导读:本文包含了肝再生增强因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:因子,线粒体,顺反子,损伤,内质网,甲状旁腺,肝细胞。
肝再生增强因子论文文献综述
周光,施晓雷[1]（2019）在《肝再生增强因子调控线粒体功能稳态在棕榈酸诱导肝细胞脂毒性细胞模型中的作用》一文中研究指出目的:研究肝细胞脂毒性细胞模型中线粒体内肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)与线粒体功能障碍之间的关系。方法:以无脂肪酸的10%牛血清蛋白(bull serum albumin,BSA)处理L-O2细胞为对照(BSA组),0.2 mmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)处理L-O2细胞为脂毒性细胞模型(PA组),并在构建ALR过表达(ALR-OE组)及对照(Vector组)细胞后,分别接受BSA和PA处理,CCK-8法检测细胞活力、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)检测试剂盒检测脂毒性、JC-1染色分析线粒体膜电位、流式凋亡检测分析细胞凋亡,Western bolt检测ALR、Bax、Bcl-2、细胞色素C等蛋白表达水平。结果:与BSA组相比,PA组细胞内脂滴增多、细胞活力下降50%、LDH释放增加13倍,线粒体内ALR表达则明显降低。BSA处理下Vector组和ALR-OE组无明显差异,而PA刺激后ALR-OE组相较于Vector组,细胞活力增加约16%,LDH释放减少约40%,线粒体膜电位增加约18%,细胞色素C释放减少,细胞凋亡减少。结论:ALR参与肝细胞脂毒性的发生,靶向调控ALR可在一定程度上抑制脂毒性的发生。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年10期）
马玉珍,任宇,白红梅,王赛璐,云志中[2]（2019）在《人肝细胞再生增强因子双顺反子表达载体的构建及表达》一文中研究指出PCR扩增人肝细胞再生增强因子(Human augmenter of liver regeneration,ALR)基因,将其插入质粒pIRES2-EGFP多克隆位点中,构建成新霉素(Neo)、增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescence protein,EGFP)双标记基因且EGFP和ALR基因为双顺反子的真核表达载体pAIE.另外体外培养绵羊胎儿成纤维细胞(Sheep fetal fibroblast cells,sFFCs),脂质体lipofectAMINETM介导pAIE转染sFFCs,经过筛选后形成单克隆细胞,RT-PCR和免疫组化方法进一步检测ALR基因的表达.进一步将转基因细胞饥饿培养,体外成熟培养绵羊卵母细胞146个,进行体细胞核移植,经融合、激活后,在培养液中进行发育培养,对发育到8细胞胚胎在激光共聚焦显微镜下观察;同时利用免疫组化检测ALR基因在胚胎中的表达.结果表明:由IRES连接的EGFP和ALR基因在sFFCs内同时存在并表达;得到45个8细胞体细胞克隆胚胎,其中14个发育形成囊胚,EGFP和ALR基因在体细胞克隆胚胎中同时存在并表达.因此由IRES连接标记基因和目的基因,以标记基因指示目的基因的表达,可减少检测目的基因的繁琐手段,可得到高纯度表达ALR基因的转基因细胞和胚胎,为生产药用蛋白治疗肝脏疾病奠定实验基础.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
姜筱[3]（2019）在《肝再生增强因子对肾小管上皮细胞内质网应激的影响与机制研究》一文中研究指出第一部分过氧化氢诱导肾小管上皮细胞内质网应激模型的建立目的:过氧化氢(H_2O_2)刺激人肾小管上皮细胞(HK-2细胞系)构建内质网应激体外模型,检测肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)在内质网应激过程中的表达。方法:用不同浓度的过氧化氢(100μM,200μM或400μM)处理HK-2细胞6h、12h或24h,检测细胞活力以筛选最适处理条件。流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。Western blot检测ALR在H_2O_2处理细胞3h、6h、12h、24h和48h后的蛋白表达水平。Western blot检测内质网应激标志蛋白GRP78(glucose-regulated protein 78)在200μM H_2O_2处理细胞12h的蛋白表达水平。结果:H_2O_2对HK-2细胞存活率的抑制呈浓度依赖性。肾小管上皮细胞中ROS随着H_2O_2处理时间延长而逐渐增多。