导读:本文包含了基因串联体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,引物,抗原,神经肽,链式反应,芽孢,模板。
基因串联体论文文献综述
李泰明,刘涛,张美由,马艳红,周哲[1]（2011）在《人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达》一文中研究指出利用同尾酶法构建人胰高血糖素样肽-2类似物{PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)}基因串联体重组质粒,实现目的基因在大肠杆菌中高效表达。通过PCR扩增获得PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)基因片段,利用同尾酶BamHⅠ和BclⅠ产生相同的粘性末端,经连接、转化、筛选等操作构建其基因串联体。经DNA测序分析,成功构建PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)的二、四、六、八拷贝基因串联体。SDS-PAGE显示,各重组菌经D-乳糖诱导后均表达目的融合蛋白,其相对分子质量与预期结果相符,目的肽含量并非随串联个数增加而明显增加,改变融合伙伴后,目的肽的表达量从0.106 g/L提高到0.372 g/L,为大量制备和纯化PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)奠定了基础。(本文来源于《药物生物技术》期刊2011年02期）
李秀梅,郭立力,李颖,朱雅宁,石瑜[2]（2010）在《鸡贫血病毒全长基因串联体的构建》一文中研究指出为了进一步研究鸡贫血病毒全长基因组感染性分子克隆和生物学特性,试验采用PCR方法,根据GenBank上已发表的鸡贫血病毒Cux-1株序列合成1对引物,利用高保真酶扩增鸡贫血病毒全长基因组DNA,并克隆到pB luescriptⅡSK(+)载体上,获得全长基因组DNA分子克隆。通过不完全酶切将2个全长基因连接,并进行酶切鉴定和测序分析。结果表明:2个全长基因为顺向连接,全长基因串联体构建成功。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2010年23期）
刘宝全,王剑锋,范圣第[3]（2010）在《多肽基因串联体构建技术》一文中研究指出[目的]建立一种快速构建多肽基因串联体的方法。[方法]在多肽基因两侧加入同尾酶识别位点,利用同尾酶形成的粘性末端连接后不能被原酶识别与切割的特点,有效构建基因串联体。[结果]利用化学法合成的人表皮生长因子基因,有效构建并获得多肽基因的二联体与叁联体。[结论]利用同尾酶技术,可以快速有效地构建基因串联体。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2010年16期）
查笑君,马伯军,潘建伟,黄俊生[4]（2010）在《“自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体(英文)》一文中研究指出[目的]通过改进的"自身模板引物"PCR法构建Grb-AST7基因串联体。[方法]根据蟋蟀神经肽Grb-AST7氨基酸序列设计合成2条引物,运用改进的"自身模板引物"PCR法进行拼接。[结果]通过拼接,获得了全长570bp、含17个拷贝的Grb-AST7基因串联体。拼接条件以拼接时间20min,25μlPCR体系中含2μl模板引物较合适。[结论]该研究为下一步进行基因表达及其生物学活性分析奠定了基础。(本文来源于《Plant Diseases and Pests》期刊2010年02期）
查笑君,马伯军,潘建伟,黄俊生[5]（2010）在《“自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体》一文中研究指出[目的]通过改进的"自身模板引物"PCR法构建Grb-AST7基因串联体。[方法]根据蟋蟀神经肽Grb-AST7氨基酸序列设计合成2条引物,运用改进的"自身模板引物"PCR法进行拼接。[结果]通过拼接,获得了全长570bp、含17个拷贝的Grb-AST7基因串联体。拼接条件以拼接时间20min,25μlPCR体系中含2μl模板引物较合适。[结论]该研究为下一步进行Grb-AST7基因表达及其生物学活性分析奠定了基础。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2010年13期）
