单增李斯特标准菌NrdD基因插入突变株的构建

论文摘要

利用同源重组的原理构建了单增李斯特氏菌NrdD基因插入突变株,从大肠杆菌基因组中分别扩增出NrdD基因上下游同源臂,与pKSV7质粒相连,构建成功重组突变载体pKSV7-D1D2,将其电转入单增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板筛选得到NrdD基因插入突变株,并对突变菌株序列测定,证明回复突变株构建成功。该突变株可在严格无氧环境中生存,为进一步研究NrdD基因功能、单增李斯特的致病机制和疫苗载体的研发奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株与质粒
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 引物及测序
•   1.2 方法
•     1.2.1 质粒构建
•     1.2.2 重组质粒pKSV7-D1D2的构建
•     1.2.3 电转
•     1.2.4 NrdD插入突变菌株的筛选
•     1.2.5 NrdD回复菌株的鉴定-细菌RNA的抽提和RT-PCR
• 2 结果与分析
•   2.1 插入突变菌株的构建及筛选
•   2.2 pKSV7-D1D2序列验证
• 3 小结与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 舒加乐,郑琳琳

关键词: 单增李斯特菌,基因,突变株,同源重组

来源: 湖北畜牧兽医 2019年05期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 上海交通大学实验动物中心

分类号: S852.61

DOI: 10.16733/j.cnki.issn1007-273x.2019.05.001

页码: 5-7

总页数: 3

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