ALR的蛋白表达水平随处理时间延长逐渐升高,在12h达到最高水平,随后逐渐下降。200μM H_2O_2处理细胞12h后发现,处理组的GRP78蛋白表达水平较未处理组显着升高(P<0.05)。结论:1.成功构建过氧化氢诱导的肾小管上皮细胞内质网应激的体外模型。2.ALR参与了过氧化氢诱导的HK-2细胞内质网应激过程,其蛋白表达水平随诱导时间延长而逐渐升高,在12h达到最高水平,随后逐渐下降。第二部分过表达肝再生增强因子在肾小管上皮细胞内质网应激中的作用研究目的:建立稳定过表达ALR的肾小管上皮细胞株;研究过表达ALR对过氧化氢刺激诱导的内质网应激的影响。方法:慢病毒转染细胞构建稳定过表达ALR的肾小管上皮细胞株,将实验分为ALR过表达组(ALR-OE组)和空载病毒组(Vector组)。荧光显微镜观察HK-2细胞中GFP的表达。PCR检测ALR的mR NA表达水平。Western blot验证ALR的蛋白表达水平。激光共聚焦显微镜观察ALR的亚细胞定位。提取内质网蛋白和线粒体蛋白验证ALR的蛋白表达与分布。通过CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞ROS水平和细胞凋亡水平。透射电镜观察细胞内质网的形态变化。结果:HK-2细胞转染慢病毒4天后可见明显GFP荧光表达,ALR-OE组ALR的mR NA表达水平和蛋白表达水平均显着高于Vector组(P<0.05)。共聚焦结果显示ALR的荧光信号与内质网的荧光信号高度重迭;ALR在内质网蛋白中有表达并且ALR-OE组的ALR蛋白表达水平显着高于Vector组(P<0.05)。200μM过氧化氢刺激HK-2细胞6h、12h和24h后,ALR-OE组的细胞生存率显着高于Vector组(P<0.05)、ALR-OE组细胞ROS水平显着低于Vector组(P<0.05)、ALR-OE组细胞凋亡水平显着低于于Vector组(P<0.05)。ALR-OE组的内质网形态改变与Vector组相比改变较轻。结论:1.成功构建稳定过表达ALR的人肾小管上皮细胞株。2.ALR在HK-2细胞内质网中有表达,并能减轻过氧化氢诱导的内质网形态改变。3.过表达ALR能够抑制过氧化氢诱导的HK-2细胞凋亡。第叁部分过表达肝再生增强因子在肾小管上皮细胞内质网应激中的作用机制研究目的:探讨ALR在HK-2细胞内质网应激通路和内质网应激钙离子稳态中的作用机制。方法:将实验分为ALR过表达组(ALR-OE组)和空载病毒组(Vector组),200μM过氧化氢刺激HK-2细胞12h后,Western blot检测内质网应激相关蛋白GRP78、p-PERK、PERK、p-eIF2α、eIF2α和CHOP的蛋白表达以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白和Caspase-3的表达。运用Rhod 2-AM钙离子探针检测HK-2细胞钙离子动力学,使用荧光显微镜和多功能酶标仪动态检测钙离子荧光强度的变化。结果:200μM过氧化氢刺激HK-2细胞12h后,ALR-OE组GRP78、磷酸化PERK、磷酸化eIF2α和CHOP的蛋白表达水平相较Vector组显着降低(P<0.05)。ALR-OE组Bax蛋白表达水平显着低于Vector组(P<0.05);ALR-OE组Bcl-2蛋白表达水平显着高于Vector组(P<0.05)。ALR-OE组cleaved Caspase-3蛋白表达水平显着低于Vector组(P<0.05)。ALR-OE组钙离子荧光强度的增加量显着低于Vector组(P<0.05)。结论:1.过表达ALR可能通过抑制PERK/CHOP通路减轻HK-2细胞凋亡。2.过表达ALR可以减少钙离子由内质网向线粒体移动从而维持内质网钙离子稳态。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
洪浩[4]（2019）在《1肝再生增强因子（ALR）对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响 2甲状旁腺激素对骨折愈合有效性和安全性的荟萃分析》一文中研究指出目的探讨肝再生增强因子(Augmenter of liver regeneration,ALR)对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法用限制性内切酶Sac I单酶切重组质粒pPICZαA-rhALR使其线性化后电转入酵母菌GS115中,在含博来霉素的YPD平板上筛选出高拷贝阳性转化酵母菌落,以甲醇诱导分泌表达rhALR。经镍柱亲和层析纯化表达的上清蛋白,再用SDS-PAGE胶电泳和Western Blot鉴定。CCK-8检测获得rhALR对人肝癌细胞HepG2的促增殖活性。