导读:本文包含了新疆出血热论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:出血热,新疆,病毒,基因,核蛋白,蛋白,克里米亚。
新疆出血热论文文献综述
郑夔,袁帅,黎东红,丁国允,李小波[1]（2016）在《新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR检测方法的假病毒阳性对照品制备》一文中研究指出目的制备安全、稳定的新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR检测阳性对照品。方法人工合成含实时荧光RT-PCR扩增片段的新疆出血热病毒核苷酸序列,连接入慢病毒载体,将重组慢病毒载体与慢病毒包装载体共转染293T细胞,培养48 h后采用实时荧光RT-PCR方法检测假病毒包装情况,随后将包装成功的假病毒颗粒加核酸保护剂制备成阳性对照品,并进行稳定性试验。结果重组慢病毒载体与慢病毒包装载体共转染293T细胞后,将收集到的细胞培养上清采用实时荧光RT-PCR进行检测,结果显示10、100、1 000、10 000倍4个倍比稀释度扩增后所得的Ct值分别为13、19、25、33,显示含高浓度的假病毒颗粒。取经1 000倍稀释后制备的阳性对照品于37℃孵箱中放置0、3、7、15、21和30 d后,提取的RNA经实时荧光RT-PCR检测,所得Ct值在25~28之间,表明阳性对照品有较高的热稳定性。结论本研究通过慢病毒包装技术制备的假病毒颗粒,是新疆出血热病毒荧光RT-PCR核酸检测过程中理想的阳性对照品。(本文来源于《华南预防医学》期刊2016年01期）
汪梅芳,周昭瑞,李阳,寇春,达尔肯·托肯[2]（2015）在《新疆出血热病毒重组核蛋白及糖蛋白片段能诱导小鼠免疫应答》一文中研究指出目的研究重组表达的新疆出血热病毒(XHFV)核蛋白和糖蛋白截短片段在刺激机体免疫应答中的作用。方法采用基因重组技术和亲和层析技术对XHFV截短的核蛋白(NP2)、糖蛋白片段(Gc和Gn)进行表达和纯化,并通过蛋白免疫及核酸初次免疫、蛋白加强免疫的方式免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测鼠血清抗体效价,采用T淋巴细胞增殖试验检测细胞免疫应答的效果,对上述表达产物刺激小鼠免疫应答的作用进行初步评价。结果利用原核表达系统成功表达纯化出XHFV核蛋白和糖蛋白截短片段。重组蛋白免疫BALB/c小鼠后能刺激机体产生Ig G(效价为1∶12 800以上),并能与相应的抗XHFV核蛋白及糖蛋白的多克隆抗体发生特异性反应。各组均能有效地激发较强的细胞免疫应答,其中p VAX1-Gc联合r Gc实验组小鼠脾脏淋巴细胞增殖明显,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论获得的重组XHFV核蛋白、糖蛋白片段能有效刺激小鼠的体液和细胞免疫应答。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2015年02期）
李阳[3]（2014）在《新疆出血热病毒M、S基因DNA疫苗的免疫效果及糖蛋白抗原表位的初步分析》一文中研究指出克里米亚刚果出血热(Crimean—Congo hemorrhagic fever，CCHF)是CCHF病毒引起的一种蜱传出血热传染病，病死率高达50％，分布在世界叁十多个国家，已成为危害人类身体健康的重要传染病之一。在我国于1965年分离得到该病毒，又称新疆出血热病毒(Xinjiang hemorrhagic fever，XHFV)，目前已分离到多株病毒,但一直未得到对其切实有效的诊断方法及治疗手段。XHFV S基因编码核蛋白（nucleoprotein，NP）是病毒诱导机体发生免疫反应的主要抗原，而M基因编码的糖蛋白（glycoproteins，GP）在CCHFV的感染与致病过程中起着重要作用。因此，研究XHFV核蛋白NP及糖蛋白GP（包括Gn，Gc）片段的抗原性和免疫原性对于加快我国XHFV诊断技术和疫苗的研究具有重要推动作用。本研究构建了XHFVS和M基因重组DNA疫苗并检测了其免疫效果；同时，利用改良生物合成肽法将XHFV79121株糖蛋白Gc片段的截短的16肽基因构建到原核表达载体pXXGST-1上进行诱导表达，用制备的抗XHFV糖蛋白兔多抗对多肽进行抗原活性的免疫印迹(Western Blot)分析，确定了Gc上可能存在的抗原表位。本研究主要取得了以下结果：1.