萎缩芽孢杆菌CP 297和解淀粉芽孢杆菌CP 2014对毛桃致腐霉菌的抑菌机理及保鲜应用

论文摘要

桃霉变是危害桃生产和采后的重要病害,对桃果的贮藏、生产造成了极大影响,化学农药防腐剂的滥用对人们的健康造成了极大的威胁,随着人们生活水平的提高,寻找安全、价廉的防腐替代品成为新时代的研究课题。醋醅是山西老陈醋酿制过程中重要的微生物来源,各种微生物的代谢及相互作用形成了山西老陈醋独特的风味和品质,其中芽孢菌的研究及应用最为广泛。本文从霉变的毛桃中分离出两株主要致腐霉菌,从分离自山西老陈醋醋醅中的五株芽孢菌中筛选出两株对毛桃致腐霉菌具有强抑菌效果的芽孢菌,并对其进行抑菌机理的研究,应用在防治毛桃整果霉变中,结果如下:（1）从霉变的毛桃中分离出两株主要致腐霉菌,通过光学显微镜对其进行初步的形态学观察;又进一步做了生物学鉴定。结果表明:菌落初期呈白色绒毛状,浅灰色的菌株与桃吉尔霉的亲缘性最近,相似度为99.83%;菌落生长初期呈白色絮状,淡绿褐色的菌株与黄曲霉的亲缘性最近,相似度为99.63%,鉴定这两株菌为桃吉尔霉和黄曲霉。（2）以分离自毛桃的两株致腐霉菌为指示菌,用滤纸片法和平板对峙法对实验室分离自山西老陈醋醋醅中的5株芽孢菌做了抑菌筛选实验,结果表明:解淀粉芽孢杆菌CP 2014、萎缩芽孢杆菌CP 297、解淀粉芽孢杆菌CP 2030对桃吉尔霉MT108和黄曲霉MT106均有抑制作用,且抑菌效果明显,解淀粉芽孢杆菌CP 2014对桃吉尔霉的抑菌作用最明显;萎缩芽孢杆菌CP 297对黄曲霉的抑菌效果最明显;枯草芽孢杆菌CP 1991的抑菌效果较差;地衣芽孢杆菌CP 1671对两株霉菌均无抑菌效果。（3）通过测定电导率、胞外K+浓度、胞外AKP含量、霉菌生长量、菌丝形态、孢子萌发率等指标,研究了芽孢菌无细胞提取液的抑菌机理,结果表明:解淀粉芽孢杆菌CP 2014和萎缩芽孢杆菌CP 297都是通过改变毛桃致腐霉菌的细胞膜通透性、细胞壁来达到抑菌效果的。在光学显微镜下,黄曲霉MT106菌丝折叠现象严重,桃吉尔霉MT108菌丝表面粗糙,菌丝肥大变粗,失去了原有的完整性,且同一时间菌丝生长量为桃吉尔霉MT108的0.5倍;荧光显微镜下:培养基中添加了CP 2014-CFE、CP 297-CFE,在培养24h后,与对照组相比,菌丝细胞膜通透性严重失衡,大量染液进入细胞内部。扫面电镜可以发现抑菌物对毛桃致腐霉菌的细胞壁及细胞完整性有很强的破坏效果。（4）将芽孢菌抑菌物质应用到毛桃保鲜贮藏应用试验中,研究了只喷施致腐霉菌、芽孢菌抑菌剂（CAE）与致腐霉菌联用、氯化钙与致腐霉菌联用对毛桃的保质期的影响,及在4℃和25℃两个温度条件下贮藏对毛桃品质的影响。结果为:与对照组相比CAE可减少毛桃的失重率12%左右;CAE处理组POD、SOD等酶活比氯化钙、Nisin处理组高2%;PPO、MDA等酶活比氯化钙、Nisin处理组低2-5%;质构主要反映果实内部组织结构变化情况,CAE处理组桃果实衰老速度慢于其他处理组2-4 d,表明CAE对毛桃有保鲜效果。表明CAE对毛桃的保鲜效果优于商业抑菌剂Nisin和氯化钙,且单种芽孢菌抑菌剂的保鲜防腐效果不如混合芽孢菌抑菌剂的保鲜防腐效果。

