色氨酸对产肠毒素大肠杆菌感染SD大鼠肠道的防御作用

论文摘要

旨在研究色氨酸对产肠毒素大肠杆菌（ETEC）感染损伤SD大鼠肠道的防御作用。本试验采用2*2双因子试验设计,将40只28日龄雌性SD大鼠,体质量（68.41±0.29）g,随机分为4组:基础日粮组（B）;ETEC攻毒组（E,1.0×108 ETEC K88）;色氨酸缺乏组（I,0.1 mL/d、10 g/L依那普利）。色氨酸缺乏+ETEC攻毒组（E+I,1.0×108 ETEC K88+0.1 mL/d、10 g/L依那普利）,每组10个重复,每个重复1只。采用H.E染色组织切片观察、酶联免疫吸附测定（ELISA）、三重聚合酶链式反应（PCR）、免疫蛋白印迹、实时荧光定量（RT-PCR）和变性梯度凝胶电泳（DGGE）法分别对SD大鼠肠道细胞因子水平、抗菌肽表达和蛋白水平、粪便中ETEC数量以及盲肠微生物区系变化进行检测。结果表明,依那普利通过抑制ACE2酶阻碍肠道色氨酸吸收,显著降低大鼠空肠和回肠黏膜绒毛高度、淋巴细胞数量和绒毛高度/隐窝深度值（P<0.05）;ETEC攻毒显著降低大鼠空肠淋巴细胞数量、绒毛高度/隐窝深度值（P<0.05）和回肠绒毛高度和淋巴细胞数量（P<0.05）。ETEC攻毒使SD大鼠粪便中ETEC数量显著增高（P<0.05）。依那普利抑制剂对SD大鼠粪便中ETEC数量无显著影响（P<0.05）;依那普利通过抑制ACE2酶阻碍肠道色氨酸吸收增加空肠和回肠IL-6（P<0.05）和空肠TNF-α质量浓度（P=0.059）,降低空肠TGF-β质量浓度（P=0.056）;ETEC攻毒使空肠IL-6和回肠IL-6、IL-8和TNF-α质量浓度显著增加（P<0.05）,降低空肠TGF-β质量浓度（P=0.059）。依那普利通过抑制ACE2酶阻碍肠道色氨酸吸收显著降低大鼠空肠和回肠Defa-5、BD-2基因mRNA相对表达量（P<0.05）;ETEC攻毒使空肠Defa-5、IDO基因和回肠IDO基因mRNA相对表达量显著增加（P<0.05）;依那普利通过抑制ACE2酶阻碍肠道色氨酸吸收使空肠、回肠mTOR、BD-2蛋白水平显著降低（P<0.05）,使空肠TLR-4蛋白水平显著增加（P<0.05）。色氨酸缺乏、ETEC攻毒降低盲肠微生物多样性,降低拟杆菌门微生物数量,色氨酸不缺乏组盲肠微生物多样性优于缺乏组。结果显示色氨酸通过维持肠道炎性细胞因子浓度稳定、促进肠道黏膜发育和提高肠道抗菌肽基因表达改善肠道微生态环境,对ETEC感染SD大鼠肠道具有防御作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验主要试剂
•   1.2 试验设计
•   1.3 饲养管理和日粮组成
•   1.4 样品采集
•   1.5 三重PCR检测粪便中ETEC数量
•   1.6 Western blot检测mTOR、TLR-4、AKT和 β-defensins-2蛋白水平
•   1.7 荧光定量PCR法检测肠道黏膜抗菌肽基因mRNA相对表达量
•   1.8 变性梯度凝胶电泳检测盲肠微生物区系结构
•   1.9 数据处理和分析
• 2 结果
•   2.1 肠道黏膜形态结构
•   2.2 粪便ETEC数量结果
•   2.3 肠道黏膜细胞因子浓度
•   2.4 肠道抗菌肽基因相对表达量
•   2.5 肠道mTOR、AKT、TLR-4和BD-2蛋白水平
•   2.6 SD大鼠盲肠微生物区系
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李金龙,王瑶,马娅君,陈庆菊,卢昌文,唐志如

关键词: 色氨酸,大鼠,产肠毒素大肠杆菌,肠道,防御机制

来源: 中国兽医学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 西南大学动物科技学院生物饲料与分子营养实验室,重庆市潼南区农业委员会重庆市潼南区塘坝镇畜牧兽医站

基金: 国家自然科学基金资助项目(31772610),国家重点研发计划资助项目(2018YFD0501000),重庆市留学人才创新计划重点资助项目(cx2017024)

分类号: S852.61

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.10.14

页码: 1963-1973

总页数: 11

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