任慧子,韩跃武,冯惟萍,张庆华,陈建国[6]（2008）在《丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达》一文中研究指出目的:克隆和表达Alloferon1基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Alloferon1全基因的基础上,将Alloferon1基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构建的Alloferon1基因2串联体经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同.Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1载体后,重组菌经37℃诱导4h,SDS-PAGE分析结果显示,该串联体得到较高水平的表达.结论:Alloferon1基因2串联体的构建与表达均获得了成功.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2008年08期）
李丹[7]（2008）在《CEA迷你基因串联体基因疫苗的构建及其免疫学活性研究》一文中研究指出CEA作为肿瘤相关抗原,因其在正常组织中极有限的表达,以及广泛出现在上皮源性肿瘤细胞的过量表达而成为肿瘤生物治疗研究的热点。本研究选择了包含了两个CEA HTL表位(CEA625-639和CEA653-667)的迷你基因CEA625-667来制作串联体基因疫苗。首先利用CEA625-667短肽诱导的脾细胞增殖实验确认了CEA625-667在小鼠体内的抗原性之后,进一步应用同尾酶连接方法成功地构建了含有CEA625-667迷你基因叁串联体的DNA疫苗pcDNA-triCEA625-667。并通过动物实验对其免疫学活性进行研究。动物免疫研究的特异性淋巴细胞增殖实验及抗原特异性抗体的检测结果表明迷你基因疫苗可诱导辅助性T细胞增殖。Th1/ Th2类细胞因子含量测定结果分析提示了本研究所选用的高亲和力Th表位使被免疫机体T细胞趋向于Th1效应。且迷你基因叁倍体疫苗所引发的增殖效应以及释放细胞因子的水平均高于迷你基因一倍体,说明我们所采用的将目的基因多倍串联的抗原改造方式起到了增强免疫效应的作用。本研究探讨了迷你基因疫苗设计的新方法,对表位串联疫苗的构建及以HTL表位为基础的疫苗的功能进行了深入研究,为有关CEA疫苗的研制与临床前实验研究奠定了基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2008-04-01）
李丹,谭岩,刘力华,段秀梅,方艳秋[8]（2007）在《CEA迷你基因串联体肿瘤疫苗的构建》一文中研究指出目的:构建人癌胚抗原(CEA)的迷你基因串联体肿瘤疫苗。方法:通过PCR从人基因组中得到一段来源于CEA的DNA序列,其中包含两个编码辅助性T细胞(HTL)表位的迷你基因,插入pGEM-T easy载体后测序,再将目的基因以同尾酶连接的方式顺次定向亚克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,得到叁串联体,以PCR和酶切方法鉴定构建的重组真核表达质粒pcDNA3.0-triCEA625-667。结果:PCR和酶切结果表明,获得的目的基因与所选的基因片段CEA625-667中包含的碱基数量吻合,且带有正确的酶切位点。测序结果与GenBank登记完全相同。构建的重组真核表达质粒中含有正确编码的经同尾酶连接的目的基因片段叁倍体。结论:成功地构建了含有CEA625-667基因叁串联体的DNA疫苗。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2007年02期）
饶贤才,胡福泉[9]（2006）在《基因串联体的构建策略及其表达模式》一文中研究指出为了获取足够的DNA片段或得到基因的表达产物,常需要构建基因串联体,将目的基因按头尾相连随机串联起来,克隆入克隆载体以制备需要的目的基因片段或克隆入表达载体进行高效表达。串联的策略包括定向串联法、PCR扩增串联法、化学拼接法、同尾酶法等,不同方法构建的串联体基因表达模式也有一定差异。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2006年06期）
