基因的优化论文_田庄,王舒宁,张阔,李维娜,郝强

导读:本文包含了基因的优化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:密码子,基因,霍尔,蛋白,胸腺肽,梭子蟹,吡咯。

基因的优化论文文献综述

田庄,王舒宁,张阔,李维娜,郝强[1](2019)在《Tβ4②蛋白基因工程菌发酵条件的优化研究》一文中研究指出通过正交实验对重组胸腺素β4②基因工程菌的发酵条件进行优化。选择温度、接种量、诱导剂浓度和诱导时机4因素,分别在3个水平上进行考察。结果显示影响Tβ4②菌体浓度的主次因素顺序:诱导时机>温度>诱导剂浓度>接种量,影响Tβ4②表达水平的主次因素顺序:诱导时机>接种量>温度>诱导剂浓度,最终确定最佳工艺参数为:诱导时机3 h,温度37℃,IPTG 0. 5 mmol/L,接种量5%,并在5 L发酵罐中进行验证,最终菌体得率为49 g/L,Tβ4②表达量达30%。(本文来源于《药物生物技术》期刊2019年05期)

陈子晗,周海胜,尹新坚,吴坚平,杨立荣[2](2019)在《Amphibacillus xylanus谷氨酸脱氢酶基因工程菌培养条件优化》一文中研究指出首先构建了5株表达NADH依赖型谷氨酸脱氢酶的大肠杆菌基因工程菌,获得来源于Amphibacillus xylanus的谷氨酸脱氢酶AxyGDH。其最适温度为60℃、最适p H为8.0,该条件下比酶活达到(903.1±24.6)U/mg,酶活半衰期为167h。其次,确定了表达AxyGDH的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-AxyGDH的产酶条件:诱导剂IPTG浓度为0.7mmol/L、诱导温度为25℃;优化后的培养基组成为:甘油11.3g/L,酵母粉16.3g/L,Mg SO_4·7H_2O 0.62g/L,NaCl 0.5g/L,Na_2HPO_4·12H_2O 17.1g/L,KH_2PO_43g/L,NH_4Cl 1.5g/L。最后,在10L发酵罐中控制比生长速率为0.2h~(-1)进行补料分批发酵,所得AxyGDH的发酵酶活为(9 066±45)U/ml,是LB摇瓶发酵酶活的51.1倍,为谷氨酸脱氢酶的低成本生产奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年10期)

王彩娜,王有军,石岩[3](2019)在《赓续改革基因 长春演绎营商环境优化新范本》一文中研究指出“投资正过山海关”的精彩故事,在长春不断上演,且渐露“争过”之势。如万达影视文旅项目、华为研究院、中国移动、大正博凯机器人、嘉诚信息、大众研发中心、一汽解放发传中心等重大项目纷至沓来,成为长春营商环境持续优化的最佳注脚。短短两叁年间,从“(本文来源于《中国经济时报》期刊2019-10-01)

郭一星,杨银龙,马玥,岳盈盈,宋楠楠[4](2019)在《鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因密码子优化及异源表达纯化》一文中研究指出目的优化鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白基因密码子并在大肠埃希菌中进行异源表达纯化。方法依据大肠埃希菌密码子偏好性对鼠疫耶尔森菌YopJ基因进行全基因序列优化,并设计引物。分别以密码子优化前后的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因为模板,将包含YopJ(22aa-288aa)和YopJ(22aa-250aa)的基因片段连接到载体pGI01中。重组质粒转化到大肠埃希菌BL21菌株中,扩大培养后,IPTG诱导目的蛋白表达。提取大肠埃希菌表达蛋白并使用镍离子柱进行纯化。结果鼠疫耶尔森菌YopJ密码子优化前YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内表达水平较低,密码子优化后YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内大量表达可溶性YopJ蛋白。结论对鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白进行基因密码子优化能够提高其在大肠埃希菌内的表达量。获得的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白具有可溶性,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年09期)

