导读:本文包含了克隆牛论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:体细胞,克隆牛,关中,转基因,基因,胎盘,异常。
克隆牛论文文献综述
[1]（2019）在《世界第一头体细胞克隆牛“寿终正寝”》一文中研究指出新华社东京5月14日电世界第一头体细胞克隆牛"能都"14日在日本石川县死去。这头牛年龄已经超过19岁,属于自然死亡。据日本《读卖新闻》网站等媒体报道,石川县农林综合研究中心当天宣布了这一消息。该中心饲养的这头克隆牛死亡时年龄为19岁零10个月,而牛的正常寿命为20岁左右。(本文来源于《《科学与现代化》2019年第1期（总第078期）》期刊2019-03-01）
马馨,张胜,朱屹然,马盼盼,杨树宝[2]（2018）在《1例死亡克隆牛主要脏器组织学观察及胎盘印记基因甲基化水平分析》一文中研究指出虽然体细胞克隆技术已经在多种动物获得成功,但是仍然存在效率低、克隆胚胎发育异常等问题,严重限制了该技术的应用。为提高克隆效率,探讨克隆动物发育异常的原因,本研究对1例死亡克隆牛主要内脏器官进行了组织学观察,并对其胎盘印记基因甲基化状态进行分析。结果表明,此例死亡克隆牛主要内脏器官除肾脏外,均不同程度出现充血、增生及淋巴细胞浸润等病理变化。胎盘增生明显并伴有充血,胎盘中印记基因H19及Peg-10的甲基化水平分别为84.6%和88.6%,显着高于50%,出现超甲基化状态。推测体细胞核移植过程影响了供核细胞的表观重编程,导致了印记基因H19及Peg-10的迷乱的DNA甲基化状态,并影响胎盘及内脏器官的正常发育。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2018年11期）
郭梓茹[3]（2018）在《克隆牛妊娠异常胎盘miRNA的筛选及鉴定》一文中研究指出体细胞克隆在医学、农业、畜牧业中已有广泛的应用,但体细胞克隆胚胎发育率较低,尤其是哺乳动物的克隆效率更低。克隆牛在妊娠期间会发生妊娠异常、尿囊积液增多、腹围异常增大。胎盘是母体与胎儿之间进行物质交换的器官,其营养物质转运、激素合成及代谢能力会直接影响胎儿的生长和发育。研究发现几乎所有克隆哺乳动物都会发生胎盘异常,这可能是抑制克隆胚胎生长发育的主要原因之一。mi RNA是以序列特异性方式调节基因表达的内源性单链非编码RNA,通过与靶mRNA的3’UTR结合切割mRNA或者是抑制其翻译,在转录后起调控靶基因表达的作用,是基因表达的重要调控因子。miRNA测序是目前寻找重要关联基因,建立调控网络,阐明作用机理的重要方法。本研究通过Illumina高通量测序平台,比较体细胞克隆牛和正常牛胎盘之间mi RNA和mRNA的表达差异,筛选并验证有显着差异的miRNA和mRNA,利用生物信息分析法对差异表达的miRNA以及mRNA进行GO功能显着性富集分析、KEGG Pathway显着性富集分析,寻找调控妊娠维持相关的mi RNAs和重要基因,并建立体细胞克隆牛妊娠过程中妊娠维持相关基因的调控网络,研究其调控机理。本研究采集了2头180d妊娠异常体细胞克隆牛胎盘组织作为实验组,3头180d自然受精牛胎盘组织作为对照组。经Illumina高通量测序对采集的牛胎盘miRNA进行深度测序分析,筛选出990个成熟的mi RNAs,显着差异表达的miRNA有10个,其中7个显着上调,3个显着下调。荧光定量PCR对显着差异表达的10个miRNA进行验证,定量结果与测序结果一致。软件分析10个显着差异mi RNA的靶基因,发现1241个靶基因,这些靶基因显着富集的GO生物学过程有9项,细胞组分6项,分子功能5项,显着富集的KEGG通路有7条。通过转录组测序筛选出显着差异表达的mRNA362个,其中实验组中154个上调,208个下调,与差异表达miRNA靶向的mRNA有15个是一致的,bta-miR-205靶基因SLC14A2与尿运输相关、bta-miR-2411-3p靶基因BMP7与输尿管发育异常相关,bta-mi R-1298靶基因SLC16A4与离子跨膜运输相关,都与体细胞克隆牛尿囊积液增多、腹围异常增大相关。以上结果通过mi RNA及mRNA测序找到与妊娠维持相关的基因及通路,为改善体细胞克隆牛妊娠晚期异常提供了新的解决思路,为揭示妊娠异常的分子机制奠定了基础。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2018-06-01）
