导读:本文包含了合成和转运论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:须糖多孢菌,PadR,转录调控因子,转运蛋白
合成和转运论文文献综述
何思颖,柏丹,夏伦,万千千,罗粤雯[1]（2019）在《PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响》一文中研究指出为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。(本文来源于《湖南师范大学自然科学学报》期刊2019年05期）
李晓[2]（2019）在《叁磷酸核苷酸转运蛋白调控甘蓝型油菜油脂合成研究》一文中研究指出油菜种子的含油率是油菜的重要农艺性状之一,提高油菜的含油率可以增加油菜产油量,提高油菜种植效益。植物中脂肪酸的生物合成是一个非常复杂的调控网络,不仅受到植物体内多种酶、底物、能量和转录因子等的调控,还受到外界环境因素如光、温度、氧气浓度等的影响。叁磷酸核苷酸转运蛋白(NTT)可以将胞质ATP转运至质体中,满足脂肪酸合成和其他代谢活动需要,而植物NTT是否通过输送ATP参与调控种子油脂合成还尚未见报道。本研究基于脂肪酸代谢通路,从能量代谢与脂质生物合成的关系入手,利用分子生物学方法,探究甘蓝型油菜BnNTT基因参与调控脂肪酸生物合成的机制。首先,本研究运用生物工程技术构建过表达和CRISPR/Cas9基因编辑体系载体。然后,以甘蓝型油菜Westar材料为受体进行遗传转化,获得转基因植株。再借助GC-MS分析转基因植株成熟种子的含油率和脂肪酸组成。最后结合种子脂质合成过程中的基因表达量数据,从而综合性分析BnNTT基因对甘蓝型油菜种子中油脂积累调控作用。研究发现,在转基因植株中利用CaMV 35S启动子驱动BnNTTA7-1基因过量表达,植株成熟种子的油脂含量显着性降低,暗示BnNTTA7-1对甘蓝型油菜种子中的脂肪酸合成具有一定的抑制作用。另外,由CaMV 35S启动子分别驱动BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8基因在转基因植株中超表达,结果显示成熟种子的含油率均有显着性升高,因此我们推测BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8在一定程度上正向调控甘蓝型油菜种子油脂的积累。此外,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得的BnNTTA7-1、BnNTTC6-1和BnNTTC6-2叁个基因均被编辑的转基因植株,发现突变体A7C6~(Mutant)植株的含油率与野生型相比没有显着的差异。研究结果还显示,CRISPR突变体材料的脂肪酸组成与35S过表达载体的转基因植株材料的脂肪酸组成相比存在显着的差异,表明BnNTTA7-1、BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8 4个基因对甘蓝型油菜油脂合成的调控机制不尽一致。本研究通过探究NTT转运体在油菜种子油脂积累过程中的调控作用,填补了脂质合成代谢中NTT转运体分子机制的空白,为油菜高油育种提供理论基础,同时也为植物油脂合成研究提供新思路。(本文来源于《华中农业大学》期刊2019-06-01）
