Pax6基因在小鼠骨髓间充质干细胞中的过表达

论文摘要

目的体外研究Pax6基因在小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达情况。方法利用全骨髓贴壁法体外分离培养小鼠BMSCs,将包装成功的Pax6慢病毒表达颗粒感染BMSCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用细胞免疫荧光染色、蛋白印迹技术及反转录PCR（RT-PCR）技术检测Pax6的表达情况,流式细胞术检测Pax6/BMSCs阳性细胞的比例。结果 Pax6成功在BMSCs内过表达,流式结果显示Pax6阳性率超过90%。结论建立Pax6稳定表达的细胞株Pax6/BMSCs可为下一步其在眼表组织工程方面的研究奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 小鼠BMSCs分离与培养
•     1.2.2 小鼠BMSCs的表面分子鉴定
•     1.2.3 小鼠BMSCs的成骨诱导分化鉴定
•     1.2.4 G418对BMSCs的毒性实验
•     1.2.5 Pax6慢病毒感染BMSCs及鉴定
•     1.2.6 Pax6阳性细胞检测
• 2 结果
•   2.1 小鼠BMSCs体外培养的形态学观察及鉴定
•   2.2 小鼠BMSCs表面分子的表达
•   2.3 免疫荧光染色检测Pax6在BMSCs的表达
•   2.4 RT-PCR检测Pax6在BMSCs的表达
•   2.5 Western blot检测Pax6在BMSCs的表达
•   2.6 Pax6/BMSCs细胞株阳性细胞率检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 方可心,丁玲,辛颖,马静怡,李倩,高杰

关键词: 骨髓间充质干细胞,筛选,流式细胞术

来源: 局解手术学杂志 2019年10期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,眼科与耳鼻咽喉科,生物医学工程

单位: 贵州医科大学组织学与胚胎学教研室

基金: 贵州医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项项目(黔科合平台人才[2018]5779-21),贵州省普通高校科技拔尖人才支持计划[黔科合KY字2016(071)号],贵州省科技支撑计划(黔科合支撑[2017]2970号)

分类号: R77;R318

页码: 767-771

总页数: 5

文件大小: 508K

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