聂智毅[10]（2005）在《蟋蟀神经肽AST系列基因串联体在苏云金芽孢杆菌中的表达》一文中研究指出蟋蟀神经肽ASTs是从二点蟋蟀(Gryllus bimaculatus)脑中分离的一种保幼激素抑制素(allatostatin,AST),体外实验显示它能强烈抑制昆虫咽侧体合成保幼激素。蟋蟀神经肽AST基因富含GC序列,共编码15个AST多肽,C末端有一共同的序列Y/FXFGL/I/V。本文主要工作就是通过构建苏云金芽孢杆菌—大肠杆菌穿梭表达载体,将构建的神经肽AST系列基因导入苏云金芽孢杆菌进行表达分析,并在基因表达后利用表达产物进行虫效实验。 利用PCR的方法从携带cry3Aa基因及其启动子的苏云金芽孢杆菌—大肠杆菌穿梭载体pHT305A中扩增得到cry3Aa基因的启动子及cry3Aa基因与启动子的融合片段,克隆于苏云金芽孢杆菌—大肠杆菌穿梭载体pHT304中,构建成苏云金芽孢杆菌—大肠杆菌穿梭表达载体pHT3AP及苏云金芽孢杆菌—大肠杆菌穿梭融合表达载体pHT3AG。 AST_1、AST_2、AST_5及AST_(13)基因串联体连接至pHT3AP和pHT3AG的多克隆位点上导入苏云金芽孢杆菌无质粒突变株BMB171中进行表达分析,其中pHT3AG—AST_2和pHT3AG—AST_5能在苏云金芽孢杆菌无晶体突变株BMB171中表达目的蛋白cry3Aa—AST_2和cry3Aa—AST_5。比较重组质粒受体菌和空白质粒受体菌表达产物SDS-PAGE图谱,可见重组质粒受体菌比空白质粒受体菌多表达了一种蛋白,该蛋白质的分子量约93—94kD,与理论推导值94kD相近,应为目的蛋白。对cry3Aa—AST_2和cry3Aa—AST_5在苏云金芽孢杆菌表达系统表达的培养时间与表达量之间关系进行了研究,实验结果表明培养约60—72h受体菌中的目标蛋白量最高。 以表达的目标蛋白cry3Aa—AST_2和cry3Aa—AST_5对椰心叶甲进行虫效测试。把清水、pHT3AG空载体表达产物、表达了cry3Aa—AST_2和cry3Aa—AST_5融合蛋白的BMB171~+pHT3AG-AST_2和BMB171~+pHT3AG-AST~5通过浸叶法处理椰子树未展开的芯叶,喂食各龄椰心叶甲。从喂食表达蛋白的第二天起开始记录椰心叶甲取食量、体重和死亡数。结果表明BMB171~+pHT3AG-AST_2和BMB17l~+pHT3AG-AST_5对椰心叶甲低龄幼虫、高龄幼虫及成虫的致死效果不明显,对其食欲及生长发育也无明显影响。(本文来源于《华南热带农业大学》期刊2005-05-01）
基因串联体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了进一步研究鸡贫血病毒全长基因组感染性分子克隆和生物学特性,试验采用PCR方法,根据GenBank上已发表的鸡贫血病毒Cux-1株序列合成1对引物,利用高保真酶扩增鸡贫血病毒全长基因组DNA,并克隆到pB luescriptⅡSK(+)载体上,获得全长基因组DNA分子克隆。通过不完全酶切将2个全长基因连接,并进行酶切鉴定和测序分析。结果表明:2个全长基因为顺向连接,全长基因串联体构建成功。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因串联体论文参考文献
[1].李泰明,刘涛,张美由,马艳红,周哲.人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达[J].药物生物技术.2011
[2].李秀梅,郭立力,李颖,朱雅宁,石瑜.鸡贫血病毒全长基因串联体的构建[J].黑龙江畜牧兽医.2010
[3].刘宝全,王剑锋,范圣第.多肽基因串联体构建技术[J].安徽农业科学.2010
[4].查笑君,马伯军,潘建伟,黄俊生.“自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体(英文)[J].PlantDiseasesandPests.2010
[5].查笑君,马伯军,潘建伟,黄俊生.“自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体[J].安徽农业科学.2010
[6].任慧子,韩跃武,冯惟萍,张庆华,陈建国.丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达[J].第四军医大学学报.2008
[7].李丹.CEA迷你基因串联体基因疫苗的构建及其免疫学活性研究[D].吉林大学.2008
[8].李丹,谭岩,刘力华,段秀梅,方艳秋.CEA迷你基因串联体肿瘤疫苗的构建[J].吉林大学学报(医学版).2007
[9].饶贤才,胡福泉.基因串联体的构建策略及其表达模式[J].医学研究生学报.2006
[10].聂智毅.蟋蟀神经肽AST系列基因串联体在苏云金芽孢杆菌中的表达[D].华南热带农业大学.2005
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