王永成,杨亚军,候现新,杨颖,肖志艳[3]（2019）在《尿酸盐转运体1抑制剂的设计、合成及活性研究》一文中研究指出尿酸盐转运体1 (urate transporter 1, URAT1)是抗高尿酸血症的有效靶点。基于目前处于临床Ⅱ期的URAT1抑制剂URC-102的结构,设计合成了14个URC-102类似物,其中4个化合物(9b、9c、10e、10g)显示较强的URAT1抑制活性,化合物9b对URAT1的半数抑制浓度IC_(50)达到0.061μmol·L~(-1),显着强于雷西纳德和苯溴马隆。初步的构效关系研究为后续结构优化提供了依据。(本文来源于《药学学报》期刊2019年06期）
潘辛梅,陈勇川[4]（2019）在《钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂达格列净的合成与临床概述》一文中研究指出90%的糖尿病为2型糖尿病~([1])。糖尿病临床表现糖代谢紊乱,并发症众多,特别是血糖持续升高会引起心血管并发症,并最终导致死亡~([2])。与以往的降糖药比较,钠-葡萄糖协同转运蛋白(sodiumglucose cotransporter 2,SGLT2)抑制剂是一种新型抗糖尿病药物,以肾脏为靶点,作用机制独特。近年也有相关研究表明SGLT2通过感应葡萄糖来分泌和调控胰高血糖素~([3])。达格列净为一种SGLT2抑制剂,化学名称为2-氯-5-(β-D-吡喃葡萄糖-1-基)-4'-甲氧基二苯甲烷~([4])。(本文来源于《山西医药杂志》期刊2019年08期）
余玺辉[5]（2019）在《双苯并咪唑类阴离子转运体的合成、阴离子跨膜转运及抗肿瘤活性》一文中研究指出细胞内外正常的阴离子浓度动态平衡是细胞维持正常形态和功能的基础。能够促进阴离子跨膜转运的有机小分子化合物即阴离子转运体,因可紊乱细胞内外正常的阴离子,特别是氯离子浓度动态平衡以诱导细胞凋亡,具有发展成为一类新型抗肿瘤药物的良好前景。虽然目前已有一些阴离子转运体表现出优异的抗肿瘤活性,但是阴离子转运体的抗肿瘤活性与离子转运活性之间的相关性尚不十分清晰,而且阴离子转运体的抗肿瘤作用机制研究还处于相对早期阶段。因此,为了初步阐明这些问题以及推动阴离子转运体在抗肿瘤药物研发领域中的应用,本论文设计合成了一系列双苯并咪唑类阴离子转运体,并详细研究了其在脂质体模型和细胞上的阴离子转运、肿瘤细胞增殖抑制活性以及可能的作用机制。本论文共分为叁章。第一章对近十年来阴离子转运体在细胞上的阴离子转运与抗肿瘤活性的研究现状进行了总结,并归纳了阴离子转运活性的优化策略,简述了本论文课题的设计思路和研究意义。第二章详细测试了本课题组已合成的1,3-双(2-苯并咪唑基)苯及其衍生物的抗肿瘤活性及可能的作用机制,以期初步阐明该类化合物的抗肿瘤活性与其阴离子转运活性之间的相关性。MTT法测试表明,这些化合物的大部分都具有较好的肿瘤抑制活性。构效关系分析表明只有当两个苯并咪唑单元处于间位且保留其-NH时才具有抗肿瘤活性。以1,3-双(2-苯并咪唑基)苯,1,3-双[2-(5-叁氟甲基-苯并咪唑基)]苯,1,3-双[2-(5-叁氟甲基-苯并咪唑基)]-5-硝基苯和1,3-双[2-(5-叁氟甲基-苯并咪唑基)]-5-甲氧基苯为例,基于HeLa细胞的MQAE和吖啶橙细胞染色实验结果表明,这些化合物能够引起细胞内氯离子浓度升高和碱化溶酶体,而且在细胞上的离子转运活性与脂质体模型上的离子转运活性相一致。此外,细胞外液的氯离子可明显增强这些化合物对肿瘤细胞的抑制活性,表明氯离子在细胞毒性中起着较重要的作用。细胞核染色质的固缩及线粒体膜电位的下降表明,这些化合物可能是通过细胞凋亡机制发挥抗肿瘤活性的。第叁章设计合成了一系列氟原子取代的1,3-双(2-苯并咪唑基)苯衍生物,以优化阴离子转运和抗肿瘤活性。结果发现,在中间苯环上引入氟原子不仅能提高这些衍生物的氯离子转运活性,还能明显提高其抗肿瘤增殖活性;苯并咪唑单元上的氟原子总数能显着提高氯离子转运活性,但对抗肿瘤活性的影响不大。