论文目录

• 摘要
• 第一章 绪论
•   1.1 山西老陈醋及芽孢菌概述
•     1.1.1 山西老陈醋简介
•     1.1.2 芽孢菌在山西老陈老陈醋中的作用
•   1.2 芽孢菌抑菌机理研究进展
•     1.2.1 芽孢菌抑菌物质分类
•     1.2.2 芽孢菌抑菌机理研究进展
•   1.3 毛桃防腐保鲜研究进展
•     1.3.1 毛桃腐败原因
•     1.3.2 毛桃保鲜防腐研究进展
•   1.4 课题研究内容及意义
•     1.4.1 课题研究意义
•     1.4.2 研究内容
• 第二章 毛桃致腐霉菌的分离鉴定
•   2.1 试验材料与仪器
•     2.1.1 样品来源
•     2.1.2 主要试剂
•     2.1.3 主要仪器
•     2.1.4 培养基
•     2.1.5 主要试剂配方
•   2.2 试验方法
•     2.2.1 毛桃致腐霉菌的分离纯化
•     2.2.2 毛桃致病霉菌的鉴定
•   2.3 结果与讨论
•     2.3.1 毛桃致腐霉菌的分离和初步鉴定结果
•     2.3.2 毛桃致腐霉菌的分子生物学鉴定结果
•     2.3.3 霉菌ITS序列同源性比对结果
•     2.3.4 霉菌ITS序列构建的系统发育树
•   2.4 本章小结
• 第三章 对毛桃致腐霉菌具有抑菌效果芽孢菌的筛选
•   3.1 试验材料与仪器
•     3.1.1 供试菌株
•     3.1.2 主要仪器
•     3.1.3 主要仪器
•     3.1.4 培养基
•   3.2 试验方法
•     3.2.1 芽孢菌无细胞提取液（CFE）的制备
•     3.2.2 毛桃病原菌的处理
•     3.2.3 具有抑毛桃致腐霉菌芽孢菌的筛选
•     3.2.4 具有高抑菌效果的复配芽孢菌对毛桃致腐霉菌的抑制作用
•   3.3 结果与讨论
•     3.3.1 五株芽孢菌对桃吉尔霉MT108 抑菌筛选实验结果
•     3.3.2 五株芽孢菌对黄曲霉MT106 抑菌筛选实验结果
•     3.3.3 复配芽孢菌对两株毛桃致腐霉菌抑菌实验结果
•   3.4 本章小结
• 第四章 萎缩芽孢杆菌CP297 和解淀粉芽孢杆菌CP2014 对毛桃致腐霉菌的抑菌机理
•   4.1 试验材料与仪器
•     4.1.1 样品来源
•     4.1.2 主要试剂
•     4.1.3 主要仪器
•     4.1.4 培养基
•   4.2 试验方法
•     4.2.1 芽孢菌无细胞提取液（CFE）的制备
•     4.2.2 芽孢菌CFE对毛桃致腐霉菌生长特性的影响测定
•     4.2.3 芽孢菌CFE对毛桃致腐霉菌胞外钾离子浓度的影响测定
•     4.2.4 芽孢菌CFE对毛桃致腐霉菌胞外AKP含量的影响测定
•     4.2.5 芽孢菌CFE对毛桃致腐霉菌菌液电导率的影响测定
•     4.2.6 荧光显微镜下观察芽孢菌CFE对菌丝形态的影响
•     4.2.7 扫描电镜下观察CFE对菌丝形态的影响
•   4.3 结果与讨论
•     4.3.1 CFE对毛桃致腐霉菌生长特性的影响
•     4.3.2 CFE对毛桃致腐霉菌胞外钾离子浓度的影响
•     4.3.3 CFE对毛桃致腐霉菌胞外AKP含量的影响
•     4.3.4 CFE对毛桃致腐霉菌菌液电导率的影响
•     4.3.5 荧光显微镜下观察CFE对菌丝形态的影响结果
•     4.3.6 扫描电镜下观察CFE对菌丝形态的影响结果
•   4.4 本章小结
• 第五章 萎缩芽孢杆菌CP297 和解淀粉芽孢杆菌CP2014 抑菌产物在预防由霉菌引起的毛桃腐败中的应用
•   5.1 试验材料与仪器
•     5.1.1 样品来源
•     5.1.2 主要试剂
•     5.1.3 主要仪器
•     5.1.4 培养基
•     5.1.5 主要试剂配方
•   5.2 试验方法
•     5.2.1 芽孢菌抑菌剂的制备
•     5.2.2 毛桃致腐霉菌菌液的制备
•     5.2.3 芽孢菌抑菌剂在预防毛桃腐败中的应用
•   5.3 结果与讨论
•     5.3.1 4℃保藏条件下CAE在预防毛桃霉变中的应用
•     5.3.2 4℃保藏条件下CAE在预防毛桃致腐霉菌处理后毛桃霉变中的应用
•     5.3.3 25℃保藏条件下CAE在预防毛桃霉变中的应用
•     5.3.4 25℃保藏条件下CAE在预防毛桃致腐霉菌处理后毛桃霉变中的应用
•   5.4 本章小结
• 全文总结与展望
•   主要结论
•   展望
• 参考文献
• Abstract
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 王璐

导师: 许女

关键词: 芽孢菌,毛桃真菌,抑菌机理防腐保鲜

来源: 山西农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,轻工业手工业,轻工业手工业

单位: 山西农业大学

分类号: TS255.3;TS201.3

DOI: 10.27285/d.cnki.gsxnu.2019.000339

总页数: 107

文件大小: 9178K

下载量: 47