导读:本文包含了精氨酸脱亚氨酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:感染性休克,肽酰基精氨酸脱亚氨酶4,疾病严重程度,预后
精氨酸脱亚氨酶论文文献综述
王锦栋,孙雪梅,王树威[1]（2019）在《感染性休克中肽酰基精氨酸脱亚氨酶4与疾病严重程度及预后的关系》一文中研究指出目的探讨感染性休克患者血清肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)水平与疾病严重程度及预后的关系。方法回顾性分析86例感染性休克患者的临床资料,根据28天生存情况分为存活组46例和死亡组40例,观察两组血清PADI4水平、急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEII评分)、序贯器官衰竭估计评分(SOFA)。评估血清PADI4表达与APACHEII评分、SOFA评分相关性及对评价患者预后的价值。结果死亡组血清PADI4水平明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组APACHEII评分、SOFA评分均显着高于存活组(P<0.05);血清PADI4与APACHEII评分、SOFA评分均呈正相关(P<0.05);PADI4对患者死亡结局判断的cuf-off值为3.89ng/mL,此时,敏感度为75.00%,特异度为69.57%。结论感染性休克患者血清PADI4水平升高,与患者疾病严重程度呈正相关,可作为感染性休克预后评估的参考指标。(本文来源于《浙江实用医学》期刊2019年05期）
缑玲枝[2]（2018）在《精氨酸脱亚氨酶参与蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）0-9盐胁迫响应和厌氧生长》一文中研究指出精氨酸脱亚氨酶(Arginine deiminase,ADI)途径广泛地存在于细菌、古生菌以及少数低等真核生物中,主要参与厌氧及兼性厌氧生物的精氨酸的代谢过程。目前,在枯草芽孢杆菌和大肠杆菌等好氧类型的微生物中尚未发现存在ADI途径。一般认为,ADI途径的生理功能主要是为厌氧条件下微生物生长提供能量并维持细胞内环境的稳定。虽然ADI途径广泛分布于原核生物中,但已有的多项研究表明编码ADI途径的操纵子的基因组成及其调控方式存在多样性。目前,ADI途径在蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)中的作用及调控方式未见报道,研究蜡样芽孢杆菌的ADI途径不仅有助于理解该细菌的精氨酸代谢途径,而且对于揭示精氨酸代谢与细菌的环境适应机制的关系具有重要价值。本研究首先将蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9的基因组进行重测序,将得到的0-9基因组序列利用生物学软件进行分析比对发现0-9基因组中存在与ADI途径相关的基因,利用相关生物信息学手段及同源重组原理敲除了与精氨酸合成相关的基因argG以及在细菌中常被用于在厌氧情况下代谢精氨酸的ADI蛋白编码的基因arcA。同时获得了arcA与argG基因的双敲除菌株。将得到基因缺失菌株在盐胁迫、在厌氧条件下的生长、生物膜形成、胞外蛋白酶与胞外淀粉酶产生能力以及细菌的定殖能力等性状与与0-9野生型菌株进行比较。结果发现,基因arcA的缺失使0-9产胞外蛋白酶、胞外淀粉酶以及产生物膜的能力减弱,基因argG的缺失使菌株产生物膜能力减弱,产胞外淀粉酶能力增强。测定高盐以及厌氧条件下0-9及其衍生菌株的群体生长能力,发现在低盐条件下(含1%NaCl的LB培养基),几个基因缺失菌株与0-9野生型无明显差别,高盐条件下(含4%NaCl的LB培养基),几个基因缺失菌株的生长状况均明显比0-9野生型差,说明arcA及argG基因的缺失导致0-9对盐更敏感,为了进一步确定此结论,通过提取0-9在低盐及高盐条件下不同时期的总RNA,采用RT-PCR技术测定arcA基因的表达量,发现在高盐条件下,arcA基因的表达量升高,此结果进一步表明arcA的影响了 0-9的盐胁迫响应。测定菌株在有氧与厌氧情况下的群体生长,发现在有氧条件下,arcA与argG基因的缺失菌株及双敲除菌株与0-9野生型野生型无明显差别,而在厌氧条件时,基因缺失型菌株的生长状况均明显比0-9野生型差,加入精氨酸后,ΔarcA基因敲除型菌株及arcA及aargG基因的双敲除菌株在对数期的生长有所恢复,但稳定期时较0-9的生物量仍然偏低,而argG基因敲除型菌株几乎恢复到与0-9野生型一致,说明arcA及argG基因参与0-9菌株在厌氧情况下的生长,为了进一步确定基因arcA影响0-9厌氧生长,提取0-9在正常通气厌氧情况下不同时期的总RNA,采用RT-PCR技术测定arcA基因的表达量,发现在厌氧情况下,arcA的基因表达量升高,此结果进一步表明arcA影响了 0-9在厌氧情况下的生长,同时,这一结论表明了在B.cereus 0-9中,ADI途径参与0-9厌氧生长。