为筛选XHFV核蛋白（NP）的优势抗原表位，通过诱导表达及纯化获得YL04057株的6种融合蛋白NP（aa1-482）、NP2（aa170-305）、NP2-（caa235-305）、NP2-c-1（aa237-256）、NP2-c-2（aa250-265）、NP2-c-3（aa260-276），分别用重组蛋白对羊血清进行间接ELISA法检测，以间接免疫荧光法（IFAT）检测结果为参照标准进行对比，结果发现，NP2蛋白的敏感性为73.3%，特异性为100%，总符合率为87.9%，NP2-c蛋白的敏感性为66.7%，特异性为94.4%，总符合率为81.8%。结果表明NP2和NP2-c的抗原性较强，提示这两种抗原可以作为研发新型XHF诊断试剂的候选抗原表位。2.选取YL04057株核蛋白全长NP（1-482aa）及抗原性较强的基因片段NP2（170-305aa）与糖蛋白（Gn，Gc）基因片段，分别或嵌合构建至真核表达载体PVAX1上，获得5种重组质粒：pVAX1-NP，pVAX1-NP2，pVAX1-Gn，pVAX1-Gc及pVAX1-Gc-NP2。以pVAX1为对照组，分别用空载体和重组质粒免疫Balb/c小鼠，并用ELISA法、淋巴细胞增殖实验以及细胞因子水平的检测基因免疫小鼠后产生的应答效果。结果显示，pVAX1-NP2组鼠的血清抗体效价能够达到1：6400；pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2组与对照组相比，小鼠脾脏T淋巴细胞增殖效果明显（P<0.01），这两个实验组的IFN-γ表达水平也很高，可以达到865.15pg/mL及1727.205pg/mL，与对照组相比具有极显着的差异(P<0.01)；pVAX1-NP2及pVAX1-Gn组IL-4的表达水平为19.11pg/mL和20.07pg/mL，与对照组的9.35pg/mL相比也有显着差异(P<0.05)。pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好，提示这两个重组基因片段可作为XHFV的候选DNA疫苗。3.对XHFV79121株糖蛋白（Gc）氨基酸序列进行生物信息学分析，以α螺旋，β折叠，转角，疏水性，松散型及B细胞线性抗原表位的预测等多项指标设计10个含有预测抗原表位的16肽，合成后分别构建至pXXGST-ST载体上。为制备兔抗多克隆抗血清，将YL04057株编码糖蛋白M基因C端截短成Gc1及Gc2基因片段，构建至pET-28a原核表达载体，并诱导表达纯化制备兔抗Gc1及Gc2多克隆抗体。利用多抗通过Western blot法对重组表达的16肽进行抗原性分析，结果显示，其中6个16肽能够与抗血清特异性结合，表明获得了6个具有抗原表位的多肽（Gc116-131，Gc228-243，Gc362-377，Gc370-385，Gc505-520，Gc513-528）。通过保守性分析，发现首次鉴定出的XHFV糖蛋白的6个抗原表位具有较强的保守性（达到81.25%以上），这为XHFV检测试剂盒及表位肽疫苗的研制提供了基础资料。(本文来源于《新疆大学》期刊2014-05-01）
孙素荣,郝建梅,雒涛,王启果,张渝疆[4]（2014）在《塔里木河流域新疆出血热自然疫源地生态系统多样性与出血热流行相关性分析(Ⅱ)》一文中研究指出目的了解并掌握塔里木河流域新疆出血热自然疫源地生态系统主要宿主和媒介的群落构成,及其与新疆出血热流行的相关性。方法根据塔里木河流域地理环境特征,在上、中、下游3个区段设立调查研究样方,采集家畜、啮齿动物和蜱类样本,采用生态学方法分析不同生态景观下宿主和媒介的群落结构组成和特征,检测蜱类样本的新疆出血热病毒携带率和家畜抗体携带率,统计分析流行病学的相关性。结果塔里木河流域新疆出血热自然疫源地啮齿动物和蜱类群落组成简单,啮齿动物7种,以子午沙鼠为主,占73.6%,蜱类3种,以亚洲璃眼蜱为主,占98.4%以上;不同地理生态景观上,干旱、半干旱的沙质盐碱地是亚洲璃眼蜱和啮齿动物分布的最优生态景观;空间分布上,亚洲璃眼蜱在优生景观中的数量由上游至下游逐步增加的变化趋势一致,游离蜱指数分别为37.0、44.7和64.7;塔里木河流域上、中、下游3个区段羊血清抗新疆出血热病毒抗体阳性率由13.2%增加至43.1%,自然界中亚洲璃眼蜱病毒分离率由零增加至6.9%,亚洲璃眼蜱指数和羊血清CCHFV(克里米亚-刚果出血热病毒)阳性率呈正相关(r=0.992)。结论塔里木河流域新疆出血热自然疫源地呈现丰富的多样性,其自然界新疆出血热流行强度与疫源地宿主媒介及植被构成的丰富度密切相关,可因自然界中亚洲璃眼蜱指数的不同分为不同的流行区。(本文来源于《疾病预防控制通报》期刊2014年02期）
