CSFV E2蛋白主要抗原区域在马克斯克鲁维酵母中的表达及小鼠免疫

论文摘要

猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起的高度接触传染性和致死性疾病.疫苗预防接种是控制猪瘟病毒传播的重要措施,目前我国使用的弱毒疫苗均为1.1亚型猪瘟病毒兔化弱毒株.随着病毒的不断变异,2.1亚型猪瘟病毒已经逐渐成为我国的主要流行毒株.本研究利用马克斯克鲁维酵母研究了2.1b型CSFV E2蛋白及其截短体mE2（690-916aa）在马克斯克鲁维酵母中的重组表达,发现去除E2蛋白跨膜区域可以显著提高E2蛋白表达水平,mE2的表达量在5L发酵罐中达1.25～2.5g/L.经分子筛纯化,mE2蛋白纯度达90%.纯化的mE2作为抗原蛋白,注射免疫小鼠28d后,可诱导小鼠产生抗CSFV的IgG特异性抗体,表明马克斯克鲁维酵母重组表达的mE2蛋白具有较好的免疫原性.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株、质粒
•   1.2 表达外源蛋白的马克斯克鲁维重组菌株构建
•   1.3 外源蛋白在马克斯克鲁维酵母表达的检测方法
•     1.3.1 抗原蛋白多克隆抗体制备
•     1.3.2 外源蛋白在马克斯克鲁维酵母中的表达与鉴定
•   1.4 马克斯克鲁维酵母重组菌高密度发酵和蛋白纯化
•   1.5 抗原蛋白的免疫和免疫效果的检测
• 2 结果
•   2.1 CSFV 1.1型与2.1b型中E2蛋白的序列差异性分析
•   2.2 CSFV E2蛋白及其截短体mE2的表达与鉴定
•   2.3 KM-CSFV-mE2重组菌高密度发酵与mE2蛋白的纯化
•   2.4 CSFV mE2蛋白的免疫原性分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 朱培霞,陈蕾,段进坤,刘洋,莫文娟,周峻岗,余垚,吕红

关键词: 猪瘟病毒,亚型,马克斯克鲁维酵母,蛋白,重组表达

来源: 复旦学报(自然科学版) 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心,复旦大学遗传工程国家重点实验室

基金: 国家高技术研究发展计划(2014AA021301),上海市科委基地(13DZ2252000)

分类号: S852.4

DOI: 10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2019.01.006

页码: 43-51

总页数: 9

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