全文摘要
本实用新型提出一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器，属于生物学和医学技术研究领域的实验协助装置，能富集更多含量稀少的细胞并提高分选后细胞的活性。包括收集台、收集板。本实用新型能配合流式细胞仪分选收集目的细胞，收集台先安装在流式细胞仪分选电极板下方，收集板插在收集台中，其收集孔正好与其上方分选电极板相对应，并能短量程缓冲收集上方目的细胞，收集板收集完细胞后，即可抽出并由封口膜自动封口，可直接用来后续分析或无菌培养，无需再次离心收集。其装置不仅构造轻巧，制作成本低，而且实用性非常强，更换方便，最重要的是相比传统收集管，本装置可以针对性收集含量稀少细胞，并且高活率、高数量、无菌收集目的细胞。
主设计要求
1.一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,其特征在于，包括收集台(1)，收集板(2)，所述收集板(2)上开有细胞收集孔，所述收集台(1)安装在流式细胞仪分选电极板下方，收集台(1)上开有一边开口的凹槽(102)，凹槽的形状与收集板相适应，收集板(2)能够插入凹槽内，收集台(1)上与凹槽开口相邻的两个侧边开有开口方向与凹槽相同的U型缺口(103)，收集台上U型缺口上方开有连接孔，连接孔上配有固定铆钉(101)，这两个结构可以使收集台(1)与流式细胞仪镶嵌在一起。
设计方案
1.一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,其特征在于，包括收集台(1)，收集板(2)，所述收集板(2)上开有细胞收集孔，所述收集台(1)安装在流式细胞仪分选电极板下方，收集台(1)上开有一边开口的凹槽(102)，凹槽的形状与收集板相适应，收集板(2)能够插入凹槽内，收集台(1)上与凹槽开口相邻的两个侧边开有开口方向与凹槽相同的U型缺口(103)，收集台上U型缺口上方开有连接孔，连接孔上配有固定铆钉(101)，这两个结构可以使收集台(1)与流式细胞仪镶嵌在一起。
2.根据权利要求1所述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,其特征在于，所述收集板(2)包括多个细胞收集孔(201)和可闭合封口膜(202)，所述可闭合封口膜(202)前端边缘固定连接有凸起(3)，随着收集板(2)慢慢推入收集台(1)中，其膜前端边缘中间的凸起受到与收集台相互嵌合的流式细胞仪上壁(4)的阻碍，再由于自身厚度与柔韧性能被上壁慢慢推开成∧形回缩，使收集孔(201)暴露在分选电极板下面，当完成细胞的收集后，随着收集板的抽出，可闭合封口膜(202)由∧形慢慢展开平铺收集孔(201)，使整个细胞收集过程完全处于无菌环境。
3.根据权利要求1或2所述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,其特征在于，所述收集孔(201)直径1cm，深度5mm。
4.根据权利要求1或2所述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,其特征在于，所述收集台(1)由亚克力材质做成，所述收集板(2)由聚苯乙烯制成。
设计说明书
技术领域
本实用新型提出一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器，属于生物学和医学技术中细胞或组织研究领域的实验协助装置。
背景技术
流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来，通过流式细胞仪分选得到高纯度、高活性的细胞群，通过直接培养、诱导、增殖、分化、活化和移植等进行更深一步的细胞功能和细胞治疗探索，还可以在此基础上逆向进行基因组学和蛋白质组学相关研究，寻找致病基因、致病蛋白和疾病信号传导方式。