刘晓[4]（2018）在《克隆牛妊娠异常母体黄体miRNA的筛选及鉴定》一文中研究指出MiRNA是一类非编码内源性转录后调控小RNA,通过作用于靶基因的3′-UTR,抑制靶基因翻译或者直接导致其降解,以达到对靶基因的调控目的。据统计,miRNA能够调控人基因组近1/3的蛋白编码mRNA,因此,miRNA的挖掘、鉴定和功能验证是当前分子生物学领域的研究热点。体细胞克隆技术是指将动物的的体细胞核移入去核卵母细胞中,构成重组胚,并最终发育成完整个体的技术。克隆牛的早期妊娠率较高,但随着妊娠延续流产和异常妊娠(腹围偏大)时有发生,致使克隆效率较低。本实验旨在利用高通量测序技术,分析异常妊娠体细胞克隆牛和正常妊娠牛母体黄体组织中差异表达的miRNA,筛选并验证表达差异显着的mi RNA,分析得到与妊娠维持相关的候选靶基因,并初步建立与妊娠维持相关的靶基因和miRNA相互作用的调控网络,进而了解妊娠异常的分子调控机制。本研究采集2头180d妊娠异常克隆牛为实验组,3头180d正常妊娠牛为对照组,分别采集其黄体组织。利用Illumina测序平台,鉴定出2069个miRNAs,1759个miRNAs差异表达,其中11个显着上调,22个显着下调。利用SOAP靶基因分析软件预测出5746个靶基因,得出miRNA靶基因富集显着的KEGG通路和GO信号通路。分析发现hsa-mi R-874-5p、hsa-miR-152-5p、bta-miR-495、PC-5p-35049_13、PC-3p-41396_10与Bax,Caspase-9,TP53,AIF,Caspase-3,Cyto c,Apaf-1,ING2靶基因相互作用,通过调控黄体内的细胞凋亡途径,导致激素分泌水平异常,进而影响母牛妊娠的维持。选取表达量较高的9个表达差异显着的miRNA,利用荧光定量PCR对其在体细胞克隆组与正常妊娠组中的表达水平进行验证,结果显示6个与测序结果一致,3个测序不一致。选取细胞凋亡通路中的11个相关基因,利用荧光定量PCR检测其表达量变化,初步确认了黄体组织中细胞凋亡途径在控制母牛妊娠时的作用机制。本研究发现,实验组与对照组中存在着大量差异表达的miRNA,这些异常表达的miRNA与实验组妊娠异常有关。进一步对相关靶基因表达水平的鉴定发现,一些miRNA对黄体中细胞凋亡通路有一定的调控作用,为后续miRNA的功能验证和黄体中参与妊娠维持的调控机制的探索奠定了基础。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2018-06-01）
孔畅畅[5]（2017）在《体细胞克隆牛、克隆猪的DNA甲基化与羟甲基化》一文中研究指出随着克隆技术的不断发展,克隆技术面临的一些如个体成活率低、成活个体存在不同程度表型异常等问题日益得到重视,这一类表型异常和缺陷与基因组异常的甲基化所导致的症状相类似。DNA甲基化修饰与基因表达抑制相关,DNA羟甲基化功能虽研究较少,但它参与DNA去甲基化过程,极可能与促进基因表达相关。本实验从表观遗传学角度出发,选取DNA甲基化和羟甲基化这对紧密相连的表观遗传修饰作为研究对象,利用HPLC、LC-MS等技术探讨它们在整个基因组及特殊位点的修饰差异,探究造成这些差异的可能原因,最终目标将揭示DNA 5mC与5hmC对克隆动物成活和发育的重要影响,为提高克隆效率提供理论指导。通过HPLC技术,我们建立了组织和细胞总DNA甲基化(5mC)含量检测方法,检测了不同供体核(胎儿成纤维细胞系FFB和输卵管上皮细胞系FOV)存活克隆牛基因组DNA甲基化水平,对于死亡克隆牛我们检测的组织包括:耳组织,还有肌肉、肺脏、心脏、脾脏和肝脏组织样。