李聪聪,安晓晖,张中起,刘康,孙敬[5](2019)在《玉米TRV-VIGS的优化与顶腐病抗病基因的鉴定》一文中研究指出烟草脆裂病毒(TRV)介导的基因沉默方法简便易行,但在常规试验条件下按照报道的方法操作沉默玉米基因的效率较低,难以实际应用。为了优化TRV-VIGS体系,并鉴定顶腐病抗病基因,本研究以玉米八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因为靶基因,构建沉默载体pTRV2-ZmPDS,从浸种处理、农杆菌菌株、真空辅助渗入和共培养时间4个试验因素优化玉米TRV-VIGS体系,提高基因沉默效率。结果表明,无菌水浸泡种子24 h,剥去种皮后用LB4404农杆菌菌株真空渗入处理60 min,再共培养10 h时,全株白化苗占出苗植株总数的25. 1%~29. 3%,较优化前沉默比率(3. 0%)提高了8~10倍。半定量RTPCR分析表明,与对照和未白化植株相比,白化植株的ZmPDS基因转录水平显着降低。应用优化的TRV-VIGS体系沉默ZmMAC3基因,高抗顶腐病的玉米杂交种先玉335在接种亚粘团镰孢菌后表现出典型的顶腐病病症,表明,与双子叶植物相似,MAC3蛋白是玉米内生免疫和抗病所必需的关键调控因子。综上所述,优化后的TRV-VIGS体系可以应用于玉米基因功能的鉴定。(本文来源于《核农学报》期刊2019年11期)

连凯琪,周玲玲,王英杰,李翠,宋玉伟[6](2019)在《猪IgG1-Fc基因的克隆、原核表达及表达条件优化》一文中研究指出为了探索猪IgG1-Fc(pIgG1-Fc)基因在大肠杆菌中的高效表达,首先通过反转录PCR(RT-PCR)扩增pIgG1-Fc基因,并构建重组表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,然后通过优化异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、菌体培养温度及菌体培养时间,实现pIgG1-Fc重组蛋白的高效表达。结果表明,成功克隆了pIgG1-Fc的基因666 bp,共编码222个氨基酸;重组原核表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc经过酶切和测序证明构建正确,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达,表达的融合蛋白分子量约为36 ku。其最佳表达条件如下:在25℃条件下加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导6 h可形成大量包涵体蛋白。pIgG1-Fc基因被成功克隆并原核表达,为进一步研究该蛋白的功能及实现其他蛋白与pIgG1-Fc融合后原核表达奠定了基础,为制备能与猪IgG1结合的二抗提供了材料。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年15期)

任国领,侯晓哲,赵晓菊,胡敏,曲丽娜[7](2019)在《基因工程实验教学整合与优化的改革与探索》一文中研究指出基因工程是以分子生物学和遗传学为理论基础的专业必修课,其知识抽象复杂,理论性和实践性较强。基因工程实验作为基因工程教学的重要环节,可以帮助学生形象地去理解抽象难懂的理论知识。分析了基因工程实验教学中存在的问题,如授课内容老化、教学方法被动和考核方式单一等。基于基因工程实验课程的整合与优化,借助教师的科研优势进行基因工程实验教学的改革与探索,从教学内容、教学方法和考核方式等方面进行了改革,以期实现实验内容的整合与优化,以学生为中心的教学方法和以能力为导向的考核方式构建和完善。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2019年16期)