测定ΔarcA、ΔargG以及双基因敲除菌株与0-9野生型菌株在小麦根系的定殖能力,发现ΔarcA、ΔargG及ΔarcAΔargG在小麦中的定殖能力均明显低于0-9,说明arcA及argG参与0-9在土壤中对小麦的定殖。利用蛋白表达及纯化以及ADI酶活测定方法,验证了arc 基因编码的蛋白具有ADI蛋白活性。测定ΔarcA及其互补菌株的表型,发现其互补菌株在生物膜形成能力、蛋白酶产生能力、厌氧情况下的生长能力方面基本互补成功,进一步证明了arc 基因的表达情况影响了 0-9的生物膜形成能力,胞外蛋白酶产生能力、胞外淀粉酶产生能力,厌氧情况下的生长能力。本研究通过测定基因arcA与argG与缺失对蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9的生理功能的影响,初步了解了 arcA与argG在蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9中的作用,为以后揭示精氨酸合成与代谢对细菌的环境适应机制的作用奠定了一定的理论基础。(本文来源于《河南大学》期刊2018-06-01）
刘青,叶鹏,Franck,G,Mawson,TL,Folco,EJ[3]（2018）在《肽酰基精氨酸脱亚氨酶4和中性粒细胞胞外诱捕网形成在实验性动脉粥样硬化和动脉损伤中的作用:浅表糜烂的影响》一文中研究指出中性粒细胞可能促进人类动脉粥样硬化的血栓并发症的发生。特别是中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)可加剧局部炎症,并放大和加剧动脉内膜损伤和血栓形成。肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(peptidyl arginine deiminase 4,PAD4)参与NET的形成,但对该酶在动脉粥样硬化血栓形成中的(本文来源于《中华高血压杂志》期刊2018年05期）
何伟[4]（2017）在《肽基精氨酸脱氨酶抑制剂对失血性休克相关急性肺损伤保护作用及机制研究》一文中研究指出第一部分:失血性休克大鼠中性粒细胞Cit H3表达变化的实验研究目的探讨失血性休克(hemorrhagic shock,HS)时大鼠循环中中性粒细胞瓜氨酸化组蛋白3(citrullinize histone 3,Cit H3)以及肺组织 Cit H3 表达变化。方法选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,将大鼠分为两组,失血性休克(HS)组和假手术(Sham)组,HS组是将大鼠股动静脉穿刺、置管,10分钟放血总血容量40%,建立HS模型。休克模型建立6小时后两组动物分离循环中中性粒细胞,Western blot测定中性粒细胞CitH3和总的组蛋白3(Total H3)表达量,免疫组化方法检测肺组织Cit H3的表达。结果与假手术组(Sham)相比,HS组循环中性粒细胞的Cit H3蛋白表达量与Sham组比较有明显升高(P<0.05),但两组之间TotalH3蛋白表达量无显着的统计学差异(P>0.05)。免疫组化结果显示Cit H3主要定位于细胞核中,呈棕色表达,HS组肺组织CitH3的表达较Sham组显着升高。结论HS引起SD大鼠循环中性粒细胞及肺组织中CitH3表达增加。第二部分:肱基精氨酸脱氨酶抑制YW3-56对失血性休克大鼠急性肺损伤及存活率影响的实验研究目的探讨一种新型肽基精氨酸脱氨酶(Peptidylarginine deiminases,PADs)抑制剂YW3-56在失血性休克急性肺损伤模型中的保护作用。方法选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,分为叁组,假手术(Sham)组,失血性休克(HS)组和YW3-56处理组。Sham组不给予特殊处理;HS组为大鼠股动静脉穿刺、置管,建立HS模型;YW3-56处理组在大鼠造失血性休克模型成功后给予YW3-56(10 mg/kg)腹腔注射处理。