导读:本文包含了酵母表达系统论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:酵母,系统,蛋白,载体,密码子,基因,质粒。
酵母表达系统论文文献综述
尹曼曼,楼觉人[1]（2019）在《利用毕赤酵母表达系统表达兔出血症病毒样颗粒及其免疫原性研究》一文中研究指出为研究毕赤酵母表达的兔病毒性出血症病毒(RHDV)病毒样颗粒(VLP)的免疫保护性,本研究将RHDV VP60的基因克隆到pPIC3.5K载体中,并导入毕赤酵母KM71菌株中,重组菌株经发酵和甲醇诱导,通过western blot检测目的蛋白的表达;透射电镜观察表达产物是否组装形成VLP;并通过动物试验评估VLP的免疫原性和攻毒保护效果。Western blot结果显示VP60蛋白能够在酵母内表达,电镜下观察到表达的VP60能够自发装配成大小均一的颗粒,与天然RHDV大小相当,约为30 nm～40 nm,表明表达的VP60可以自发组装成VLP。动物实验结果表明:表达的VLP与佐剂MONTANIDE GEL 01 PR混合后免疫实验兔,能够刺激实验兔产生保护性抗体,免疫后21 d攻毒,对实验兔的保护率达100%,且保护性抗体至少可以持续6个月。本研究利用毕赤酵母表达了RHDV的VLP,为研制RHDV亚单位疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年03期）
田晓娟[2]（2018）在《酵母表达系统研究概述》一文中研究指出目前常用的外源基因表达系统主要分为两类:原核表达系统和真核表达系统。前者主要包括大肠杆菌表达系统和枯草杆菌表达系统,后者一般包括酵母表达系统、昆虫/杆状病毒表达系统、哺乳动物细胞表达系统以及新兴的转基因植物表达系统等。在这众多的表达系统中酵母表达系统因其培养比较方便、简单、价格低廉、外源蛋白表达量高、表达的蛋白活性好、能进行翻译后修饰等诸多优点脱颖而出,成为目前最主要的外源基因表达系统。概述了常见的几种酵母表达系统的特点,并对发酵过程中影响外源蛋白表达量的因素做了探讨,以期为人们表达重组蛋白时选择合适的表达系统和获得高效的表达产物提供帮助。(本文来源于《陇东学院学报》期刊2018年01期）
胡晓悦,周峻岗,余垚,吕红,HU,Xiaoyu[3]（2017）在《马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究》一文中研究指出马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)作为一种食品安全级酵母,具有生长快,生物量高等特点,是一种新型的重组蛋白表达的宿主系统.启动子是供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,调控着转录的起始过程,直接影响基因的表达水平.本文通过易错PCR技术对马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子Pinu进行两轮突变,以阿魏酸酯酶(Est1E)作为报告基因,经筛选、鉴定获得了5个可以显着提高外源蛋白表达量的突变型启动子Pm1D81、Pm1F138、Pm2Q89、Pm2M73、Pm2X47,报告蛋白Est1E的酶活性是启动子改造前的2.31,2.65,5.01,5.40,5.43倍.随后测试了启动子Pm2X47对外源蛋白甘露聚糖酶和赤霉烯酮降解酶表达的影响,结果显示这两种酶的表达量均有提高,分别是启动子改造前的3.57倍和4.13倍.上述结果提示,改造后的菊粉酶启动子在提高外源蛋白表达水平方面具有一定的通用性,可作为新型候选表达元件,以提升马克斯克鲁维酵母重组表达外源蛋白的能力.(本文来源于《复旦学报(自然科学版)》期刊2017年04期）
蒋慧慧[4]（2017）在《毕赤酵母表达系统中启动元件的研究进展》一文中研究指出毕赤酵母是真核细胞常用表达系统之一,具有细胞密度高、纯化方法简单、转录后修饰功能完善等优点。作为重要的调控元件,表达系统中启动元件的功能强弱与表达效率的高低密切相关。目前,毕赤酵母表达系统中常用的启动元件分为叁类,分别是以p AOX为代表的甲醇诱导型、以p GAP为代表的非甲醇诱导型,还有一些新型工业酵母启动子也是理想的表达系统启动元件。充分了解这些酵母启动子的最新研究进展,可以为工业酵母表达系统的优化提供重要的发展思路。(本文来源于《巢湖学院学报》期刊2017年03期）