流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。总的过程是:由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴，根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选，而后由充电电路对选定细胞液滴充电，带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转，落入收集器中；其它液体被当作废液抽吸掉。
但是流式细胞仪配套收集管收集含量稀少细胞存在不足：
1.对于含量稀少细胞，相对时间内分选出的细胞数量很少,分选时只有单个带电液滴发生偏转,而配套的收集管最小容积也有1.5mL,管体较长。带电液滴携带细胞通过静电场发生偏转落入收集管中时，会很大概率地碰到管壁，长时间贴在管壁上就会使细胞失去活性。其次，收集管内提前加入的培养基量较多，细胞分选完后必须进行离心浓缩再转移,这一过程不仅会大大减少细胞的数量而且还存在转移过程中的污染问题。
2.配套收集管是个整体结构，拿出后没有保护装置，特别容易造成细胞污染，影响后续分析。
因此有必要研制出一种针对含量稀少细胞的、浅管底，无需再次转移的一次性收集器，从而可以实现高活率、高数量、无菌地收集目的细胞。
实用新型内容
为了解决上述问题，本实用新型的目的在于提供一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器，其装置不仅构造轻巧，制作成本低，而且实用性非常强，更换方便，最重要的是与配套收集管相比，本装置可以高活率、高数量、无菌收集目地收集含量稀少细胞。
本实用新型所采用的技术方案是：
一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,包括收集台，收集板，所述收集板上开有细胞收集孔，所述收集台先安装在流式细胞仪分选电极板下方，收集台上开有一边开口的凹槽，凹槽的形状与收集板相适应，收集板能够插入凹槽内，收集台上与凹槽开口相邻的两个侧边开有开口方向与凹槽相同的U型缺口，收集台上U型缺口上方开有连接孔，连接孔上配有固定铆钉，这两个结构可以使收集台与流式细胞仪镶嵌在一起。
上述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,所述收集板包括多个细胞收集孔和可闭合封口膜，所述可闭合封口膜前端边缘固定连接有凸起，随着收集板慢慢推入与流式细胞仪镶嵌在一起的收集台中，其膜前端边缘中间的凸起受到与收集台相互嵌合的流式细胞仪上壁的阻碍，再由于自身厚度与柔韧性能被上壁慢慢推开成∧形回缩，使收集孔暴露在分选电极板下面，当完成细胞的收集后，随着收集板的抽出，可闭合封口膜由∧形慢慢展开平铺收集孔
上述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,所述收集孔直径1cm，深度5mm。
上述一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,所述收集台由亚克力材质做成，所述收集板由聚苯乙烯制成。
本实用新型的有益效果是：本收集器不仅构造轻巧，制作成本低，而且实用性非常强，更换方便，最重要的是与配套收集管相比，本装置可以高活率、高数量、无菌收集目地收集含量稀少细胞。
附图说明
下面结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步说明。
图1为收集台结构示意图；
图2为收集板结构示意图；
图3为一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器整体结构示意图；
图4为收集台和流式细胞仪嵌合的结构示意图；
图5为收集板分选含量稀少细胞的阳性率和活性率结果图；
图6为传统1.5mL收集管分选含量稀少细胞的阳性率和活性率结果图。
图中1-收集台，2-收集板，101-固定铆钉，102-凹槽，103-U型缺口，201-收集孔，202-封口膜，3-凸起，4-流式细胞仪上壁。
具体实施方式
下面结合附图和实施方式对本实用新型的技术方案进行具体描述。
【实施例1】
