白桦酸通过miR-508-5p/CDCA5通路调控结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

论文摘要

目的:研究白桦酸对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在的分子机制。方法:用白桦酸5、10、20 mg/L分别处理结直肠癌细胞HT-29,qRT-PCR检测细胞中miR-508-5p及CDCA5 mRNA的表达,Western blot检测CDCA5、增殖相关蛋白CyclinD1和p21、迁移侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,MTT法测定HT29细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告系统验证miR-508-5p与CDCA5的调控关系。结果:白桦酸可促进结直肠癌细胞HT29中miR-508-5p表达,抑制CDCA5表达,抑制HT29的侵袭、迁移和增殖,且其作用呈现显著的浓度依赖性;过表达miR-508-5p和抑制CDCA5表达均可抑制HT29细胞增殖、迁移和侵袭;双荧光素酶报告系统结果显示,miR-508-5p靶向负调控CDCA5的表达,抑制miR-508-5p逆转了白桦酸对HT29细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:白桦酸通过miR-508-5p靶向CDCA5基因抑制HT29细胞的增殖、迁移和侵袭。白桦酸对结直肠癌具有潜在治疗作用。

论文目录

• 1 材料与仪器
•   1.1 细胞株
•   1.2 药物与试剂
•   1.3 主要仪器
• 2 方法
•   2.1 细胞培养
•   2.2 药物处理
•   2.3 细胞转染
•   2.4 qRT-PCR检测RNA的表达
•   2.5 MTT实验检测细胞增殖
•   2.6 Transwell实验检测细胞迁移和侵袭
•     2.6.1 迁移实验:
•     2.6.2 侵袭实验:
•   2.7 双荧光素酶报告实验
•   2.8 Western blot
•   2.9 统计学处理
• 3 结果
•   3.1 白桦酸对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移和侵袭的影响
•   3.2 白桦酸对结直肠癌HT29细胞CyclinD1、p21、MMP2、MMP9蛋白表达的影响
•   3.3 白桦酸对结直肠癌HT29细胞中miR-508-5p及CDCA5 mRNA和蛋白表达的影响
•   3.4 miR-508-5p过表达对结直肠癌HT29细胞的影响
•     3.4.1 miR-508-5p过表达对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移、侵袭的影响:
•     3.4.2 miR-508-5p过表达对结直肠癌HT29细胞CyclinD1、p21、MMP2、MMP9蛋白表达的影响:
•   3.5 抑制CDCA5表达对结直肠癌HT29细胞的影响
•     3.5.1 抑制CDCA5表达对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移、侵袭的影响:
•     3.5.2 抑制CDCA5表达对结直肠癌HT29细胞CyclinD1、p21、MMP2、MMP9蛋白表达的影响:
•   3.6 miR-508-5p对CDCA5表达的靶向调控
•   3.7 抑制miR-508-5p表达后白桦酸（20 mg/L）对结直肠癌细胞HT29的影响
•     3.7.1 抑制miR-508-5p表达后白桦酸对结直肠癌细胞HT29增殖、迁移和侵袭的影响:
•     3.7.2 抑制miR-508-5p表达后白桦酸对结直肠癌细胞HT29中CyclinD1、p21、MMP2、MMP9蛋白表达的影响:
• 4 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 关亚超,席作武,高宗跃,王凯,马丙旭

关键词: 结直肠癌,白桦酸,增殖,迁移,侵袭

来源: 中药材 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 河南中医药大学第二临床医学院,河南中医药大学第二附属医院

分类号: R285.5

DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2019.12.036

页码: 2936-2941

总页数: 6

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