王艳慧,陶妍[8](2019)在《叁疣梭子蟹PtCrustin2抗菌肽基因优化及其在毕赤酵母中高效表达》一文中研究指出Crustin是一系列富含半胱氨酸的甲壳动物来源的抗菌肽,是甲壳动物非特异性免疫机制中的重要免疫因子,其生物学功能由C端的成熟肽区域决定。参考叁疣梭子蟹(Portunus trituberculatus) Pt Crustin2成熟肽的c DNA序列,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏爱性对其相关密码子进行优化,合成5'端含XhoⅠ限制性位点和Kex2信号肽酶切位点、3'端含XbaⅠ限制性位点和6×his标签的目的基因"sm Pt Crustin2";以p PICZαA为表达载体,构建重组表达载体p PICZαA-sm Pt Crustin2,将其转入毕赤酵母X-33细胞后,通过含高浓度博来霉素的抗性平板筛选高拷贝甲醇利用快速型酵母转化子;筛选获得的酵母转化子在28℃、250 r/min条件下,使用0. 5%甲醇诱导表达目的蛋白,并通过固化金属离子亲和层析(IMAC)对其进行分离纯化。Tricine-SDS-PAGE分析显示:纯化的重组体sm Pt Crustin2的分子量约为9. 6 ku,并形成分子量约20 ku的二聚体。Western Blot分析进一步证明了纯化产物为预期的目的蛋白。建立的毕赤酵母表达系统获得了表达量为22. 4 mg/L的重组体sm Pt Crustin2。(本文来源于《生物学杂志》期刊2019年04期)

张蕴显,王雅梅,周萍[9](2019)在《蚁群优化算法构建乳腺癌中miRNA调控的关键基因互作网络》一文中研究指出目的筛选ER阳性乳腺癌中受miRNA调控的关键基因,以此构建乳腺癌中miRNAmRNA互作网络,进而了解ER阳性乳腺癌的调控机制,为筛选ER阳性乳腺癌诊断预后的生物标志物和治疗靶点打下基础。方法利用MCF-7细胞系的AGO-IP(HITS-CLIP Protocol for Argonaute)高通测序实验数据,发现miRNA对mRNA的真实调控关系,并以此构建基于RNAs诱导的沉默复合体(RNAinduced silencing complex,RISCs) miRNA-mRNA调控模组。根据调控模组利用蚁群优化算法在基因互作网络中筛选关键基因,构建ER阳性乳腺癌中miRNA调控下的关键基因互作网络,并对关键基因进行功能分析。结果本研究筛选出106个关键基因,244个调控关键基因的miRNA。根据乳腺癌中miRNA调控的关键基因互作网络识别出了YWHAG、EP300、CHEK1、SMAD2、SMAD1、SYK、FGFR1、PIK3R2、IRS1、TGFBR2、CHUK和CSDE1等12个hub基因;并发现了hsa-miR-940、hsa-miR-545-3p、hsa-miR-3065-5p、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-181b-5p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-765、hsa-miR-4723-5p、hsa-miR-454-3p、hsa-miR-374a-5p、hsa-miR-34a-5p、hsa-miR-30e-5p、hsa-miR-19a-3p、hsa-miR-15b-5p、hsa-miR-149-5p和hsa-miR-128-3p等16个hub miRNA。这些基因主要对肿瘤细胞的增殖、侵袭、化疗抗性、放疗抗性和耐药性起重要作用。结论本研究筛选出的关键基因及调控关键基因的miRNA对ER阳性乳腺癌的耐药性、化疗抗性、放疗抗性及肿瘤细胞的增殖、侵袭有重要调控作用,对ER阳性乳腺癌临床治疗及预后起到重要参考作用。(本文来源于《北京生物医学工程》期刊2019年04期)