一种分选含量稀少细胞的辅助高效收集器,包括收集台1，收集板2，所述收集板2上开有细胞收集孔，所述收集台1安装在流式细胞仪分选电极板下方，收集台1上开有一边开口的凹槽102，凹槽的形状与收集板相适应，收集板2能够插入凹槽内(类似抽屉，可推进推出)，这样整个收集台在工作时就可以与流式细胞仪完全吻合，到达密封与无菌效果。收集台1上与凹槽开口相邻的两个侧边开有开口方向与凹槽相同的U型缺口103，收集台上U型缺口上方开有连接孔，连接孔上配有固定铆钉101，这两个结构可以使收集台1与流式细胞仪镶嵌在一起。
【实施例2】
基于实施例1，实施例2与实施例1的不同之处在于：所述收集板2包括多个细胞收集孔201和可闭合封口膜202，所述可闭合封口膜202前端边缘固定连接有凸起3，随着收集板2慢慢推入与流式细胞仪镶嵌在一起的收集台1中，其膜前端边缘中间的凸起3受到与收集台相互嵌合的流式细胞仪上壁4的阻碍，再由于自身厚度与柔韧性能被上壁慢慢推开成∧形回缩，使收集孔201暴露在分选电极板下面，当完成细胞的收集后，随着收集板的抽出，可闭合封口膜202由∧形慢慢展开平铺收集孔201，使整个细胞收集过程完全处于无菌环境。
优选地，其细胞收集孔201深度5mm,数量可以根据目标细胞种类设计，并不仅仅限于四孔。
优选地，所述一种分选含量稀少细胞的收集台1、收集板2是配套使用的，收集台1由亚克力材质做成，收集板2由聚苯乙烯组成，每次收集完细胞无需进行再次转移，在此板中即可完成后期研究分析，也就是每次实验只需更换收集板2即可，整套装置便宜实用。
GFP表达全阳性的HCT116细胞与无荧光表达的HCT116细胞一定比例混合后得到GFP表达率约为1％的混合细胞群(含量稀少细胞)。
如图3所示，为收集器整体结构示意图，当进行细胞分选实验前，掀开收集板上透明可闭合封口膜202，在收集板2各孔中加入细胞收集缓冲液(含20％胎牛血清的培养基200μL)，随后使可闭合封口膜202慢慢密封收集板2(若收集的细胞后期要进行无菌处理，则要在无菌条件下，慢慢掀开可闭合封口膜202，与之对照在传统1.5mLEP收集管中加入400μL含20％胎牛血清的培养基。
如图1所示，为收集台1结构示意图，将收集台1首先镶嵌到流式细胞仪中，转换成如图4所述结构。
如图2所示，再将上述装好收集缓冲液的收集板2沿着凹槽102慢慢推入收集台1，随着收集板2慢慢推入收集台1，其可闭合封口膜202前端边缘中间的凸起3受到与收集台相互嵌合的流式细胞仪上壁4的阻碍，再由于自身厚度与柔韧性能被上壁慢慢推开成∧形回缩，使收集孔(201)暴露在分选电极板下面，即可调整分选电压使目的细胞刚好落在各个孔洞中，当完成细胞的收集后，随着收集板的抽出，可闭合封口膜202由∧形慢慢展开平铺收集孔201，这样就使整个细胞收集过程完全处于无菌环境。
调试流式细胞仪70μm喷嘴分选参数，分选细胞至收集板2内10000个,与之对照，调试70μm喷嘴分选参数，分选细胞至传统1.5mLEP收集管内10000个。
将收集的两组细胞回收、离心、定容至500uL体系，加入PI染色5分钟(PI终浓度为1μg\/mL)，上流式细胞仪检测。可以从检验结果看出：如图5，收集板2：分选前细胞阳性率为0.9％，分选后回测细胞阳性率88.6％，细胞活性97％；如图6，传统1.5mLEP收集管：分选前细胞阳性率1.3％(比收集板2分选前细胞阳性率还高)，但分选后回测其细胞阳性率仅仅77.5％，细胞活性仅仅87.8％。因此，本发明装置相比传统装置，可以实现高活率、高数量、无菌地收集含量稀少细胞。
设计图
相关信息详情
申请码:申请号:CN201920039723.0
申请日:2019-01-10
公开号:公开日:国家:CN
国家/省市:83(武汉)
授权编号:CN209537453U
授权时间:20191025
主分类号:C12M 1/00
专利分类号:C12M1/00
范畴分类:18H;
申请人:武汉大学
第一申请人:武汉大学
申请人地址:430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学
发明人:柳卫凰;陈飞翔;付亚平;童攒;田卫群;王巧娜
第一发明人:柳卫凰
当前权利人:武汉大学
代理人:许莲英
代理机构:42222
代理机构编号:武汉科皓知识产权代理事务所（特殊普通合伙）
优先权:关键词:当前状态:审核中
类型名称:外观设计