虽然苯并咪唑单元上的氟原子位置对氯离子转运活性影响不大,但是当苯并咪唑单元上有不超过2个氟原子时,氟原子在苯并咪唑单元上的4位或7位取代时细胞毒性较弱。另外,基于HeLa细胞上的MQAE和吖啶橙细胞染色实验结果表明,1,3-双[2-(4,5,6,7-四氟-苯并咪唑基)]-5-氟苯不仅能够紊乱细胞内外的氯离子平衡,还能碱化溶酶体。细胞核染色质的固缩及线粒体膜电位的下降表明该化合物的抗肿瘤机制可能为凋亡。综上所述,本研究发现了双苯并咪唑类阴离子转运体通过紊乱阴离子平衡发挥抗肿瘤作用,并采用氟原子修饰的策略优化了 1,3-双(2-苯并咪唑基)苯的离子转运活性和抗肿瘤活性,初步阐明了氟原子修饰对阴离子转运体的阴离子转运活性和抗肿瘤活性的影响。这些结果可望为通过紊乱阴离子动态平衡而发挥药理活性的新型抗肿瘤小分子药物的合理设计提供一定的参考。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-04-18）
孟泓君[6]（2019）在《拟南芥ABCG36转运蛋白在木质素生物合成过程中的功能研究》一文中研究指出木质素(Lignin)是自然界含量第二丰富的植物生物聚合物,主要沉积在维管植物的次生细胞壁中,对于营养物质运输、机械支持和植物病原体防御等生理过程至关重要。同时,木质素在工业农业生产上也有着广泛应用。木质素主要由对香豆醇(H型单体,p-coumaryl alcohol)、松柏醇(G型单体,coniferyl alcohol)和芥子醇(S型单体,sinapyl alcohol)叁种单体氧化偶联产生,这些单体均通过苯丙烷代谢途径合成,最终通过过氧化物酶和漆酶在细胞壁中聚合。然而,木质素单体合成后,从胞质溶胶运输到细胞壁的机制仍不完全清楚。因此,阐明木质素单体的跨膜转运过程,对于研究木质素生物合成与次生细胞壁调控具有重要意义。经证实,木质素单体(Monolignol)的跨膜转运过程需要利用ATP水解产生的能量,这就暗示了这一过程可能需要ATP结合盒(ABC)转运蛋白的参与。前人已证实,拟南芥中的H型木质素单体由AtABCG29蛋白负责转运。但木质素另外两类重要单体(G和S)如何被转运目前尚不清楚。本研究发现,拟南芥abcg36突变体的根生长明显受到G型和S型木质素单体的抑制,暗示ABCG36蛋白可能参与了G型和S型木质素单体的跨膜转运,为了阐明ABCG36在木质素单体转运中的生物学功能,本论文开展了深入的研究,具体结果如下:1.采用G型和S型木质素单体胁迫处理野生型(WT)拟南芥并进行转录组测序分析,发现AtABCG36转运蛋白基因表达受到显着诱导,暗示该基因可能参与G型和S型木质素单体的转运。从拟南芥中克隆了AtABCG36基因,同时筛选并鉴定获得了T-DNA插入突变体abcg36-1和abcg36-2;2.外源施加G型和S型木质素单体处理拟南芥abcg36-1、abcg36-2突变体,与野生型对照相比,abcg36-1、abcg36-2突变体表现出对G型和S木质素单体更为敏感的表型,植物生长受到抑制,根长更短;3.组织表达谱和原位杂交分析显示,AtABCG36在拟南芥根和茎中表达量较高,而在茎中木质部区域大量积累。亚细胞定位分析证实,AtABCG36蛋白定位在细胞膜上;4.组织切片分析显示,与野生型相比,突变体abcg36-1、abcg36-2中木质部细胞的细胞壁厚度变薄。木质素含量测定发现,突变体abcg36-1、abcg36-2茎中木质素积累显着降低,且木质素单体比例也发生了明显变化。