TLR4基因敲除小鼠对噪声性耳蜗损伤的反应

论文摘要

目的揭示Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）基因缺失对噪声性耳蜗感觉细胞损伤,听觉功能障碍和耳蜗免疫活力的影响作用,探讨噪声性耳蜗损伤的免疫炎性机制。方法将TLR4基因敲除（TLR4 KO）小鼠接触持续噪声暴露（1-7kHz,120dB SPL）1小时,以噪声暴露的野生型（WT）小鼠为对照,检测噪声暴露前和噪声暴露后25天四个频率短纯音（4 kHz、8 kHz、16 kHz和32 kHz）诱发的小鼠双耳ABR阈值。噪声暴露后1天,25天处死动物,解剖取双侧耳蜗。采用白细胞共同抗原（CD45）荧光免疫抗体标记噪声暴露前和噪声暴露后1天耳蜗基底膜免疫细胞,鬼笔环肽（phalloidin）染色噪声暴露前和噪声暴露后25天耳蜗基底膜毛细胞纤毛、表皮板的丝状肌动蛋白。荧光显微镜下观察噪声暴露后TLR4 KO小鼠和WT小鼠耳蜗基底膜组织的巨噬细胞、单核细胞和毛细胞形态变化,计数耳蜗基底膜外毛细胞的缺失数目。结果噪声暴露后1天,WT和TLR4 KO小鼠耳蜗基底膜均呈现单核细胞渗入。噪声暴露后25天,不同频率短纯音诱发的TLR4 KO小鼠ABR阈移和耳蜗基底膜外毛细胞缺失数目均低于WT小鼠（F=71.590, df=1,90, P<0.001; Tukey test, P<0.001）,（F=8.996, df=1,17, P=0.008; Tukey test, P=0.008）。结论噪声暴露后TLR4基因缺失没有阻止单核细胞渗入耳蜗基底膜,但减轻噪声暴露后耳蜗感觉细胞和听功能损伤的程度。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验动物
•   1.2 实验步骤
•   1.3 听功能检测
•   1.4 噪声暴露
•   1.5 耳蜗毛细胞丝状肌动蛋白染色
•   1.6 免疫细胞的荧光标记
•   1.7 显微镜观察及图像处理
•   1.8 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 生理条件下Toll样受体4基因敲除没有影响小鼠耳蜗基底膜感觉细胞的生存
•   2.2 噪声暴露后TLR4 KO小鼠听功能下降幅度小于WT小鼠
•   2.3 噪声暴露后TLR4 KO小鼠耳蜗外毛细胞损伤程度轻于WT小鼠
•   2.4 TLR4基因缺失没有阻止噪声暴露后单核细胞渗入耳蜗
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨卫平,许阳,胡博华,杨仕明

关键词: 基因敲除小鼠,噪声,耳蜗,毛细胞,单核细胞

来源: 中华耳科学杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学,眼科与耳鼻咽喉科

单位: 解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉研究所,美国纽约州立布法罗大学听力及聋病研究中心,解放军总医院呼吸科

基金: 国家自然基金资助项目(No:30973304),美国NIH资助项目(NIDCD RO1DC010154)~~

分类号: R764;R-332

页码: 947-952

总页数: 6

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