利用细胞贴壁分离法体外分离小鼠骨髓间充质干细胞,通过连续传代达到一步步纯化骨髓间充质干细胞的目的,在显微镜下观察细胞形态学变化,利用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞的表面抗原标志物以鉴定细胞的纯度;CCK-8法检测不同浓度ALR(1-100ug/mL)组与阴性对照组作用于小鼠骨髓间充质干细胞48h后对细胞增殖的影响;使用碱性磷酸酶检测试剂盒检测ALR组和经典成骨诱导组诱导7天后碱性磷酸酶活性变化;采用茜素红染色检测ALR组和经典成骨诱导组成骨诱导14天后钙结节形成情况,并利用实时荧光定量PCR法检测ALR组和对照组成骨诱导14天后成骨相关基因Runx2、OCN、OPN的表达情况,从基因水平探讨ALR对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。结果重组质粒经酶切和测序鉴定均与预期结果一致。rhALR被分泌表达于上清,经镍柱亲和层析、SDS-PAGE胶电泳后考马斯亮蓝染色,可见纯化产物为单一分子量约17.5 kD条带。用特异性ALR抗体检测结果显示此单一条带为ALR。CCK-8试剂测得rhALR对HepG2细胞的体外促增殖作用呈浓度依赖性增强。细胞贴壁分离法能有效分离纯化得到小鼠骨髓间充质干细胞,体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞生长状态良好,流式检测结果显示培养的细胞表面抗原标志物CD105、CD29、CD44、CD90.2的阳性率达95%以上,而阴性表面抗原标志CD34、CD45表达率低于5%,符合小鼠骨髓间充质干细胞一般生物学特性;与对照组相比,浓度为(1、10、100ug/mL)的ALR在48h时对小鼠骨髓间充质干细胞增殖有促进作用,且呈浓度依耐性(p<0.01);成骨诱导7天后,碱性磷酸酶的活性升高;成骨诱导14天后,产生的钙结节增多且成骨相关基因(Runx2、OCN、OPN)的表达量增加(p<0.01)。结论ALR可促进骨髓间充质干细胞的增殖与成骨分化。目的:本文通过纳入近年来全球范围内相关高质量的随机对照试验(RCT)做荟萃分析,旨在探讨PTH对于骨折愈合的有效性和安全性。方法:通过互联网对EMBASE、Pub Med和Cochrane Library数据库进行了系统的检索,内容为2018年4月26日之前的所有数据。我们纳入了比较PTH治疗组与对照组(安慰剂组或空白对照)对骨折愈合疗效及安全性分析的RCTs,其间我们联系某些研究的主要作者,但没能获得更多的实验数据。我们采用盲法进行数据提取、研究质量评估。本荟萃分析采用随机效应模型得到平均差、标准化平均差(95%置信区间),从而确定优势比。结果:共有8项随机对照试验符合纳入标准,其中排除了部分不符合要求的实验组,纳入患者数共524例。结局指标显示:PTH治疗组骨折愈合时间、疼痛缓解程度、功能改善情况明显优于对照组,骨折愈合率和主要不良事件(包括头晕、高钙血症、恶心、出汗和头痛)无显着差异。结论:我们认为PTH治疗在骨折愈合过程中是有效的、安全的。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
龙瑞婷[5]（2019）在《肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中肾小管上皮细胞线粒体动力学的影响及机制研究》一文中研究指出目的:我们前期研究已经证实肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)肾损伤中具有抑制肾小管上皮细胞凋亡作用,但其具体机制尚未完全阐明。本研究采用ALR-EGFP-3FLAG表达融合蛋白慢病毒载体转染人肾小管上皮细胞(HK-2)的方法,构建稳定过表达ALR的人肾小管上皮细胞株;观察体外缺氧复氧(hypoxia reoxygenation,HR)处理对HK-2细胞线粒体动力学(mitochondrial dynamics)相关蛋白表达的影响,并探讨过表达ALR对HR诱导HK-2细胞线粒体动力学的影响及作用机制。方法:将特异性过表达人23kD ALR的慢病毒Lv-ALR(ALR-EGFP-3FLAG)转染HK-2细胞,慢病毒Lv-vector转染HK-2细胞作为对照,通过观察EGFP荧光和利用抗Flag抗体通过Western Blot检测HK-2细胞中23kD ALR的蛋白表达情况对HK-2细胞进行筛选处理;采用Hank's平衡盐溶液结合缺氧复氧(HR)的方法对HK-2细胞进行处理,模拟体内IR肾损伤模型;实验分为Normal组、IR组、Lv-vector+IR组、Lv-ALR+IR组。缺氧6h复氧12h刺激后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。STRING v10预测蛋白-蛋白相互作用网络。