非致死性休克模型:10分钟放血量占全身血容量40%,大鼠饲养笼继续继续观察6小时后,处死,肺组织病理切片染色,ELISA法检测血浆细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子-1(cytokine-inducedneutrophil chemoattractant-1,CINC-1)的水平。化学比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)含量,Western blot检测肺组织细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的表达。致死性休克模型:40分钟共放血血容量55%,开始10分钟放血量占全身血容量30%,剩余25%在30分钟内持续缓慢放血。大鼠饲养笼继续继续观察12小时,并对各组动物生存时间进行记录。结果与Sham组相比,HS模型组肺组织的CINC-1、ICAM-1含量和MPO活性显着升高,YW3-56处理显着降低HS模型组肺组织的CINC-1、ICAM-1含量和MPO活性;Sham组大鼠肺组织无明显炎症损伤表现;HS模型组中大鼠肺组织中可见明显细胞间质水肿,出血,中性粒细胞浸润,肺泡壁轻度增厚的炎症损伤改变;腹腔给予YW3-56(10 mg/kg)处理可显着减轻HS引起的肺组织炎症损伤程度(P<0.05)。对两组进行致死性休克模型生存分析结果显示12小时内HS模型组生存率仅为20%,而YW3-56处理后HS模型组的生存率则有60%,明显高于单纯的HS模型组(P<0.05)。结论新型PADs抑制剂YW3-56可显着降低HS大鼠肺组织CINC-1、ICAM-1的表达和MPO活性,进而抑制HS相关性急性肺损伤,并明显提高失血性休克大鼠12h存活率。第叁部分:YW3-56对中性粒细胞Cit H3表达及NETs形成影响目的探讨肽基精氨酸脱氨酶(Peptidylarginine deiminases,PADs)抑制剂YW3-56对中性粒细胞Cit H3表达及中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular networks,NETs)形成的影响。方法动物实验部分:选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,分为二组,失血性休克(HS)组和YW3-56处理组,建立HS模型;YW3-56处理组在大鼠造失血性休克模型成功后给予YW3-56(10 mg/kg)腹腔注射预处理。分离循环中中性粒细胞,Western blot测定中性粒细胞CitH3和总的组蛋白3(TotalH3)表达量,免疫荧光检测肺组织CitH3、MPO表达。细胞实验部分:培养HL-60细胞,并诱导分化为中性粒细胞样细胞,分别给予钙离子载体(calcium ionophore)、内毒素(LPS,200ng/ml)、缺氧/复氧(Hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导 NETs 形成以及阴性对照处理,并对各组给予YW3-56(5μM)处理,Western blot 检测细胞Cit H3、Total H3、Cit H4、Total H4表达量变化,细胞免疫荧光以及共聚焦显微镜观察NETs形成情况。结果Western blot结果提示HS模型组循环中中性粒细胞Cit H3表达增多,给予肽基精氨酸脱氨酶抑制剂干预后Cit H3表达显着下降。免疫荧光提示HS模型组肺组织Cit H3、MPO表达增多,NETs形成增加,给予肽基精氨酸脱氨酶抑制剂干预后Cit H3、MPO表达显着下降,NETs形成降低。HL-60细胞可被全反式维甲酸(ATRA,1μM)诱导成中性粒细胞样细胞,并经calcium ionophore(钙离子载体)、LPS、H/R处理后CitH3、CitH4表达增多,NETs形成增加,给予YW3-56(5.0 μM)处理后,CitH3、CitH4表达显着下降,NETs形成降低。结论新型PADs抑制剂YW3-56显着减弱HS大鼠肺组织及循环中Cit H3表达和NETs的形成。在细胞水平,YW3-56明显抑制组蛋白瓜氨酸化,抑制NETs形成,从而减轻炎症反应,可能是治疗失血性相关导致急性肺损伤的机制之一。第四部分:NETS对巨噬细胞促炎因子、趋化因子分泌的影响目的探讨中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular networks,NETs)对巨噬细胞促炎因子、趋化因子分泌的影响。