【关键词】阿贡纳沙门菌生物学特性沙门菌诊断血清
TheSalmonellaagonewasdetectedinDaxianCountyforthefirsttime
BAIChun-gang.(DaxianCenterforDiseaseControlandPreventionDaxian635000China)
【Abstract】ObjectiveTostudythebiologicalcharacteristicsoftheSalmonellaagone.Methodsbiochemicalreactions,serologicaltypingforidentificationofbacteria;convalescentserumofpatientswithisolatesforspecificagglutinationtest.ResultsA-FSalmonellapolyvalentOserum:Agglutination;O4groupfactorserum:Agglutination;H4serumfactor:Agglutination;Hsserumfactor:Agglutinationlectin;convalescentserumantibodycorrespondingto1:320.ConclusionTheSalmonellaagonewasdetectedinDaxianCountyforthefirsttime.
【Keywords】Salmonellaagone;biologicalcharacteristics;serumdiagnosisofSalmonella
沙门菌是一群寄生于人类和动物肠道中,生化和抗原结构相似的革兰氏阴性杆菌，全球广泛存在，分布于人体、动物和外环境，是重要的人畜共患病原菌，是引起人群腹泻和食物中毒的主要病原菌之一。2000年以来,全球沙门菌引起的食源性疾病呈上升趋势,在美国、欧盟等世界各国发病居首位或第二位；在加拿大每年约感染627200例[1]。据美国疾病预防控制中心报告,全美每年估计发生食源性疾病人数7600万人,死亡5000例,其中因沙门菌发病140万人,每年花费医药费用40亿美元,英国每年发生236.6万例,其中沙门菌占显著地位[2]。
2008年6月24日,达县石板镇铜坪村3社潘某某家举办婚宴而发生食物中毒。临床症状以头痛、头昏、恶心(干呕)、呕吐、腹痛、腹泻(水样便)10次以上、四肢无力为主.我们即对部分病人采集肛拭子、用具棉拭子进行分离培养,分离出3株沙门菌。经生化、血清学试验初步命名为阿贡纳沙门菌。现将结果报告如下。
1材料
1.1标本来源采自腹泻病人肛拭子、食品用工具棉拭子、病后两周恢复期病人血清及当地正常人血清。
1.2培养基与试剂TTB增菌液、HE等由杭州天和微生物试剂有限公司生产。三糖铁琼脂、XLD培养基由中国检验检疫科学研究院北京陆桥技术有限责任公司生产(由四川省疾病预防控制中心提供)。
1.3肠杆菌科细菌微量生化编码管由杭州天和微生物试剂厂生产。
1.4沙门菌诊断血清由宁波天润生物药业有限公司提供,批号(20080101)。以上培养基与试剂均在有效期内使用。
2方法
2.1菌株分离培养与鉴定取患者肛拭子于10mlTTB增菌液内,置42℃培养18小时,分别用接种环取增菌液1环,划线接种于一个HE琼脂平板和一个XLD琼脂平板上,37℃24h后,挑取可疑菌落于三糖铁琼脂斜面分纯后进行生化反应,血清玻片凝集试验,试验同时作盐水对照试验。
2.2正常人及恢复期病人血清与分离菌的特异性凝集试验初步鉴定的阿贡纳菌株制成10亿Pml的试验菌液,将病人恢复期血清及当地健康人血清以1:20、1:40……1:1280稀释每管0.5ml,各管滴加试验菌液0.5ml混匀,37℃培养过夜,观察其结果,以++凝集判为阳性,计算滴度。试验同时设阴性对照,阴性对照管为阴性则试验成立。
3结果
3.1形态与培养特性该菌为革兰阴性短杆菌,有动力,无芽胞,氧化酶阴性。在HE琼脂平板:蓝绿色菌落、产生H2S,菌落中心黑色;在XLD琼脂平板:粉红色菌落,带黑色中心。
3.2生化反应鉴定结果三糖铁琼脂:斜面:红;高层:产酸产气,产生硫化氢。能发酵葡萄糖、麦芽糖;赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、枸椽酸盐、卫茅醇、硫化氢、靛基质为阳性;有动力;不发酵乳糖,蔗糖;尿素试验为阴性。
3.3血清学鉴定沙门菌A-F多价O血清:凝集;O4群因子血清:凝集;H4因子血清:凝集；Hs因子血清:凝集。生理盐水对照:未凝集。
3.4恢复期病人血清及正常人血清与阿贡纳菌试管凝集试验10份恢复期病人血清凝集效价均在1:80以上,而正常人无阿贡纳抗体。见下表。
恢复期病人及正常人血清与阿贡纳菌凝集试验
1:201:401:801:1601:3201:640合计
病人恢复期血清——253—10
正常人血清——————10
4讨论
4.1根据细菌的形态、生化反应,所分离的3株菌株符合沙门菌定义。与阿贡纳标准菌生化反应一致,血清学反应结果该菌株具有沙门菌A-F多价O抗原;O4抗原;H4抗原和Hs抗原。
4.2我们所分离的阿贡纳菌株与10份恢复期病人血清进行试管凝集试验,10份血清效价全部在1:80以上,最高效价高达1:320,正常人血清无阿贡纳沙门菌抗体。试验显示在感染该菌较短时间内机体即可产生较高水平的抗体滴度,说明该菌株是这次食物中毒的流行株。综上所述,本次分离的沙门菌可命名为阿贡纳沙门菌,且是一个极少见的血清型,为我县首次分离。
基金项目:本研究由中美新发和再生传染病合作项目[美国疾病预防控制中心(CDC)5U2GGH000018-02]、WHOGSS资助
参考文献
[1]MartinLJ，FyfeM，DoréK，etal.Increaseburdenofillnessassociatedwithantimicrobial-resistantSalmonellaentericaserotypetyphimuriuminfections.J.InfectDis，2004，189（3）：377-384.
[2]顾宝柯,袁政安,全汇明,许学斌,林亚萍,陈敏,肖文佳.上海沙门菌流行病学特征分析.环境与职业医学2008.25（3）：247.