Western Blot检测线粒体分裂关键蛋白Drp1、p-Drp1、MTFP1及相关信号通路蛋白mTOR、p-mTOR、4E-BP1、p-4E-BP1的蛋白水平。Western Blot检测线粒体融合关键蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达情况。结果:荧光显微镜观察转染细胞GFP荧光表达丰度,感染效率约80%纳入后续检测。Western Blot检测显示,与Lv-vector组比较,Lv-ALR组细胞23 kD ALR蛋白得到有效表达(P<0.05),与Lv-vector+IR组比较,Lv-ALR+IR组23 kD ALR蛋白同样有效表达(P<0.05);在H/R处理后6、12、24小时线粒体分裂关键蛋白Drp1表达逐渐上调,于H6R12达峰值,且H6R24仍处于较高水平;流式细胞仪检测显示过表达ALR可抑制H/R诱导的HK-2细胞凋亡;与Lv-vector+IR组比较,Lv-ALR+IR组中Drp1和MTFP1表达均明显下调(P<0.05),并且过表达ALR也使p-Drp1 Ser637激活;与Lv-vector+IR组比较,Lv-ALR+IR组中线粒体分裂相关信号通路蛋白p-mTOR/mTOR、p-4E-BP1/4E-BP1比值明显增高(P<0.05);线粒体融合关键蛋白OPA1表达水平上升(P<0.05),而Mfn1、Mfn2表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:过表达23kD ALR可通过抑制线粒体分裂和促进线粒体内膜融合对缺氧复氧处理肾小管上皮细胞线粒体具有保护作用,从而抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻肾IR损伤;其抑制线粒体分裂的作用途径与活化mTOR/4E-BP1信号通路有关。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
夏宁,颜如玉,廖晓辉,张玲[6]（2018）在《23 kDa亚型肝再生增强因子在肾纤维化过程中表达水平检测及意义研究》一文中研究指出目的通过构建转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)模型及单侧输尿管梗阻术(UUO)模型,观察内源性ALR表达情况。方法体外培养HK-2细胞,给予不同浓度TGF-β1处理,以蛋白质印迹法(Western blotting)检测E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应、Westernblotting、细胞免疫荧光检测ALR表达水平。构建UUO模型大鼠,以Western blotting检测不同组别ALR表达水平。结果与对照组相比,TGF-β1处理HK-2细胞E-钙黏附蛋白表达水平降低、波形蛋白表达水平增加(P<0.05),内源性23 k Da ALR m RNA及蛋白表达水平增加(P<0.05),ALR免疫荧光增强。UUO模型大鼠中,与假手术组相比,UUO术后7 d内23 kDa ALR表达水平增加(P<0.05),术后14 d 23 kDa ALR表达水平较术后7 d下降(P<0.05)。结论 TGF-β1处理HK-2细胞及UUO模型大鼠23 kDa ALR表达水平增加;ALR可能参与了线粒体的氧化应激及凋亡过程。(本文来源于《现代医药卫生》期刊2018年24期）
黄丽利,彭钧渤,龙瑞婷,姜筱,张玲[7]（2018）在《肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中线粒体生物合成的影响及机制研究》一文中研究指出目的我们前期研究发现肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration, ALR)对急性肾损伤具有保护作用,具体机制尚待进一步研究证实。本研究拟探讨ALR对体外缺血再灌注(ischemic-reperfusion, I/R)引起的急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)模型中的线粒体生物合成(mitochondrial biogenesis, MB)的干预作用及机制。(本文来源于《中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编》期刊2018-10-11）