方法体外培养HL-60细胞株,全反式维甲酸(ATRA,1μM)诱导分化为中性粒细胞样细胞,后经calcium ionophore刺激诱导,并用或不用YW3-56预处理,刺激后提取得到相当于NETs混合物的液体,将NETs样混合物刺激巨噬细胞,ELISA法检测细胞培养上清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子-1(cytokine-inducedneutrophil chemoattractant-1,CINC-1)的水平。结果NETs刺激巨噬细胞后,细胞培养上清的TNF-α、IL-6和CINC-1 水平显着升高(P<0.05),经YW3-56预处理得到的NETs混合液刺激巨噬细胞,TNF-α IL-6和CINC-1水平明显低于相应的未经YW3-56预处理组。且给予CitH3 Ab、CitH4Ab中和NETs中的成分,以及DNase I预处理,降解NETs,显着降低NETs诱导的炎症因子TNF-α、IL-6和CINC-1水平的升高。结论NETs能够促进巨噬细胞促炎因子TNF-α和IL-6的分泌以及趋化因子CINC-1的表达,YW3-56可以通过抑制NETs形成,从而减轻巨噬细胞细胞因子的分泌;且通过中和NETs的成分CitH3、CitH4,或降解NETs可减轻巨噬细胞细胞因子的分泌。NETs形成可能在失血性休克致急性肺损伤巨噬细胞激活中发挥重要作用。(本文来源于《东南大学》期刊2017-06-01）
赵晨晓[5]（2017）在《甲基转移酶、精氨酸脱氨酶及乙酰乳酸脱羧酶的催化机理研究》一文中研究指出酶是具有生物催化功能的高分子物质,与传统的催化剂相比,酶的催化效率更高、反应条件更加温和并且环保、无公害,在生物体的生命活动中起到了不可替代的作用。研究酶的催化机理不仅有助于理解酶的生物学功能,还将为酶的实际应用奠定必要的理论基础。但酶催化的反应通常速度很快,仅通过实验方法很难获得酶催化反应的详细信息。近年来量子化学与计算机技术的发展为研究生物大分子体系奠定了基础。本论文主要采用量子力学与分子力学相结合(QM/MM)的方法对叁种酶的催化反应进行了系统的理论研究,在晶体结构的基础上构建了合理的计算模型,确定了反应的最佳路径,分析了反应中间体、过渡态的结构特点,给出了反应的能量学信息,在原子水平上详细地阐明了酶催化反应的机理。理论计算结果不仅有助于深入理解这些酶的催化反应机理,还可为工业应用奠定一定的理论基础。本论文的主要工作如下:(1)大肠杆菌中SAM甲基转移酶催化机理的理论研究甲基转移酶(RlmN)属于自由基SAM酶,它是一个双重特异性的酶,既可以催化23S rRNA上2503号腺苷的甲基化又可催化大肠杆菌中转运RNAs(tRNA)上37号腺苷C2的甲基化。本文以RlmN与大肠杆菌tRNA的复合物(PDB编码:5HR6)的晶体结构为基础构建了计算模型,并应用QM/MM研究的甲基化反应机理。计算结果表明RlmN催化腺苷C2原子的甲基化过程遵循自由基反应机理,反应总共包含四步基元反应,5'-dA自由基首先夺取甲基化的半胱氨酸C355上的质子,生成C'自由基,然后C'自由基进攻A37上的C2原子,生成蛋白质-核苷酸交联的中间体(IM2);在中间体IM2的分解过程中,C118残基的夺质子过程与C355残基的C'-S'键断裂是协同进行的,C118残基将氢原子转移至C'生成最终的产物,其中C'-S'键的断裂过程为催化反应的决速步骤,对应的能垒为17.4 kcal/mol。这些研究结果为进一步理解RlmN及其同源酶Cfr的催化反应提供了理论依据。(2)牙龈卟啉单胞菌酞酰精氨酸脱氨酶催化机理的理论研究牙龈卟啉单胞菌酞酰精氨酸脱氨酶催化多肽C-末端精氨酸的胍基化。精氨酸的胍基化反应在生理活动和病理过程中广泛存在。研究牙龈卟啉单胞菌酞酰精氨酸脱氨酶的胍基化机理将为该酶在临床上的应用提供理论基础。在研究酶的催化机理前,首先确定了活性中心两个关键残基C351和H236的质子化状态,然后对酶催化的胍基化反应进行了理论计算。结果表明,反应经过脱氨和水解两个连续的过程,脱氨过程总能垒为20.17kcal/mol;水解过程中,D238或H236残基皆可作为碱活化水分子,并且对应相似的能垒(-17kcal/mol)。(3)短芽胞杆菌中乙酰乳酸脱羧酶催化机理的理论研究乙酰乳酸脱羧酶催化α-乙酰乳酸的对映异构体生成单一的产物(R)-乙偶姻。其中(S)-α-乙酰乳酸为自然底物,催化反应速度较快,(R)-α-乙酰乳酸为非自然底物反应速度较慢。本论文应用QM/MM方法研究了乙酰乳酸脱羧酶的催化机理。计算结果表明,乙酸乳酸脱羧酶对(S)-α-乙酰乳酸的催化反应包含两步基元反应,包括底物直接脱羧生成烯醇化物中间体以及烯醇中间体夺取E253残基上的质子生成最终的产物。研究结果还表明,非自然底物(R)-αα-乙酰乳酸活性位点不能直接进行脱羧反应,需要先经过羧基迁移重排为自然的底物(S)-αα-乙酰乳酸,然后再按照(S)-α-乙酰乳酸的反应机理完成催化反应。