鲁氏菌培养基,倒置荧光显微镜下观察菌株颜色;16M-pMC-Red菌株侵染小鼠巨噬细胞,制成细胞爬片,激光共聚焦荧光显微镜下观察小鼠巨噬细胞,鉴定红色荧光蛋白表达情况。结果显示,利用重迭延伸PCR技术成功改造了红色荧光蛋白布鲁氏菌双启动子表达载体;将改造获得的质粒电转进布鲁氏杆菌16M菌株,菌株荧光鉴定能够稳定表达红色荧光蛋白;电转成功的16M-pMCRed菌株侵染小鼠巨噬细胞后,可以稳定表达红色荧光蛋白。试验构建的发红光质粒pMC-Red可以与发绿光质粒pMC-221联用,为不同种株布鲁氏菌之间的联合研究奠定了基础,也为布鲁氏菌病检测提供了一个以荧光检测为指标的新策略。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年09期）
段志强,许海旭,赵佳福,阮涌,嵇辛勤[10]（2017）在《表达红色荧光蛋白重组基因VIId亚型鸭源NDV强毒株的拯救与鉴定》一文中研究指出引言新城疫病毒(NDV)是一种有囊膜,含有单股、负链、不分节段基因组的RNA病毒,是目前严重危害世界养禽业的重要病原之一。自1997年以来我国多个省份均有水禽感染NDV发病死亡的报道,分子流行病学研究结果显示,感染并导致水禽发病死亡的主要是基因Ⅶd亚型NDV~([1])。研究表明,虽然基因Ⅶ型NDV毒株对家鸭的致病力不强,但是人工感染鹅或鸡后却能造成严重的发病(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集》期刊2017-08-20）
红色荧光蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pM DmC herry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱德华氏菌显示特异性红色荧光。稳定性检测结果表明,标记菌株传至28代,重组质粒稳定率仍为100%。用标记菌株感染斑马鱼仔鱼后,能在激光共聚焦显微镜下实时观察到细菌在鱼体内的分布情况;标记菌株体外感染小鼠巨噬细胞后,也能观察到病原菌与巨噬细胞的相互作用情况。说明标记菌株具有良好的特异性和可视性,为鮰爱德华氏菌对宿主的致病性研究提供了一种良好的生物材料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
红色荧光蛋白论文参考文献
[1].杨晓玫,师尚礼,姚拓,吕丹彤,李琦.接种红色荧光蛋白标记根瘤菌对苜蓿幼苗生长及结瘤能力的影响[J].草原与草坪.2019
[2].刘春,陈晓虹,姜兰,曹际振,李凯彬.鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用[J].江苏农业学报.2019
[3].韩辉,代兴亮,程宏伟,兰青.稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞可自发融合宿主骨髓间充质干细胞并诱导恶性转化[J].中国组织工程研究.2019
[4].赵宝清.具有大斯托克位移的新型远红色荧光蛋白的分子设计与性能研究[D].华中农业大学.2019
[5].王文旭,郁飞.红色荧光蛋白融合表达载体的构建和蛋白质细胞内定位研究[J].江苏农业科学.2019
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[9].罗成,齐江矫,王元元,高剑峰.利用重迭延伸PCR构建红色荧光蛋白布鲁氏菌表达载体[J].中国畜牧兽医.2018
[10].段志强,许海旭,赵佳福,阮涌,嵇辛勤.表达红色荧光蛋白重组基因VIId亚型鸭源NDV强毒株的拯救与鉴定[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.2017
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