李阳,刘东亮,汪梅芳,武勇凯,王咏星[5]（2014）在《重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价》一文中研究指出目的选取新疆出血热病毒M基因(编码糖蛋白Gn,Gc)和S基因(编码核蛋白NP)部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果。方法将NP(aa1~482)、NP2(aa170~305)和糖蛋白Gn(aa529~820)、Gc(aa1050~1697)片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价。结果经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达(865.15±6.29)pg/mL及(1727.21±33.93)pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为(19.11±1.20)pg/mL和(20.07±1.67)pg/mL,都显着高于对照组的(9.35±1.82)pg/mL(P<0.05)。结论成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体。各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2014年04期）
刘东亮,李阳,赵晶,吴婷,孙素荣[6]（2013）在《新疆出血热病毒核蛋白多克隆抗体的制备及其免疫学评价》一文中研究指出目的原核细胞中表达、纯化新疆出血热病毒BA88166毒株核蛋白(NP)并制备及鉴定抗NP蛋白的多克隆抗体。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出BA88166毒株S基因的cDNA片段,将其构建到原核表达载体pET-32a上,形成重组原核表达质粒pET-88166S。构建好的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,经镍柱亲和层析法纯化NPHis融合蛋白,SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量(M r)。用该纯化蛋白免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot法检测血清效价和特异性。结果双酶切鉴定和DNA测序证实构建的pET-88166S重组表达载体正确,目的基因序列与GenBank中公布的序列一致,在E.coli BL21中表达的NP-His融合蛋白经SDS-PAGE分析,其M r约为66 000。ELISA检测抗体效价高于1∶25 600,蛋白免疫印迹实验结果表明抗体能特异性识别新疆出血热病毒YL04057毒株的NP蛋白及其截短蛋白。结论成功获得新疆出血热病毒NP-His融合蛋白,得到了特异性兔抗NP蛋白多克隆抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2013年08期）
苏锦坤,师永霞,郑夔,李小波,黄吉城[7]（2012）在《新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究》一文中研究指出目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2012年05期）
李冰,木合塔,王启果,王信惠,阿布力克木[8]（2011）在《药物驱蜱对新疆出血热流行抑制作用的现场实验研究》一文中研究指出目的探讨药物驱蜱对新疆出血热(XHF)在家畜中流行的抑制效果。方法采用药物驱蜱方式对塔里木盆地疫区内的羊群进行对比实验研究。结果实验组羔羊在服用驱蜱药物阿维菌素后,羔羊体外寄生蜱的染蜱率为55.0%,蜱指数为1.0,而未服用阿维菌素的对照组感染率为100%,蜱指数为11.2,实验组羔羊体外寄生蜱的感染率和蜱指数分别较对照组低45%和10.2;实验6个月后,实验组克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)抗体阳性率为22.4%,显着低于对照组(45.9%),与实验组在实验前的CCHFV抗体阳性率(23.7%)基本一致。结论 XHF流行地区羔羊服用驱蜱药物阿维菌素可阻碍蜱类对羔羊的侵袭,抑制XHF在羔羊中的流行。(本文来源于《中国媒介生物学及控制杂志》期刊2011年01期）