本论文的特色和创新之处:(1)研究了 SAM甲基转移酶(RlmN)的催化反应机理,确定了 RlmN-tRNA复合体的分解机制,给出了甲基化过程的决速步骤,在原子水平上总结了 RNA甲基化过程中的自由基传递规律,为深入理解RlmN及其同源酶的催化过程提供了理论依据。(2)研究了牙龈卟啉单胞菌酞酰精氨酸脱氨酶(PPAD)的胍基化反应机理,确定了 PPAD酶活性中心半胱氨酸和组氨酸的质子化状态以及PPAD酶催化反应的脱氨和水解过程,解释了 C351-D238-H236催化叁联体在酶的催化过程中所起的重要作用。(3)研究了短芽胞杆菌中乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)对不同立体构型底物的催化反应,从理论上说明ALDC酶对(S)-αα-乙酰乳酸的催化反应经过两步基元反应,但(R)-α-乙酰乳酸不能直接进行脱羧反应,需先经过羧基迁移转化为(S)-构型,然后再完成脱羧反应(本文来源于《山东大学》期刊2017-05-01）
胡恒贵,秦淑国,张长礼,杜宏斌,李环如[6]（2016）在《肽酰基精氨酸脱亚氨酶-4、抗环瓜氨酸肽抗体联合检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值》一文中研究指出目的:研究肽酰基精氨酸脱亚胺酶-4(PADI-4)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)联合检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测58例RA患者(RA组)、40例其他风湿性疾病患者(非RA组)和30名健康志愿者(健康对照组)的血清PADI-4、抗CCP抗体、抗聚角蛋白傲丝蛋白抗体(AFA)、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗MCV抗体)和抗RA33抗体的浓度,并对其受试者工作特征曲线、灵敏度、特异度、相关性和诊断效能进行分析。结果:RA患者血清中PADI-4、抗CCP抗体、AFA、抗MCV抗体和抗RA33抗体的浓度均显着高于非RA组和健康对照组(P<0.01);采用受试者工作特征曲线,PADI-4和抗CCP抗体诊断RA的最佳临界值为1.284 U/L和26.365 RU/m L,此时的灵敏度为62.1%和81.1%,特异度为91.4%和95.7%;PADI-4与AFA、抗RA33抗体、抗MCV抗体均呈明显正相关关系(P<0.01);PADI-4与抗CCP抗体无相关关系(P>0.05)。在多种抗体联合检测中,PADI-4、抗CCP抗体均为阳性诊断RA的特异度高达100.0%,单项检测PADI-4为91.4%,抗CCP抗体为95.7%。结论:PADI-4、抗CCP抗体联合检测能提高RA的特异性和灵敏度,有助于对RA的诊断。(本文来源于《蚌埠医学院学报》期刊2016年10期）
沈小辉,喻伟,杨菲[7]（2016）在《类风湿关节炎患者滑膜抗环瓜氨酸肽表位表达与肽酰基精氨酸脱亚氨酶4基因的相关性分析》一文中研究指出目的探讨类风湿关节炎患者滑膜抗环瓜氨酸肽(CCP)表位表达与肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)基因的相关性。方法 2013年2月~2015年选择在湖北医药学院附属东风医院风湿免疫科住院的类风湿关节炎患者110例作为观察组,同期选择在该院进行体检的健康者110例作为对照组,两组都进行滑膜抗CCP表位表达阳性率检测与PADI4基因表达检测,同时进行相关性分析。结果观察组与对照组的滑膜抗CCP表位表达阳性率分别为70.9%和9.1%,观察组明显高于对照组(χ~2=23.289,P<0.05)。观察组PADI4-104基因型的表达频率与对照组对比差异有统计学意义(χ~2=2.984,P<0.05),多为G/G表达,而对照组多为C/G表达。Pearson相关性分析显示在观察组中,滑膜抗CCP表位阳性表达情况与PADI4-104基因型表达频率之间存在明显相关性(r=0.344,P<0.05);logistic逐步回归分析显示PADI4-104基因型表达频率是影响滑膜抗CCP表位表达的主要因素(P<0.05)。结论类风湿关节炎患者的滑膜抗CCP表位表达阳性率明显增加,同时也存在PADI4基因多态性紊乱情况,两者也存在明显的相关性,从而影响类风湿关节炎的发病状况。(本文来源于《现代检验医学杂志》期刊2016年03期）