盛枝泉[5]（2017）在《红法夫酵母来源crtE、crtI、crtYB基因的克隆与表达系统构建》一文中研究指出β-胡萝卜素为类胡萝卜素之一,是橘黄色脂溶性物质。由于β-胡萝卜素良好的理化性质,β-胡萝卜素在食品、饲料、化妆品、医疗方面应用广泛,市场需求越来越旺盛,经济价值日益显着。β-胡萝卜素主要来源为化学合成和天然提取。天然提取的β-胡萝卜素安全性更高,应用更广泛。本文从红法夫酵母中扩增目的基因crtE、crtI、crtYB基因,将目的基因克隆进p426GPD中构建表达盒子GAP-crtE-CYCl、GAP-crtI-CYCl、GAP-crtYB-CYC1。之后进一步将表达盒子整合在pRS406表达载体中,构建最终表达载体。本实验实验结果是:将GAP-crtE-CYC1利用Kpnl和Clal双酶切,连接进入pRS406表达载体中,获得第一步表达载体pRS406-crtE载体。之后将pRS406-crtE用EcoRI酶切补平末端后和目的片段GAP-crtYB-CYCl平末端连接,获得pRS406-crtE-crtYB表达载体。之后利用Notl酶切平末端连接GAP-crtI-CYC1片段获得最终的pRS406-crtE-crtYB-crtl最终表达载体。(本文来源于《云南大学》期刊2017-05-01）
祁浩,刘新利[6]（2016）在《大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展》一文中研究指出由于DNA重组技术和蛋白组技术的发展与成熟,外源基因表达技术备受关注。其在生物、食品、工业以及医学领域发挥着举足轻重的作用。以原核生物细胞及真核生物细胞作为表达系统,进行目的基因序列的表达以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶制剂等是近年来发酵工业的新型领域。原核和真核表达系统是近年来研究和应用最广泛和最成熟的外源基因表达系统。对近年来关于大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展进行了综述。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2016年17期）
祁浩,刘新利[7]（2016）在《绿色荧光蛋白酿酒酵母表达系统的建立》一文中研究指出利用质粒YEplac112为骨架,在其多克隆位点Hind III和EcoRI之间插入水母绿色荧光蛋白(GFP)开放阅读框上下游约1 kb左右的DNA序列,得到YEplac112-CT质粒,在其多克隆位点Pst I和Bam HI之间插入750bp左右的GFP DNA序列,构建表达质粒YEplac112-C-GFP-T,以酿酒酵母W303为宿主,通过报告基因GFP验证了所构建的表达载体具有便捷筛选及良好的表达效果。(本文来源于《齐鲁工业大学学报(自然科学版)》期刊2016年03期）
随瑞瑞[8]（2016）在《海参溶菌酶在酿酒酵母表达系统的构建及分析》一文中研究指出研究发现,海参i-型溶菌酶具有糖苷酶活性以及广谱、非酶抑菌活性。海参溶菌酶通过水解细胞壁上N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺间的β-1,4糖苷键裂解细菌细胞,可以有效地抑制水产养殖以及食品加工过程中的有害细菌。本实验采用酿酒酵母MKP-0表达海参溶菌酶蛋白(Stichopus japonicus lysozyme,Sj Lys)。以实验室保存的克隆质粒p MD18-Sj Lys为模板,将His-tag标签克隆到海参溶菌酶基因的N末端,构建克隆载体p MD18-His6-Sj Lys。根据密码子偏好性分析,依次对Sj Lys蛋白的第69、77和95位精氨酸密码子通过定点突变进行优化,构建克隆载体p MD18-His6-Sj Lys((35)69,77,95)。通过Spe I/Bgl II双酶切,将His6-Sj Lys与His6-Sj Lys((35)69,77,95)目的片段分别连到酿酒酵母表达载体p ESC-LEU上,构建重组胞内表达载体p ESC-LEU-His6-Sj Lys和p ESC-LEU-His6-Sj Lys((35)69,77,95)。醋酸锂法将质粒分别转化至酿酒酵母MKP-0细胞。p ESC-LEU-His6-Sj Lys((35)69,77,95)/MKP-0通过2%半乳糖诱导60 h后,western blot检测成功表达Sj Lys目的蛋白。对半乳糖诱导时间进行梯度检测,结果发现诱导72 h后Sj Lys蛋白表达量最高。溶壁微球菌的牛津杯法抑菌实验和扫描电子显微镜观察的结果表明,酿酒酵母MKP-0细胞能成功表达具有抑菌活性的Sj Lys蛋白。但是,Sj Lys蛋白在酿酒酵母胞内的表达量比较低,所以又进行了酿酒酵母胞外分泌表达Sj Lys蛋白的研究。以实验室保存的含有MFα1信号肽的毕赤酵母表达载体p PIC9K为模板,PCR扩增MFα1片段并连接到p MD18-T上,得到克隆质粒p MD18-T-MFα1。经Not I/Spe I双酶切,将MFα1片段连接到p ESC-LEU-His6-Sj Lys((35)69,77,95)上。重组胞外分泌表达载体p ESC-LEU-MFα1-His6-Sj Lys((35)69,77,95)转化至酿酒酵母MKP-0中,构建海参溶菌酶胞外分泌表达系统。本实验首次在酿酒酵母中表达了具有活性的Sj Lys蛋白,为Sj Lys的生产提供了一种具有可行性的新方法。(本文来源于《大连工业大学》期刊2016-04-01）
