NFκB通路与长链非编码RNA NONHSAG057461.1在PM2.5诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应中的作用

论文摘要

目的研究lncRNAs在大气PM2.5诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）炎症反应中的作用及其分子机制。方法HUVECs经100、300μg/ml的PM2.5染毒48 h后,经过非长链非编码RNA测序得到与炎症相关的lncRNAs,用实时荧光定量PCR分析法（RT-qPCR）验证测序结果。运用胞浆胞核分离试剂盒进行NONHSAG057461.1基因亚细胞定位。采用RNA干扰技术敲低HUVECs中NONHSAG057461.1的表达后,以RT-qPCR检测干扰后IL-1β的表达水平,用NFκB特异性阻断剂BAY11-7082（10μmol/L）处理细胞后检测NONHSAG057461.1的表达水平。结果验证测序结果表明PM2.5可以诱导HUVECs中NONHSAG057461.1上调,且与染毒剂量有一定的剂量-效应关系;干扰NONHSAG057461.1后再用PM2.5染毒,IL-1βmRNA的水平下降。BAY11-7082（10μmol/L）预处理细胞后,发现NONHSAG057461.1的m RNA表达下降,说明NFκB能够调控该基因的表达。结论 NFκB通路可能参与长链非编码RNA-NONHSAG057461.1介导的暴露于PM2.5的人脐静脉内皮细胞炎症反应,具体的机制尚需进一步探索。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 颗粒物样品的采集
•     1.2.2 颗粒物的处理
•     1.2.3 HUVECs培养
•     1.2.4 样本lncRNA测序以及生物信息学分析
•     1.2.5 IL-6和IL-1β表达的ELISA检测
•     1.2.6 lncRNA胞浆胞核定位实验
•     1.2.7 si RNA敲低实验
•     1.2.8 转染后炎性因子的表达检测
•     1.2.9阻断NFκB信号通路后NONHSAG057461.1表达变化
•   1.3统计学分析
• 2 结果
•   2.1 生物信息学分析
•   2.2 NONHSAG057461.1的胞浆胞核定位
•   2.3 siRNA敲低实验
•   2.4 阻断NFκB信号通路后lncRNA表达变化
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周彩兰,谭艺,王钰钰,邹云锋,廖芳萍,王秋玲,彭苏娟,彭晓武

关键词: 人脐静脉内皮细胞,炎症反应

来源: 环境与健康杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 环境科学与资源利用,预防医学与卫生学

单位: 广西医科大学公共卫生学院,环境保护部华南环境科学研究所国家环境保护环境污染健康风险评价重点实验室,武汉科技大学医学院公共卫生学院

基金: 广东省自然科学基金(2014A030313714),国家自然科学基金面上项目(21477045),广东省科技计划项目(2017A020216026)

分类号: R12;X513

DOI: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2019.04.002

页码: 288-292

总页数: 5

文件大小: 281K

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