利用LC-MS技术,我们建立了组织和细胞总DNA羟甲基化(5hmC)含量检测方法。对于不同供体核克隆牛单基因位点的甲基化和羟甲基化检测我们采用氧化亚硫酸氢盐(oxBS-seq)法,完成了对印记基因H19和Xist的5mC和5hmC检测。通过检测我们发现无论存活还是死亡克隆动物(牛、猪)DNA 5mC和5hmC均有异常,DNA 5mC重编程不完全,表现在5mC含量比正常繁殖动物高;存活克隆动物也存在DNA甲基化重编程不完全现象,但不完全程度要低,主要表现在DNA甲基化水平虽高于正常繁殖动物,但是低于死亡克隆动物。对于5hmC研究发现,存活克隆动物5hmC含量高于死亡克隆动物,但低于正常繁殖动物,这说明克隆动物5hmC重编程也异常。通过对于单基因位点的检测发现H19 DNA 5mC重编程异常对克隆牛存活和死亡贡献更大,存活克隆牛H19 5mC含量一般均低于50%,而死亡克隆牛5mC含量一般在70%附近,而Xist基因DNA 5mC差别不大。(本文来源于《河南大学》期刊2017-06-01）
马珊珊[6]（2016）在《转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响》一文中研究指出(上接第15期)第叁部分外源基因的稳定性检测本试验通过每隔1至2个月定期采样两头转基因牛、受体母牛、同饲养环境健康普通秦川牛的粪便、土壤、口腔拭子,提取DNA,PCR检测源基因是否发生基因漂移,进而证明转基因牛外源基因是否稳定。1试验材料1.1试验动物转基因牛1号、转基因牛2号、同饲养环境健康普通秦川牛、受体母牛(本文来源于《饲料广角》期刊2016年16期）
姜晓静,孙秀柱,朱化彬,杜卫华,郝海生[7]（2016）在《新生克隆牛中SFTPB基因,SFTPC基因表达量降低是导致呼吸衰竭的主要原因》一文中研究指出引言/目的动物克隆技术,作为一种新型的繁殖技术使得复制相同遗传背景的动物成为可能,并广泛应用于乳腺生物反应器的生产。然而,克隆技术存在动物死亡率高、存活率低等问题。新生克隆动物呼吸困难以致呼吸衰竭死亡是导致新生克隆动物死亡、克隆效率降低的主要原因之一。本试验以新生呼吸衰竭死亡克隆牛(荷斯坦牛)为材料,通过组织病理分析及基因表达模式分析研究新生克隆牛呼吸衰竭的分子病理。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十八届学术研讨会暨中日韩第四届动物繁殖学术交流会论文集》期刊2016-08-18）
马珊珊[8]（2016）在《转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响》一文中研究指出(上接第14期)第二部分转A-FABP基因牛与非转基因牛生物学特性比较与转基因动植物研究的迅速发展相比,转基因牛的安全性评价相对落后。本试验通过定期测量体重、体斜长、体直长、体高、胸围,临床观察两头转基因牛精神状态、反刍是否正常、排泄物状态,粪便寄生虫检查,血液生理生化检验,判断两头转基因牛生物学特性是否发生改变。(本文来源于《饲料广角》期刊2016年15期）
马珊珊[9]（2016）在《转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响》一文中研究指出转基因动物安全性问题,已成为世界各国科学家及公众关注的内容。因此,对转基因动物进行安全性评价已成为转基因研究不可缺少的一环,特别是其转入基因的稳定性、其自身生长发育情况,以及排泄物对周围环境是否产生影响等。本试验以在北京农学院出生的两头转A-FABP基因克隆牛为研究对象,定期分别测定两转基因牛的体型、外貌、发育情况,并检测两转基因牛、受体母牛、同饲养条件健康普通秦川牛粪便中寄生虫卵的数目;采用一定间隔时间持续采血,检验其外源基因是否有漂移现象;持续采集同一条件下饲喂的转基因牛与非转基因牛血液,检测其血常规、血生化指标差异;检测转基因牛与非转基因牛粪便虫卵的数量,比较两种粪便对蚯蚓生长、生殖及SOD活性的影响。