荧光定量检测分析木质素合成途径的相关基因表达水平发现,与野生型相比,abcg36-1、abcg36-2突变体中重要调控因子MYB46、MYB83及关键酶基因CCR1、CAD1和CCoAOMT1等表达水平均不同程度地下调;5.在酵母中表达AtABCG36基因,能够显着增加其对G型和S型木质素单体胁迫的耐受能力。同时,AtABCG36转运蛋白也增强了酵母细胞外排G型和S型木质素单体的能力;6.进一步通过生物信息学分析,克隆了在毛果杨中AtABCG36的同源蛋白PtrABCG36。将PtrABCG36基因在拟南芥中超量表达,与野生型拟南芥相比,转基因植株表现出对G型和S型木质素单体胁迫更强的耐受性,且PtrABCG36超量表达促进了转基因拟南芥茎中木质素的合成。在酵母细胞中,PtrABCG36蛋白同样促进了G型和S型木质素单体外排。综上所述,本研究克隆了拟南芥木质素合成代谢途径上一个重要的转运蛋白基因AtABCG36,遗传和生化实验证明了该基因具有转运G型和S型木质素单体跨膜运输的能力,从而影响了拟南芥茎中木质部的发育。同样地,在木本植物杨树中AtABCG36的同源蛋白PtrABCG36也具有相似的木质素单体转运功能。本研究将有助于阐明植物体内木质素的转运机制,为木材发育调控机制的解析奠定基础。(本文来源于《西南大学》期刊2019-04-08）
张继云[7]（2019）在《基于PepT1转运体的姜黄素二肽衍生物的合成、吸收及生物活性评价》一文中研究指出姜黄素[1,7-二(4-羟基-5-甲氧基)苯基-1,6-庚二烯-3,5二酮)是从姜科植物姜黄(Curcuma Longa L.)分离出的酚类化合物,在印度和中国有着悠久的传统药物的使用历史。药理作用研究表明,姜黄素具有抗肿瘤,抗肝纤维化,抗炎,抗微生物,抗氧化和抗病毒等生物活性。姜黄素在临床试验中用于治疗各种类型的癌症,包括肝癌,结肠癌,多发性骨髓瘤,胰腺癌等。但由于其水溶性差,口服吸收较少,致使生物利用度低,限制其临床应用。寡肽转运蛋白1(oligopeptide transporter 1,PepT1)是一种低亲和力,高转运能力的转运蛋白,主要转运二肽和叁肽,属于质子依赖型寡肽转运载体(POT)家族成员。PepT1已成为一个引人注目的药物设计目标,因为一些吸收不良的药物可以修饰成基于PepT1的肽前体药物,以改善膜通透性,最终提高母体药物口服吸收。本论文以姜黄素为研究对象,基于PepT1设计合成了10个新的姜黄素二肽衍生物,并对10个化合物进行结构鉴定。采用HPLC法测定姜黄素及其二肽衍生物的溶解度。通过荧光法优化姜黄素及其二肽衍生物的摄取条件并进行摄取评价;采用LC-MS/MS法测定细胞内药物的含量,建立Caco-2细胞transwell小室模型测定药物跨膜转运量;通过体外代谢模型(大鼠肝微粒体酶孵育)进一步了解其代谢情况。采用人肝星状细胞LX-2和肝癌细胞HepG-2和SMMC-7721进行活性评价。研究内容具体如下:一、姜黄素二肽衍生物合成及溶解度测定选择了甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸设计合成了 10个姜黄素二肽衍生物(5a-5j)。采用DCC法缩合得到10个二肽,利用叁氟乙酸脱去二肽氨基端的Boc保护,氯乙酰氯作为连接链连接姜黄素和二肽,最后通过LiOH脱去羧基端的甲酯基的保护得到1 0个姜黄素二肽衍生物。通过HRMS-ESI、1H NMR与13C NMR对化合物进行结构确证。采用HPLC法对各个化合物进行纯度检查,测定化合物平衡度溶解度及化学稳定性。结果表明10个新合物溶解度和稳定性较姜黄素都有所提高。二、姜黄素及其二肽衍生物吸收评价采用体外Caco-2细胞模型,对姜黄素和10个化合物进行吸收评价。