师永霞,相大鹏,孟逊,李小波,洪烨[9]（2009）在《新疆出血热病毒核蛋白NP的原核表达及其单克隆抗体的研制》一文中研究指出目的:利用原核表达系统表达新疆出血热病毒(CCHFV)核衣壳蛋白NP,并通过杂交瘤细胞技术制备其单克隆抗体。方法:利用pET大肠杆菌系统表达具有抗原性的重组NP蛋白,经包涵体纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合Western blot和免疫荧光试验对抗体的特异性进行鉴定,筛选与NP蛋白有强结合能力且配对结果较好的一对单克隆抗体。结果:经间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,获得2株能稳定分泌抗NP蛋白抗体、配对效果较好的杂交瘤细胞株,将其命名为10B12和3G5。Western blot试验证明它们免疫小鼠后腹水中的单克隆抗体能特异性识别NP蛋白,免疫荧光试验显示两个单克隆抗体均与表达NP蛋白的杆状病毒感染的昆虫细胞抗原片有特异性荧光。双抗体间接ELISA表明它们可检测的重组NP蛋白的线性范围为1~20 ng,检测灵敏度为1 ng。结论:成功获得了针对NP蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究新疆出血热免疫胶体金的研发奠定必要的物质基础。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2009年06期）
相大鹏,师永霞,李小波[10]（2009）在《新疆出血热的研究进展》一文中研究指出克里米亚-刚果出血热(Crimean Congo hemorrhagic fever,CCHF)于1944年发现于俄国的克果米亚,它是由克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)引起的,是一种流行于中国新疆南部、俄国北部、中东、南部欧亚大陆及非洲撒哈拉地区的烈性传(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2009年01期）
新疆出血热论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究重组表达的新疆出血热病毒(XHFV)核蛋白和糖蛋白截短片段在刺激机体免疫应答中的作用。方法采用基因重组技术和亲和层析技术对XHFV截短的核蛋白(NP2)、糖蛋白片段(Gc和Gn)进行表达和纯化,并通过蛋白免疫及核酸初次免疫、蛋白加强免疫的方式免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测鼠血清抗体效价,采用T淋巴细胞增殖试验检测细胞免疫应答的效果,对上述表达产物刺激小鼠免疫应答的作用进行初步评价。结果利用原核表达系统成功表达纯化出XHFV核蛋白和糖蛋白截短片段。重组蛋白免疫BALB/c小鼠后能刺激机体产生Ig G(效价为1∶12 800以上),并能与相应的抗XHFV核蛋白及糖蛋白的多克隆抗体发生特异性反应。各组均能有效地激发较强的细胞免疫应答,其中p VAX1-Gc联合r Gc实验组小鼠脾脏淋巴细胞增殖明显,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论获得的重组XHFV核蛋白、糖蛋白片段能有效刺激小鼠的体液和细胞免疫应答。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
新疆出血热论文参考文献
[1].郑夔,袁帅,黎东红,丁国允,李小波.新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR检测方法的假病毒阳性对照品制备[J].华南预防医学.2016
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[9].师永霞,相大鹏,孟逊,李小波,洪烨.新疆出血热病毒核蛋白NP的原核表达及其单克隆抗体的研制[J].中国卫生检验杂志.2009
[10].相大鹏,师永霞,李小波.新疆出血热的研究进展[J].中国医药生物技术.2009
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