高文博,徐敏,严孝岭,虞伟,陈芳芳[8]（2015）在《类风湿关节炎患者滑膜组织中瓜氨酸化蛋白质及肽酰基精氨酸脱亚氨酶4的表达研究》一文中研究指出目的研究瓜氨酸化蛋白质(citrullinated protein,Cit P)及肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(peptidylarginine deiminase,PAD4)在类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜组织(synovial tissue,ST)中的表达。方法无菌条件下获取手术切除的RA和骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节ST,用免疫组织化学法检测ST中Cit P、Ig G及补体C3成分;western blot法检测RA和OA患者ST中PAD4蛋白的表达情况。分析RA患者ST中PAD4蛋白质表达与血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)和疾病活动性评分系统(DAS28)等临床指标的相关性。结果 RA和OA患者ST中均有Ig G和C3表达,但Cit P仅在RA患者ST中表达;RA患者ST中PAD4蛋白的表达量明显高于OA患者(P<0.05),且其表达量与CRP存在负相关关系(P<0.05),但未发现与其他临床指标存在相关性。结论 RA患者ST中PAD4、Cit P蛋白表达水平较高,PAD4在RA的致病过程中可能发挥一定的作用。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2015年04期）
郭靖[9]（2013）在《肽酰基精氨酸脱亚氨酶4可能通过影响组蛋白甲基化水平参与类风湿关节炎发病》一文中研究指出目的：探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(Peptidylarginine Deaminase,PAD4)mRNA的表达，了解PAD4mRNA表达的异常以及与抗CCP抗体及其它临床指标的关联性；同时检测组蛋白H3R17不对称的二甲基化，H4R3对称的二甲基化及单甲基化的修饰水平，并分析RA患者PBMC中PAD4mRNA表达、H3R17/H4R3甲基化平及其临床指标的相关性。方法：收集60例RA患者，40例正常对照组，分别抽取10ml抗凝外周血，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，Trizol法提取总RNA，逆转录为cDNA，实时荧光定量聚合酶反应（real-time PCR）方法检测患者组和对照组PBMCs中PAD4mRNA表达水平的差异，RA患者收集其相关临床及实验室资料，包括：压痛关节数(Tenderjoint count in28joints，TJC)、肿胀关节数（Swollen joint count in28joints，SJC）、关节功能分期、X线分期、HAQ评分.抗环瓜氨酸(CCP)抗体、疾病活动指数DAS28评分、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)及病程等。从上述实验对象中选取26例类风湿关节炎患者、另收集12例骨关节炎（OA）患者及10例正常对照组，用半定量Western blot方法检测PBMCs中组蛋白H3R17不对称的二甲基化，H4R3对称的二甲基化及单甲基化水平。分析PAD4mRNA表达与组蛋白甲基化水平，以及两者与其他各临床和实验室指标的关系。采用SPSS13.0统计学软件处理数据。正态分布计量资料以均数±标准差表示，非正态分布计量资料以中位数(范围)表示,两组数据符合正态分布，采用独立样本t检验,叁组之间采用方差分析；两组数据间的相关性符合正态分布采用Pearson相关分析，不符合正态分布采用Spearman相关分析。结果：1）RA组PAD4mRNA相对表达量[34.6(16.7，70.8)]明显高于正常对照组[20.6(11.1，51.8)](P<0.05)。RA组中PAD4mRNA表达与抗CCP抗体、DAS28评分水平、ESR、RF呈正相关(r=0.527，P<0.001；r=0.416，P=0.001；r=0.371，P=0.004；r=0.287，P=0.030),与CRP、病程无相关性(r=0.015，p=0.919； r=0.064，P=0.625)。2) RA患者组蛋白H3R17不对称的二甲基化水平（71.34±25.65）明显高于OA（37.18±18.62）及正常对照组（50.67±13.99），差异有统计学意义（P﹤0.05）；H3R17不对称的二甲基化水平与PAD4无相关性(r=-0.185, p=0.377)，与TJC和SJC正相关(r=0.418，p=0.034，r=0.402，p=0.042)。