1、通过倒置荧光显微镜观察药物进入细胞过程;采用荧光法测定细胞中药物的荧光强度,优化摄取条件,确定最佳摄取时间为60 min,药物浓度为100 μM;对姜黄素及化合物5a-5j在Caco-2细胞的摄取情况进行评价。结果表明5d和5e表现出比姜黄素更强的荧光强度,其余化合物与姜黄素相比无显着性差异。通过加入PepT1经典底物Gly-Sar作为抑制剂,姜黄素的摄取不受Gly-Sar的影响,而5d和5e的摄取被Gly-Sar显着削弱。2、建立测定细胞裂解液中姜黄素及其二肽衍生物浓度的LC-MS/MS法,分析姜黄素及化合物5d和5e在Caco-2细胞的摄取量以及有抑制剂Gly-Sar存在下摄取量的变化。结果表明与姜黄素相比,化合物5d和5e有更高的细胞摄取量。通过添加PepT1经典底物Gly-Sar作为抑制剂,姜黄素的摄取量不受Gly-Sar的影响,但5d和5e的摄取呈现剂量依赖性地抑制,提示化合物5d和5e的细胞摄取可能是由于结构存在二肽而被寡肽转运蛋白PepT1识别并摄取。3、建立了Caco-2细胞Transwell小室模型来考察姜黄素、化合物5d和5e的跨膜转运情况。根据测定的表观渗透系数(Papp),化合物5d和5e分别是姜黄素的1.5倍和2.8倍,5e透膜吸收明显优于姜黄素。5d和5e的累计转运量明显高于姜黄素,在Gly-Sar的参与下转运量显着性降低,进一步证明化合物5d和5e的吸收增加是由于PepT1介导的。4、为了探讨化合物5d和5e是否可能是姜黄素的前药,构建大鼠肝微粒体体外孵育模型,以NADPH供氢进行Ⅰ相代谢研究,以UDPGA为糖基供体进行葡萄糖醛酸结合反应,采用液相色谱-高分辨质谱(UFLC-QTOF-MS)法分析原型药物及其代谢代谢产物。结果表明化合物5d和5e的代谢产物中均检测到姜黄素;化合物5d和5e在肝微粒体中检测到四氢、六氢等还原产物以及葡萄糖醛酸结合产物,提示化合物5d和5e有可能作为姜黄素的前药,但有待于进一步研究。叁、姜黄素及其二肽衍生物生物的活性评价在研究抑制肝星状细胞增殖活性方面,通过MTT法评估了姜黄素及其二肽衍生物在体外对人肝星状细胞LX-2细胞抗增殖活性,大多数衍生物表现出有效的抗增殖活性,尤其是化合物5e的IC50值在LX-2中为13.08μM,其表现出比姜黄素更高的效力(IC50=22.62μM)。为了探索这些姜黄素及其二肽衍生物的抑制肝癌细胞增殖活性方面,通过MTT法评估其在体外对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的抗增殖活性。大多数衍生物表现出有效的抗增殖活性,尤其是化合物5e的IC50值在HepG2和SMMC-7721中分别为23.35和19.67μM,其表现出比姜黄素更高的效力(HepG2:IC50=35.81,SMMC-7721:IC50=22.89μM)。化合物5d(HepG2:IC50=40.25,SMMC-7721:IC50=35.40μM)显示出与姜黄素相似的活性。(本文来源于《南京中医药大学》期刊2019-03-18）
姜玉洁,杨欢,陈懂燕,蔡晓杰,陈秋云[8]（2018）在《葡萄糖转运蛋白-1-Ag@Mn探针的合成及在胰腺癌细胞靶向成像中的应用》一文中研究指出目的构建偶联葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、锰离子及荧光染料Cy5. 5的核酸银纳米探针,探讨其在胰腺癌细胞靶向成像中的应用。方法以单链DNA为模板合成核酸银纳米簇,通过碱基互补配对及静电吸附偶联GLUT-1核酸适配体、Mn离子,在其表面连接Cy5. 