论文摘要
本研究旨在毕赤酵母中表达鸡传染性法氏囊病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）的VP3蛋白,以重组VP3蛋白作为包被抗原建立IBDV血清抗体免疫磁珠间接ELISA检测方法并进行初步应用。利用毕赤酵母表达系统获得约为39 ku的重组VP3蛋白,Western-blotting检测表明,重组VP3蛋白具有良好的特异性和反应原性。免疫磁珠间接ELISA的最佳反应条件:磁珠和抗原偶联的缓冲液是50 mmol/L MES（p H 8.0）,偶联时间为3 h,抗原加入量为95μg,抗原与羧基磁珠最大偶联量为80μg。待检血清和酶标二抗的稀释度分别为1∶1 600和1∶4 000,血清孵育时间为30 min,酶标二抗孵育时间为20 min。在该优化条件下,阴性、阳性临界值判定标准为0.134。特异性试验显示,对抗AIV、IBV、MDV、NDV阳性血清检测结果均为阴性。敏感性试验显示,本试验所建立的检测方法敏感性高于商品化IBDV血清抗体检测试剂盒。重复性试验显示,批内和批间重复试验的最大变异系数分别为3.8%和5.9%。稳定性试验结果显示变异系数小于7%。用建立的检测方法和商品化IBDV血清抗体检测试剂盒同时检测50份血清,结果显示两种检测方法的相对敏感性为94.6%,相对特异性为92.3%,符合率为94.0%。本试验建立的检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好、稳定性高特点,为其应用于临床IBDV血清抗体的检测奠定了基础。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 龚如月,于淑媛,王书博,姜艳平,崔文,乔薪瑗,王丽,周晗,徐义刚,李一经,唐丽杰
关键词: 免疫磁珠间接,抗体检测,蛋白,毕赤酵母表达系统
来源: 中国兽医科学 2019年06期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 东北农业大学动物医学学院,黑龙江省动物疾病防控技术与制剂创制实验室
基金: “十二五”国家科技计划农村领域项目(2015BAD12B01-4)
分类号: S852.65
DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0088
页码: 678-686
总页数: 9
文件大小: 1151K
下载量: 216
相关论文文献
- [1].检测大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7免疫磁珠的制备、保存与应用[J]. 微生物学通报 2019(10)
- [2].纳米免疫磁珠富集单核增生李斯特菌[J]. 食品科学 2013(23)
- [3].基于纳米免疫磁珠快速富集4种海洋致病性弧菌的研究[J]. 海洋与湖沼 2015(06)
- [4].免疫磁珠结合RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒[J]. 上海农业学报 2010(04)
- [5].免疫磁珠分选系统在分离肝癌干细胞中的应用[J]. 中国现代医生 2012(20)
- [6].基于免疫磁珠富集粪便脱落细胞的大肠癌筛选法[J]. 现代生物医学进展 2008(08)
- [7].基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法同时检测猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸[J]. 食品与发酵工业 2018(11)
- [8].基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢方法的建立[J]. 中国生物制品学杂志 2018(07)
- [9].利用人免疫球蛋白构建免疫磁珠富集金葡菌条件优化[J]. 食品与生物技术学报 2013(03)
- [10].免疫磁珠阴性富集法在恶性胸腔积液细胞块制作中的应用[J]. 现代肿瘤医学 2020(07)
- [11].免疫磁珠的原理与特性及其在动物源性食品检测中的应用研究[J]. 浙江畜牧兽医 2014(05)
- [12].以金属有机框架材料为基质免疫磁珠的制备及在玉米样品检测中应用[J]. 中国粮油学报 2019(01)
- [13].一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原的方法[J]. 热带医学杂志 2019(11)
- [14].无皂乳液种子聚合法合成免疫磁珠及其光谱性能[J]. 光谱学与光谱分析 2018(S1)
- [15].A型单端孢霉烯族毒素多克隆抗体及其免疫磁珠制备技术[J]. 卫生研究 2018(04)
- [16].全自动免疫磁珠分选系统检测沙门氏菌[J]. 食品安全质量检测学报 2016(05)
- [17].抗苗勒管激素免疫磁珠的制备及其初步应用[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2020(04)
- [18].免疫磁珠富集鼠伤寒沙门氏菌条件的研究[J]. 食品科技 2015(08)
- [19].国产沙门氏菌免疫磁珠的制备及其应用[J]. 食品安全质量检测学报 2018(04)
- [20].免疫磁珠富集在食品中黄曲霉毒素B_1的应用[J]. 食品安全导刊 2018(03)
- [21].粪便具核梭杆菌的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价[J]. 免疫学杂志 2019(09)
- [22].免疫磁珠分选系统在急性髓系白血病干细胞分离中的应用[J]. 浙江中西医结合杂志 2008(10)
- [23].肝癌细胞单克隆抗体磁珠对人肝癌、胃癌细胞株特异性富集的实验研究[J]. 现代检验医学杂志 2017(06)
- [24].免疫磁珠分离技术及其在食源性致病菌检测中应用的进展[J]. 中国抗生素杂志 2014(12)
- [25].免疫磁珠技术应用研究概述[J]. 中国药师 2011(08)
- [26].免疫磁珠纯化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立[J]. 安徽医科大学学报 2011(08)
- [27].3种食源性细菌免疫磁珠联合ATP发光检测技术研究[J]. 中国动物检疫 2019(01)
- [28].基于NHS基团修饰的副溶血性弧菌免疫磁珠制备及其富集性能评价[J]. 安徽农业科学 2018(06)
- [29].自制免疫磁珠在前列腺肿瘤组织干细胞提取中的应用[J]. 中国组织工程研究 2016(01)
- [30].鸢尾黄斑病毒免疫磁珠RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 上海农业学报 2016(05)
标签：免疫磁珠间接论文; 抗体检测论文; 蛋白论文; 毕赤酵母表达系统论文;