陈玲(湖北省嘉鱼县血防医院检验科湖北咸宁437200)
【中图分类号】R184【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)14-0370-01
粪便无害改厕是我国控制寄生虫类传染病,特别是血吸虫病重要的公共卫生措施。为了解血吸虫流行地区无害改厕粪便处理效果及其影响因素,为改厕进一步完善提供实验依据,我院在2010年11月,对嘉鱼县疫区三格式无害化卫生厕所粪便虫卵进行了检测。按照《粪便无害化卫生标准》(GB7959-87)规定方法,采集30个无害化卫生厕所粪池的第一池和第三池,共计60份样,其检测程序及结果报告如下:
1内容和方法
1.1调查对象在已经开展改厕工作的流行村、且户厕使用超过一年以上的农户,随机抽取30户,对30座无害化卫生厕所粪池的第一池和第三池进行调查。
1.2样品采集采集30座无害化卫生厕所粪池的第一池和第三池,共采集60份样本。并对每个厕所分别采集第一池与第三池的稀粪样品,按要求在每层分5个点采集,其中第一池总量约为200ml,置500ml广口瓶备检,第三池总量1000装于塑料桶中备检。
1.3检测方法
粪便蛔虫卵检测均严格按照《粪便无害化卫生标准》GB7959-1987[1]方案要求,第一池粪便样品的检测采用稀释法,第三池采用浓缩法。
1.3.1稀释法(滤膜抽滤计数法)取混匀的进料口粪稀100ml,加水稀释至300-500ml,用60孔的金属筛子过滤于500ml锥形量杯中,静置30min,倒去沉淀上部的液体,将沉渣移入50ml离心管中,离心3min,每分钟2000转,倒去上清液,加入20ml5%氢氧化钠溶液,每隔10min用玻棒拌匀,1h后加水近满搅拌后,离心3min,弃去上液,加入饱和食盐水搅拌,再离心3min,每分钟2000转,用吸管吸取漂浮液,放置于盛有清水的小烧杯中,将此悬液抽滤于1张滤膜上,在显微镜下计算全滤膜上的蛔虫卵数,即100ml进料口的稀粪的蛔虫卵数。
1.3.2浓缩法(滤膜抽滤法)将出料口不同层次采得的定量稀粪样品,用60目铜筛过滤,除比较混浊需要反复水洗沉淀外,直接抽滤于滤膜上,将滤膜平铺在载玻电上,在显微镜下作蛔虫卵计数,从而计算出每100ml稀粪中蛔虫卵含有数。
1.3.3蛔虫卵活力测定检测采用滤膜培养法进行操作。在玻璃平皿底部平铺一层厚约1cm脱脂棉,并在上面再铺一张等大的普通滤纸,生理盐水加至湿透滤纸和脱脂棉为宜,防霉菌可加2%甲醛溶液几滴,把含有蛔虫卵的滤膜(计数完毕后的滤膜)平铺在平皿中滤纸上加盖、编号,放置培养箱24-26℃下培养一个月。取出镜检计数100-200个蛔虫卵,并观察蛔虫卵的死活;如卵内发育为幼虫期阶段者,判断为是活卵,否则均视为死卵。
血吸虫卵检测严格按照《粪便无害化卫生标准》GB7959-1987[1]方案要求进行,沉淀法计算虫卵,孵化法找毛蚴。
1.3.1沉淀法操作方法取稀粪样约30g,放于烧杯中加水搅匀,通过60目铜丝筛,滤入500ml锥形量杯中,加水近满,静置20-30min后,待沉渣沉淀,倒去上层水,保留沉渣约30ml,加清水至原刻度处,每隔20-30min换水一次,直至上浮液澄清为止。经过3-4次换水后,用吸管吸取沉渣,镜检。
1.3.2孵化法操作方法取稀粪样约30g,先经沉淀法浓聚处理,继将处理的稀粪沉渣倒入250ml三角烧瓶中,加去氯水至离瓶口1cm处,放入孵化室(箱)或在室温下孵化,一定时间后取出烧瓶,观察毛蚴。观察毛蚴时,应将烧瓶向着光源,并衬以黑纸板。如有怀疑,可用毛细吸管吸出,在显微镜下鉴别。
2结果
2.1每个三格粪池分别采集第一池与第三池粪稀样品,其结果如下:
表1第一池与第三池虫卵检测结果
池数第一池第三池
蛔虫卵总数62914
活蛔虫卵总数650
蛔虫卵检出户数234
血吸虫卵检测户数30
孵化检出户数10
2.2卫生户厕粪液经三格式无害化处理后,第一池有23个粪池检出蛔虫卵占76.6%,有3个粪池检出血吸虫卵占10%,1个粪池孵化血吸虫毛蚴占3.33%。第三池有4个粪池检出蛔虫卵占13.3%,没有检出活蛔虫卵和血吸虫卵。从表中可知30个厕所中,蛔虫卵总数由第一池629下降至第三池14,蛔虫卵沉降率达97.7%。活蛔虫卵总数也由第一池65下降至第三池0,蛔虫卵死亡率达100%,其结果与潘玉钦[5]报告基本一致。
3讨论
3.1本次结果分析:三格式厕所第一池与第三池杀灭虫卵效果显著。第三池杀灭效果明显高于第一池,从而阻断了虫卵到毛蚴的演变过程,达到了杀灭血吸虫卵的目的。蛔虫卵检测阳性率由76.6%下降至13.3%,此结果和龚爱春[4]等报告相吻合。虫卵的沉淀率达97.7%,虫卵死亡率达100%,符合国家无害化厕所评价标准。
3.2部分厕所粪便稀少:在30份抽样厕所中,有7个样品为稍混水样物,粪便稀少,检测结果为零。后通过询问调查,发现用户经常外出,留守人员少,厕所久置未用所置。建议加强农村户厕卫生宣传工作,提高自身防病意识,充分发挥无害化粪池的积极作用。
3.3嘉鱼县疫区无害化改厕,主要采用的是三格化粪池,第一池主要截留虫卵较多的粪便,经发酵分解,杀灭寄生虫卵及病菌,第二池进一步发酵,沉淀虫卵,进入第三池的粪便基本上已不含寄生虫卵及病原微生物,达到粪池无害化要求,可直接用于施肥。血吸虫卵,蛔虫卵经三格化粪池处理,阻断了其传播途径,达到防病目的,也是控制血吸虫病治本的有力措施。同时,农村改厕及粪便无害化处理,对促进病区居民血防知识提高,农村环境卫生的改变和良好的卫生习惯的形成起到了积极的作用,具有较深远的意义。
参考文献
[1]《粪便无害化卫生标准》GB7959-1987粪便无害化卫生标准[S].
[2]全国爱国卫生运动委员会办公室,联合国儿童基金会、中国农村卫生厕所技术指南[M]2003.2.
[3]潘顺昌、全国农村厕所与粪便处理背景调查及今后对策研究[J]卫生研究1995.24(增刊).
[4]龚爱春王应安.湖北省农村改厕试点粪便无害化效果评价[B]公共卫生与预防医学2009.4.
[5]潘玉钦张美霞.农村改厕与卫生防疫效果分析[J]环境与健康杂志2002.3.