5,形成GLUT-1-Ag@Mn纳米探针;透射电镜检测纳米探针的均匀性及分散性; CCK-8检测共培养小鼠成纤维细胞及人胰腺癌细胞的增殖活性;激光共聚焦成像检测纳米探针的靶向性; 3. 0T核磁共振体外成像检测其对T1加权成像的信号增强效应。结果透射电镜提示纳米探针水溶性好、分散性高,粒径小而均一; CCK-8检测提示各组细胞的存活率均大于90%,各组间细胞存活率差异无统计学意义(P> 0. 05)。激光共聚焦成像提示纳米探针能够更多的靶向高表达GLUT-1 Pa Tu8988细胞。MRI T1WI体外检测提示,纳米探针能增高Pa Tu8988细胞T1WI信号强度。结论 GLUT-1-Ag@Mn纳米探针具有良好的生物相容性及理化性质,可靶向检测高表达GLUT-1的胰腺癌细胞,增高T1WI信号强度,有望为胰腺癌早期诊断提供依据。(本文来源于《海军医学杂志》期刊2018年06期）
黄思,刘浩,杨滔,何芋岐,陆远富[9]（2018）在《核受体FXR在胆汁酸合成与转运调节中作用的研究进展》一文中研究指出FXR是胆汁酸受体的法尼基衍生物X受体,是核受体超家族的一员。胆汁酸与羧基端配体依赖的转录活化域结合可激活FXR,从而影响其下游靶基因表达,继而调节胆汁酸的生成、分泌、重吸收以及胆汁酸和胆固醇的稳态平衡,在胆汁酸代谢通路中发挥举足轻重的作用。目前,FXR已成为治疗代谢性疾病、心血管疾病和胆汁淤积性疾病相关药物开发的重要靶点。FXR的激动剂或抑制剂有可能成为治疗胆汁淤积性疾病的潜在药物。(本文来源于《山东医药》期刊2018年28期）
李海峰,徐仁根,李云钢,陈志军,张晓军[10]（2018）在《探讨多巴胺转运蛋白显像剂~(11)C-β-CFT合成效率的影响因素》一文中研究指出本文以~(11)C-Triflate-CH3为甲基化试剂合成多巴胺转运蛋白显像剂~(11)C-β-CFT,探讨~(11)C-β-CFT合成效率的影响因素,优化合成条件,提高其合成效率。使用国产合成模块PET-CM-3H-IT-Ⅰ全自动化合成~(11)C-β-CFT,通过研究合成过程中反应溶剂、轰靶时间、前体量及淋洗终产品条件等影响因素,得到优化后~(11)C-β-CFT的生产条件:轰靶时长10~24 min,前体浓度为0.5~1.0g/L,以0.2 mL体积比V(丙酮)∶V(乙腈)=1∶1为溶剂,反应条件为室温。从传输~(11)C-CO2到终产品的总合成时间为16min,产量为(8.07±1.94)GBq(n=76);此条件下~(11)C-β-CFT的合成效率为(76.93±6.49)%(n=76,~(11)CTriflate-CH3校正效率),产品的放化纯度大于97%,比活度(56.26±1.55)TBq/g。优化后的生产条件可以提高~(11)C-β-CFT合成效率,解决了Sep-Pak C18柱残留产品过多的问题,可实现稳定、全自动化合成~(11)C-β-CFT且保证产品满足临床需求。(本文来源于《同位素》期刊2018年05期）
合成和转运论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
油菜种子的含油率是油菜的重要农艺性状之一,提高油菜的含油率可以增加油菜产油量,提高油菜种植效益。植物中脂肪酸的生物合成是一个非常复杂的调控网络,不仅受到植物体内多种酶、底物、能量和转录因子等的调控,还受到外界环境因素如光、温度、氧气浓度等的影响。叁磷酸核苷酸转运蛋白(NTT)可以将胞质ATP转运至质体中,满足脂肪酸合成和其他代谢活动需要,而植物NTT是否通过输送ATP参与调控种子油脂合成还尚未见报道。