3）RA患者H4R3对称的二甲基化水平（75.02±20.35）也高于OA（57.92±22.77）及正常对照组（68.37±17.57），但差异未达到统计学意义（P﹥0.05）：H4R3对称的二甲基化水平与PAD4无相关性(r=0.198, p=0.344)。4）RA患者H4R3单甲基化水平（11.24±7.81）明显低于OA（32.77±30.77）及正常对照组（51.20±47.14.）差异有统计学意义（P﹤0.05）：H4R3单甲基化水平与PAD4负相关（r=-0.643，P＜0.001），与抗CCP、DAS28评分, ESR, CRP, RF,病程、关节功能分期、关节压痛数、肿胀数、HAQ评分、晨僵时间、X线分期无相关性(r=-0.147，p=0.505；r=0.037，p=0.860；r=-0.091，p=0.664；r=0.078，p=0.725；r=-0.212，p=0.309；r=0.162，p=0.440；r=0.276，p=0.172；r=0.275，p=0.174；r=0.243，p=0.232；r=0.272，p=0.179；r=0.335，p=0.095；r=0.285，p=0.304)。结论：1） RA患者外周血PBMCs PAD4mRNA表达显着增高，并与抗CCP抗体水平、DAS28评分、ESR、RF呈正相关，可能是RA病情活动的一个有用的指标，PAD4可能在RA的发病和病理过程中起重要作用。2） RA患者外周血PBMCs中H3R17不对称的二甲基化水平升高，H4R3单甲基化水平降低，组蛋白甲基化水平的异常可能是RA发病的原因之一。3） PAD4与H3R17不对称的二甲基化及H4R3对称的二甲基化水平无相关性，与H4R3单甲基化水平负相关，PAD4可能通过影响组蛋白H4R3甲基化参与RA发病机制，有可能作为RA治疗的新靶点。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2013-03-01）
刘冀,杨发满,李蓉,张培莉,汪元浚[10]（2012）在《青海地区回族类风湿关节炎患者抗环瓜氨酸抗体与血清肽酰基精氨酸脱亚氨酶基因多态性关系的研究》一文中研究指出目的探讨青海地区回族类风湿关节炎(RA)患者抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体水平与血清肽酰基精氨酸脱亚氨酶(PADI)基因多态性的关系,及两者在RA发病机制中的意义。方法选择我院风湿科2009年6月—2011年11月住院及门诊回族RA患者63例为病例组,选择同期我院回族健康体检者54例为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测两组受试者抗CCP抗体水平,魏氏法检测红细胞沉降率(ESR),免疫散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF)水平。根据GenBank号NT_004610序列查找PADI4基因多态性位点,即PADI4-94、PADI4-104、PADI4-92,其基因多态性分型采用聚合酶链反应(PCR)产物扩增后收集DNA片段进行测序。采用RA疾病活动评分(DAS28评分)评价病例组患者疾病活动性,HAQ生活质量问卷(HAQ评分)评价其生活质量。结果 (1)两组ESR、CRP水平、抗CCP抗体水平及RF水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)病例组患者DAS28评分平均为(4.89±0.17)分,HAQ评分平均为(8.07±1.03)分。(3)PADI4-94位点的基因型为A/A、G/G、A/G,PADI4-104位点为A/A、G/G、A/G,PADI4-92位点为C/C、G/G、G/C。3个位点不同基因型RA患者抗CCP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)Pearson相关分析显示,RA患者抗CCP抗体水平与DAS28评分(r=0.25,P=0.018)、HAQ评分(r=0.22,P=0.04)及ESR(r=0.81,P=0.001)均呈正相关,与CRP、RF无相关性。结论青海地区回族RA患者血清抗CCP抗体水平高于回族健康人群,并与DAS28评分、HAQ评分及ESR呈正相关,提示抗CCP抗体可作为评价回族RA患者疾病活动度的指标,PADI4基因多态性可能与抗CCP抗体形成无相关性。(本文来源于《中国全科医学》期刊2012年32期）