试验结果表示,转基因牛的体重、体斜长、体直长、体高、胸围、血常规、血生化、粪便寄生虫卵基本生物学特性与普通牛基本一致。其血液、粪便、土壤、口腔拭子PCR检测中,只有转基因牛的血液中出现特异性目标基因,非转基因牛均未出现。分析转基因牛粪便和普通牛粪便饲养蚯蚓的情况得出:在体重上,转基因牛组饲喂的蚯蚓体重有低于普通牛组的趋势,在第70、84、98d时,转基因牛2组显着低于普通牛组;在产茧率上,转基因牛组饲喂的蚯蚓有低于普通牛组的趋势,在42d时转基因牛组显着低于普通牛组,56、70d时转基因牛2组显着低于普通牛组;在SOD活性上,70d时转基因牛1组显着高于普通牛组。由以上试验得出,转入脂肪性脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因的克隆牛外源基因稳定,且其粪便可致蚯蚓重量、产茧数下降,SOD活性增高。(本文来源于《饲料广角》期刊2016年14期）
江南[10]（2016）在《克隆牛》一文中研究指出1993年2月,法国国家农业研究院的一个研究小组成功地克隆出了5头小牛。克隆是一个复杂的过程。首先研究人员要从一头母牛那里取得大约30个卵细胞(称这头母牛为A1),将细胞核从每一个卵细胞中取出。然后研究人员从另一头母牛体内获取一个(本文来源于《阅读》期刊2016年21期）
克隆牛论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
虽然体细胞克隆技术已经在多种动物获得成功,但是仍然存在效率低、克隆胚胎发育异常等问题,严重限制了该技术的应用。为提高克隆效率,探讨克隆动物发育异常的原因,本研究对1例死亡克隆牛主要内脏器官进行了组织学观察,并对其胎盘印记基因甲基化状态进行分析。结果表明,此例死亡克隆牛主要内脏器官除肾脏外,均不同程度出现充血、增生及淋巴细胞浸润等病理变化。胎盘增生明显并伴有充血,胎盘中印记基因H19及Peg-10的甲基化水平分别为84.6%和88.6%,显着高于50%,出现超甲基化状态。推测体细胞核移植过程影响了供核细胞的表观重编程,导致了印记基因H19及Peg-10的迷乱的DNA甲基化状态,并影响胎盘及内脏器官的正常发育。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
克隆牛论文参考文献
[1]..世界第一头体细胞克隆牛“寿终正寝”[C].《科学与现代化》2019年第1期（总第078期）.2019
[2].马馨,张胜,朱屹然,马盼盼,杨树宝.1例死亡克隆牛主要脏器组织学观察及胎盘印记基因甲基化水平分析[J].中国兽医杂志.2018
[3].郭梓茹.克隆牛妊娠异常胎盘miRNA的筛选及鉴定[D].内蒙古农业大学.2018
[4].刘晓.克隆牛妊娠异常母体黄体miRNA的筛选及鉴定[D].内蒙古农业大学.2018
[5].孔畅畅.体细胞克隆牛、克隆猪的DNA甲基化与羟甲基化[D].河南大学.2017
[6].马珊珊.转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响[J].饲料广角.2016
[7].姜晓静,孙秀柱,朱化彬,杜卫华,郝海生.新生克隆牛中SFTPB基因,SFTPC基因表达量降低是导致呼吸衰竭的主要原因[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十八届学术研讨会暨中日韩第四届动物繁殖学术交流会论文集.2016
[8].马珊珊.转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响[J].饲料广角.2016
[9].马珊珊.转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响[J].饲料广角.2016
[10].江南.克隆牛[J].阅读.2016
论文知识图