陈鹭,千文,杨长青[9]（2016）在《重组人代谢酶酵母表达系统在新药体外代谢研究中的作用》一文中研究指出重组人代谢酶酵母表达系统是指利用基因重组技术将人的药物Ⅰ相代谢酶和Ⅱ相代谢酶基因转染至酵母细胞从而高效地获得单一的重组人代谢酶酵母。本文通过查询国内外文献总结了重组人代谢酶酵母表达系统在新药体外代谢研究中的作用。在新药研发的早期阶段,利用重组人代谢酶酵母系统,确定候选药物(或新药)的代谢途径及代谢酶亚型;评估候选药物(或新药)对代谢酶的诱导和抑制作用;研究代谢酶基因多态性相关的药物相互作用;筛选和制备候选药物(或新药)的新代谢物。重组人代谢酶酵母表达系统不仅为新药研发提供更加高效、便利的高通量新药筛选平台,也为候选药物的安全性评价提供物质基础。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2016年03期）
傅小蒙,孔令聪,裴志花,刘树明,马红霞[10]（2015）在《毕赤酵母表达系统优化策略概述》一文中研究指出毕赤酵母(Pichia pastor)表达系统是近年发展起来的一种高效表达外源蛋白的系统,利用该系统表达外源基因具有良好的应用前景。尽管毕赤酵母表达系统具有比较完备的基因表达调控机制和对真核基因表达产物的加工修饰能力,但由于基因本身及表达系统等诸多因素,仍然存在外源蛋白表达产量很低甚至不表达的情况。针对毕赤酵母表达系统这一因素,对表达载体的优化,毕赤酵母菌株优化及发酵条件优化进行了综述,以期为外源基因在毕赤酵母中的高效表达提供理论基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2015年10期）
酵母表达系统论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目前常用的外源基因表达系统主要分为两类:原核表达系统和真核表达系统。前者主要包括大肠杆菌表达系统和枯草杆菌表达系统,后者一般包括酵母表达系统、昆虫/杆状病毒表达系统、哺乳动物细胞表达系统以及新兴的转基因植物表达系统等。在这众多的表达系统中酵母表达系统因其培养比较方便、简单、价格低廉、外源蛋白表达量高、表达的蛋白活性好、能进行翻译后修饰等诸多优点脱颖而出,成为目前最主要的外源基因表达系统。概述了常见的几种酵母表达系统的特点,并对发酵过程中影响外源蛋白表达量的因素做了探讨,以期为人们表达重组蛋白时选择合适的表达系统和获得高效的表达产物提供帮助。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酵母表达系统论文参考文献
[1].尹曼曼,楼觉人.利用毕赤酵母表达系统表达兔出血症病毒样颗粒及其免疫原性研究[J].中国预防兽医学报.2019
[2].田晓娟.酵母表达系统研究概述[J].陇东学院学报.2018
[3].胡晓悦,周峻岗,余垚,吕红,HU,Xiaoyu.马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究[J].复旦学报(自然科学版).2017
[4].蒋慧慧.毕赤酵母表达系统中启动元件的研究进展[J].巢湖学院学报.2017
[5].盛枝泉.红法夫酵母来源crtE、crtI、crtYB基因的克隆与表达系统构建[D].云南大学.2017
[6].祁浩,刘新利.大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展[J].安徽农业科学.2016
[7].祁浩,刘新利.绿色荧光蛋白酿酒酵母表达系统的建立[J].齐鲁工业大学学报(自然科学版).2016
[8].随瑞瑞.海参溶菌酶在酿酒酵母表达系统的构建及分析[D].大连工业大学.2016
[9].陈鹭,千文,杨长青.重组人代谢酶酵母表达系统在新药体外代谢研究中的作用[J].中国新药杂志.2016
[10].傅小蒙,孔令聪,裴志花,刘树明,马红霞.毕赤酵母表达系统优化策略概述[J].中国生物工程杂志.2015
论文知识图
