牙周膜细胞内miR-23a、miR-30a发挥靶向调控作用的基因筛选

论文摘要

目的筛选测定牙周膜细胞内miR-23a、miR-30a发挥靶向调控作用的基因。方法采用miRanda、PicTar及TargetSan三个靶基因预测软件预测miR-23a、miR-30a的候选靶基因;通过体外炎性微环境模拟检测及炎症牙周膜细胞的miR-23a、miR-30a表达水平干预,采用实时定量PCR仪检测miR-23a、miR-30a及其候选靶基因表达情况,筛选miR-23a、miR-30a可能的靶基因;并采用免疫印迹法对靶蛋白进行进一步鉴定。结果预测软件提示,miR-23a、miR-30a有Runx2、CAMTA1、STAT1、STATB1、CNTTBIP、STAT5B、PPPAR七个共同的候选靶基因;实时定量PCR检测提示,STAT5B与Runx2可能是miR-23a、miR-30a的靶基因;免疫印迹检测提示STAT5B与Runx2蛋白表达水平变化趋势与实时定量PCR检测结果具有一致性,提示STAT5B可能是miR-23a的靶基因,Runx2可能是miR-30a的靶基因。结论 miR-23a、miR-30a均参与了炎性微环境下牙周膜细胞的生物学活性表达,且STAT5B、Runx2分别可能是miR-23a、miR-30a的靶基因。

论文目录

• 1 资料与方法
•   1.1 材料、试剂、仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 miR-23a、miR-30a靶基因预测方法
•     1.2.2 人牙周膜细胞分离培养方法
•     1.2.3 正常牙周膜细胞与炎症牙周膜细胞中的miR-23a、miR-30a表达水平检测方法
•     1.2.4 炎症牙周膜细胞中的miR-23a、miR-30a候选靶基因表达水平的检测方法及其在mRNA水平miR-23a、miR-30a对其候选靶基因表达水平影响的分析方法
•     1.2.5 WB转染处理在miR-30a、miR-30a蛋白水平检测对候选靶基因表达水平影响的分析方法
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 靶基因预测结果
•   2.2 细胞培养结果
•   2.3 qRT-PCR检测结果
•   2.4 WB转染检测结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王献刚,郝志红,袁清敏,冯保静

关键词: 牙周膜细胞,靶向调控,基因筛选

来源: 四川解剖学杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 口腔科学

单位: 河南省安阳市第六人民医院(口腔医院)口腔修复科

分类号: R781.4

页码: 1-4

总页数: 4

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