精氨酸脱亚氨酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
精氨酸脱亚氨酶(Arginine deiminase,ADI)途径广泛地存在于细菌、古生菌以及少数低等真核生物中,主要参与厌氧及兼性厌氧生物的精氨酸的代谢过程。目前,在枯草芽孢杆菌和大肠杆菌等好氧类型的微生物中尚未发现存在ADI途径。一般认为,ADI途径的生理功能主要是为厌氧条件下微生物生长提供能量并维持细胞内环境的稳定。虽然ADI途径广泛分布于原核生物中,但已有的多项研究表明编码ADI途径的操纵子的基因组成及其调控方式存在多样性。目前,ADI途径在蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)中的作用及调控方式未见报道,研究蜡样芽孢杆菌的ADI途径不仅有助于理解该细菌的精氨酸代谢途径,而且对于揭示精氨酸代谢与细菌的环境适应机制的关系具有重要价值。本研究首先将蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9的基因组进行重测序,将得到的0-9基因组序列利用生物学软件进行分析比对发现0-9基因组中存在与ADI途径相关的基因,利用相关生物信息学手段及同源重组原理敲除了与精氨酸合成相关的基因argG以及在细菌中常被用于在厌氧情况下代谢精氨酸的ADI蛋白编码的基因arcA。同时获得了arcA与argG基因的双敲除菌株。将得到基因缺失菌株在盐胁迫、在厌氧条件下的生长、生物膜形成、胞外蛋白酶与胞外淀粉酶产生能力以及细菌的定殖能力等性状与与0-9野生型菌株进行比较。结果发现,基因arcA的缺失使0-9产胞外蛋白酶、胞外淀粉酶以及产生物膜的能力减弱,基因argG的缺失使菌株产生物膜能力减弱,产胞外淀粉酶能力增强。测定高盐以及厌氧条件下0-9及其衍生菌株的群体生长能力,发现在低盐条件下(含1%NaCl的LB培养基),几个基因缺失菌株与0-9野生型无明显差别,高盐条件下(含4%NaCl的LB培养基),几个基因缺失菌株的生长状况均明显比0-9野生型差,说明arcA及argG基因的缺失导致0-9对盐更敏感,为了进一步确定此结论,通过提取0-9在低盐及高盐条件下不同时期的总RNA,采用RT-PCR技术测定arcA基因的表达量,发现在高盐条件下,arcA基因的表达量升高,此结果进一步表明arcA的影响了 0-9的盐胁迫响应。测定菌株在有氧与厌氧情况下的群体生长,发现在有氧条件下,arcA与argG基因的缺失菌株及双敲除菌株与0-9野生型野生型无明显差别,而在厌氧条件时,基因缺失型菌株的生长状况均明显比0-9野生型差,加入精氨酸后,ΔarcA基因敲除型菌株及arcA及aargG基因的双敲除菌株在对数期的生长有所恢复,但稳定期时较0-9的生物量仍然偏低,而argG基因敲除型菌株几乎恢复到与0-9野生型一致,说明arcA及argG基因参与0-9菌株在厌氧情况下的生长,为了进一步确定基因arcA影响0-9厌氧生长,提取0-9在正常通气厌氧情况下不同时期的总RNA,采用RT-PCR技术测定arcA基因的表达量,发现在厌氧情况下,arcA的基因表达量升高,此结果进一步表明arcA影响了 0-9在厌氧情况下的生长,同时,这一结论表明了在B.cereus 0-9中,ADI途径参与0-9厌氧生长。测定ΔarcA、ΔargG以及双基因敲除菌株与0-9野生型菌株在小麦根系的定殖能力,发现ΔarcA、ΔargG及ΔarcAΔargG在小麦中的定殖能力均明显低于0-9,说明arcA及argG参与0-9在土壤中对小麦的定殖。利用蛋白表达及纯化以及ADI酶活测定方法,验证了arc 基因编码的蛋白具有ADI蛋白活性。测定ΔarcA及其互补菌株的表型,发现其互补菌株在生物膜形成能力、蛋白酶产生能力、厌氧情况下的生长能力方面基本互补成功,进一步证明了arc 基因的表达情况影响了 0-9的生物膜形成能力,胞外蛋白酶产生能力、胞外淀粉酶产生能力,厌氧情况下的生长能力。本研究通过测定基因arcA与argG与缺失对蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9的生理功能的影响,初步了解了 arcA与argG在蜡样芽孢杆菌(B.cereus)0-9中的作用,为以后揭示精氨酸合成与代谢对细菌的环境适应机制的作用奠定了一定的理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
精氨酸脱亚氨酶论文参考文献
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标签：感染性休克; 肽酰基精氨酸脱亚氨酶4; 疾病严重程度; 预后;