本研究基于脂肪酸代谢通路,从能量代谢与脂质生物合成的关系入手,利用分子生物学方法,探究甘蓝型油菜BnNTT基因参与调控脂肪酸生物合成的机制。首先,本研究运用生物工程技术构建过表达和CRISPR/Cas9基因编辑体系载体。然后,以甘蓝型油菜Westar材料为受体进行遗传转化,获得转基因植株。再借助GC-MS分析转基因植株成熟种子的含油率和脂肪酸组成。最后结合种子脂质合成过程中的基因表达量数据,从而综合性分析BnNTT基因对甘蓝型油菜种子中油脂积累调控作用。研究发现,在转基因植株中利用CaMV 35S启动子驱动BnNTTA7-1基因过量表达,植株成熟种子的油脂含量显着性降低,暗示BnNTTA7-1对甘蓝型油菜种子中的脂肪酸合成具有一定的抑制作用。另外,由CaMV 35S启动子分别驱动BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8基因在转基因植株中超表达,结果显示成熟种子的含油率均有显着性升高,因此我们推测BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8在一定程度上正向调控甘蓝型油菜种子油脂的积累。此外,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得的BnNTTA7-1、BnNTTC6-1和BnNTTC6-2叁个基因均被编辑的转基因植株,发现突变体A7C6~(Mutant)植株的含油率与野生型相比没有显着的差异。研究结果还显示,CRISPR突变体材料的脂肪酸组成与35S过表达载体的转基因植株材料的脂肪酸组成相比存在显着的差异,表明BnNTTA7-1、BnNTTC6-1、BnNTTC6-2和BnNTTC8 4个基因对甘蓝型油菜油脂合成的调控机制不尽一致。本研究通过探究NTT转运体在油菜种子油脂积累过程中的调控作用,填补了脂质合成代谢中NTT转运体分子机制的空白,为油菜高油育种提供理论基础,同时也为植物油脂合成研究提供新思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
合成和转运论文参考文献
[1].何思颖,柏丹,夏伦,万千千,罗粤雯.PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响[J].湖南师范大学自然科学学报.2019
[2].李晓.叁磷酸核苷酸转运蛋白调控甘蓝型油菜油脂合成研究[D].华中农业大学.2019
[3].王永成,杨亚军,候现新,杨颖,肖志艳.尿酸盐转运体1抑制剂的设计、合成及活性研究[J].药学学报.2019
[4].潘辛梅,陈勇川.钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂达格列净的合成与临床概述[J].山西医药杂志.2019
[5].余玺辉.双苯并咪唑类阴离子转运体的合成、阴离子跨膜转运及抗肿瘤活性[D].南方医科大学.2019
[6].孟泓君.拟南芥ABCG36转运蛋白在木质素生物合成过程中的功能研究[D].西南大学.2019
[7].张继云.基于PepT1转运体的姜黄素二肽衍生物的合成、吸收及生物活性评价[D].南京中医药大学.2019
[8].姜玉洁,杨欢,陈懂燕,蔡晓杰,陈秋云.葡萄糖转运蛋白-1-Ag@Mn探针的合成及在胰腺癌细胞靶向成像中的应用[J].海军医学杂志.2018
[9].黄思,刘浩,杨滔,何芋岐,陆远富.核受体FXR在胆汁酸合成与转运调节中作用的研究进展[J].山东医药.2018
[10].李海峰,徐仁根,李云钢,陈志军,张晓军.探讨多巴胺转运蛋白显像剂~(11)C-β-CFT合成效率的影响因素[J].同位素.2018