副鸡禽杆菌外膜囊泡提取及成分分析

论文摘要

为研究副鸡禽杆菌外膜囊泡(OMVs)的构成,提取A型副鸡禽杆菌的OMVs,纯化并透射电镜观察其形态结构,检测其内毒素含量和DNA含量,分析其是否具有血凝活性,测定OMVs蛋白含量,并用质谱法分析了OMVs的蛋白组成成分。结果显示,副鸡禽杆菌的OMVs呈球形、泡状,直径为20 nm～300 nm,含有内毒素和少量核酸物质。该OMVs不能凝集鸡红细胞,Western blot结果表明,OMVs蛋白与该菌外膜蛋白单克隆抗体有阳性反应,构成OMVs的蛋白分子质量大多集中于65 ku和13 ku处,蛋白成分主要有ATP依赖性RNA解旋酶等多种功能酶、铁链霉素B受体、膜蛋白等结构成分和一些未知功能的假定蛋白等,为进一步分析副鸡禽杆菌外膜囊泡在致病和免疫方面的作用奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 主要仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 外膜囊泡的提取及纯化
•     1.2.2 OMVs透射电镜形态学观察
•     1.2.3 BCA法检测OMVs蛋白浓度
•     1.2.4 鲎试剂终点显色法检测OMVs内毒素含量
•     1.2.5 OMVs核酸检测
•     1.2.6 OMVs蛋白SDS-PAGE及Western blot检测
•     1.2.7 血凝试验（HA）
•     1.2.8 OMVs质谱分析
•     1.2.9 数据统计分析
• 2 结果
•   2.1 OMVs电子显微结构
•   2.2 OMVs蛋白浓度检测
•   2.3 OMVs中LPS浓度检测
•   2.4 OMVs中核酸检测
•   2.5 OMVs的SDS-PAGE及Western blot分析
•   2.6 OMVs的血凝试验
•   2.7 OMVs的质谱分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 梅晨,孙爱华,李淑芳,龚玉梅,王宏俊

关键词: 副鸡禽杆菌,外膜囊泡,质谱分析

来源: 动物医学进展 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所

基金: 国家重点研发计划专项(YFD0500705),北京市农林科学院改革与发展项目(XMS201707,XMS201601,XMS201902)

分类号: S852.618

DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.11.009

页码: 44-49

总页数: 6

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