INH-α对BMP9诱导间充质干细胞成骨分化的作用

论文摘要

为了研究抑制素α亚基（inhibinα-subunit INH-α）对骨形态发生蛋白9 （bone morphogenetic protein9, BMP9）诱导的间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）成骨分化的影响,本研究采用细胞化学染色法检测第3天、第5天、第7天细胞中碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性的变化。利用RT-PCR和Western blotting检测细胞中的成骨分化早期标志物（Runx2）和晚期标志物（OPN）的mRNA含量及蛋白表达水平。茜素红S染色法检测第21天细胞中的钙盐沉积变化。发现BMP9组ALP活性明显增高,INH-α组ALP活性与对照组相比无明显变化,但联合运用BMP9和INH-α组ALP活性较BMP9组明显降低。此外,BMP9组Runx2和OPN的mRNA含量和蛋白表达水平明显增高,而联用BMP9和INH-α组中的Runx2和OPN水平较BMP9组显著下降（p<0.01）。同样,在茜素红S染色实验中,BMP9组钙盐结节明显增多,染色深;而在联合运用BMP9和INH-α组钙盐结节较BMP9组明显减少,染色变浅。说明INH-α能够抑制BMP9诱导间充质干细胞成骨分化作用。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 INH-α对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶 （alkaline phosphatase, ALP） 活性的影响
•   1.2 INH-α对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化过程中的早期标志物变化情况的影响
•   1.3 INH-α对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化过程中晚期标志物变化情况的影响
•   1.4 INH-α对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化过程中钙盐沉积的影响
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 细胞培养与试剂
•   3.2 GFP、BMP9和INH-α重组腺病毒的构建
•   3.3 实验设计和分组
•   3.4 ALP染色
•   3.5 细胞RNA提取及RT-PCR实验
•   3.6 Western blotting实验
•   3.7 茜素红S染色
•   3.8 统计学分析
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 黄敏,成亚琳,曾继涛,刘宏

关键词: 抑制素亚基,骨形态发生蛋白,间充质干细胞,成骨分化

来源: 基因组学与应用生物学 2019年07期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 重庆医科大学附属第一医院生殖健康与不孕症中心

基金: 重庆市科学技术委员会资助项目(No.cstc2012jjA10113)资助

分类号: R329.2

DOI: 10.13417/j.gab.038.003396

页码: 3396-3401

总页数: 6

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