陈艳彬,韩燕燕,王斐,叶建仁,任嘉红[10](2019)在《吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007产嗜铁素的相关基因克隆及条件优化》一文中研究指出为了明确吡咯伯克霍尔德氏菌Burkholderia Pyrrocinia JK-SH007是否产嗜铁素,揭示其生防机制,本文通过CAS检测该菌株产嗜铁素的能力,并对其嗜铁素合成相关基因cepR进行克隆及序列分析,同时采用单因素试验及响应面法对菌株JK-SH007产嗜铁素条件进行优化。结果表明,菌株JK-SH007具有明显的产嗜铁素能力,其嗜铁素合成相关基因cepR大小为720 bp,与B. pyrrocinia(EU034001)的亲缘关系最近,同源性为99%,两者序列相似性为97%,13个位点出现SNP;另外菌株JK-SH007cepR基因编码的氨基酸序列有3个氨基酸发生了替换,两者一致性为97%。该菌产嗜铁素最优培养时间是15 h、p H 8、转速200r/min、最佳碳源和氮源分别是甘油和氯化铵;PB试验筛选出影响该菌株产嗜铁素的关键性因素分别是p H、加碳量、加氮量;CCD试验结果显示,p H和加氮量的交互作用较明显;最终采用Design-Expert软件分析出菌株JK-SH007产嗜铁素最佳方案为碳源加入量15.00 g/L、氮源加入量10.50 g/L、温度30℃、pH7.36,优化后菌株产嗜铁素能力由18.59提升到37.86,响应面优化产嗜铁素条件的效果是显着的,嗜铁素产量得到明显提高。(本文来源于《中国生物防治学报》期刊2019年04期)

基因的优化论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

首先构建了5株表达NADH依赖型谷氨酸脱氢酶的大肠杆菌基因工程菌,获得来源于Amphibacillus xylanus的谷氨酸脱氢酶AxyGDH。其最适温度为60℃、最适p H为8.0,该条件下比酶活达到(903.1±24.6)U/mg,酶活半衰期为167h。其次,确定了表达AxyGDH的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-AxyGDH的产酶条件:诱导剂IPTG浓度为0.7mmol/L、诱导温度为25℃;优化后的培养基组成为:甘油11.3g/L,酵母粉16.3g/L,Mg SO_4·7H_2O 0.62g/L,NaCl 0.5g/L,Na_2HPO_4·12H_2O 17.1g/L,KH_2PO_43g/L,NH_4Cl 1.5g/L。最后,在10L发酵罐中控制比生长速率为0.2h~(-1)进行补料分批发酵,所得AxyGDH的发酵酶活为(9 066±45)U/ml,是LB摇瓶发酵酶活的51.1倍,为谷氨酸脱氢酶的低成本生产奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基因的优化论文参考文献

[1].田庄,王舒宁,张阔,李维娜,郝强.Tβ4②蛋白基因工程菌发酵条件的优化研究[J].药物生物技术.2019

[2].陈子晗,周海胜,尹新坚,吴坚平,杨立荣.Amphibacillusxylanus谷氨酸脱氢酶基因工程菌培养条件优化[J].中国生物工程杂志.2019

[3].王彩娜,王有军,石岩.赓续改革基因长春演绎营商环境优化新范本[N].中国经济时报.2019

[4].郭一星,杨银龙,马玥,岳盈盈,宋楠楠.鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因密码子优化及异源表达纯化[J].中国病原生物学杂志.2019

[5].李聪聪,安晓晖,张中起,刘康,孙敬.玉米TRV-VIGS的优化与顶腐病抗病基因的鉴定[J].核农学报.2019

[6].连凯琪,周玲玲,王英杰,李翠,宋玉伟.猪IgG1-Fc基因的克隆、原核表达及表达条件优化[J].江苏农业科学.2019

[7].任国领,侯晓哲,赵晓菊,胡敏,曲丽娜.基因工程实验教学整合与优化的改革与探索[J].安徽农业科学.2019

[8].王艳慧,陶妍.叁疣梭子蟹PtCrustin2抗菌肽基因优化及其在毕赤酵母中高效表达[J].生物学杂志.2019

[9].张蕴显,王雅梅,周萍.蚁群优化算法构建乳腺癌中miRNA调控的关键基因互作网络[J].北京生物医学工程.2019

[10].陈艳彬,韩燕燕,王斐,叶建仁,任嘉红.吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007产嗜铁素的相关基因克隆及条件优化[J].中国生物防治学报.2019

论文知识图

及p21基因的半定量RT-PCR条件优...公布PE38核苷酸序列同源性比...片段的PCR扩增和重组质粒pcDNA3....研究路线图多拷贝整合重组菌株中op...发酵产物的LC-MS分析

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