黄丽利,龙瑞婷,姜筱,张玲,廖晓辉[8]（2018）在《肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中铁死亡的干预作用及机制研究》一文中研究指出目的近年来研究发现铁死亡是急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的重要发病机制,而我们前期研究发现肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration, ALR)对急性肾损伤具有保护作用,具体机制尚待进一步研究证实。本研究拟探讨ALR对体外缺血再灌注(ischemia-reperfusion, I/R)肾损伤模型中肾小管上细胞(HK-2)铁死亡的干预作用及机制。(本文来源于《中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编》期刊2018-10-11）
龙飞伍,李世红,刘展,李云涛,刘雁军[9]（2018）在《肝再生增强因子与大鼠肝移植急性排斥反应的相关性分析》一文中研究指出目的探讨大鼠肝移植后肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)与移植物急性排斥反应的关系。方法建立急性排斥组及免疫耐受组大鼠肝移植动物模型各12只。术后第1、3、5和7天取大鼠外周血浆及肝脏组织标本。检测外周血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天冬氨酸转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平;检测肝脏移植物组织内ALR、干扰素-γ(INF-γ)和白细胞介素-2(IL-2)的表达;分析ALR与INF-γ和IL-2表达变化关系。结果术后第1天急性排斥组INF-γ明显高于免疫耐受组,第3、5、7天两组大鼠外周血ALT、AST及TBIL均高于术后第1天,且急性排斥组INF-γ、IL-2表达及ALR的表达明显高于免疫耐受组P<0.05)。相关性分析发现肝移植急性排斥过程中ALR和INF-γ的表达呈明显的负相关(P<0.05),而与IL-2的表达无明显相关性(P>0.05)。结论 ALR与大鼠肝移植后急性免疫排斥反应呈明显的负相关,可能参与了这一过程的调控。(本文来源于《实用医院临床杂志》期刊2018年04期）
林青[10]（2018）在《缺氧时肝再生增强因子对损伤线粒体的修复及核转录因子的调控机制》一文中研究指出目的:原发性肝癌是我国发病率和死亡率较高的恶性肿瘤,严重危害人类公共健康。在诸多诱发肝癌的风险因素中,氧化应激是肝脏损伤逐渐演变为肝细胞癌发病机理中的主要因素。而肝癌以细胞的过度增殖为特点,在快速生长过程中,导致局部组织低氧或缺氧,从而使肿瘤细胞氧化还原失衡。在此应激状态下,线粒体作为氧化应激作用的重要靶细胞器,其功能可能发生改变甚至形成损伤。研究证实,机体依靠自身增长的抗氧化应答的活性因子来应对缺氧。肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)由于具有巯基氧化酶的特征,可通过调节氧化应激及凋亡基因表达发挥保护线粒体作用,而核转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)是调节氧化应激反应的重要转录因子,能够显着诱导机体的内源性抗氧化应答,两者在抵抗外来化学物所诱发的氧化损伤、维持机体细胞内正常的氧化还原平衡稳态等方面发挥重要作用。有研究提出,Nrf2信号通路可上调其下游抗氧化蛋白及解毒酶的表达,其中ALR可能受到Nrf2的调控,但两者之间有无关联目前尚无明确证据,Nrf2通过何种方式启动对ALR的调控,其机制尚不清楚。我们拟通过本研究找出两者之间的调控机制,进一步深入研究ALR对受损线粒体有无修复的作用。方法:运用pAd Easy-1和RNAi技术分别构建重组腺病毒Nrf2过表达体系与Nrf2干扰体系,采用定量逆转录-聚合酶链式反应(Quantitative reverse transcription–polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)的方法,观察在常氧状态下PLC细胞中加入过表达Nrf2腺病毒、Nrf2-siRNA后,ALR有无表达变化。运用氯化钴制造PLC肝癌细胞缺氧模型,并利用胡芦巴碱(Trigonelline,Trigl)来阻断Nrf2在缺氧状态下的转位。在缺氧状态下使用qRT-PCR、WB、免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF)来观察Nrf2的定位及Nrf2与ALR的表达变化,进而明确在缺氧状态下ALR是否受到Nrf2的调控。在PLC细胞缺氧并且Nrf2转位受到阻断的情况下,通过ATP(Adenosine Triphosphate)检测、线粒体膜电位检测、透射电镜扫描等方法观察线粒体的损伤情况。最后,应用pBudCE4.1载体来构建23KDa ALR过表达质粒。将ALR过表达质粒和对照质粒转入线粒体已受损的PLC细胞中,分别进行ATP检测、线粒体膜电位检测、透射电镜扫描、WB检测线粒体相关蛋白:细胞色素C(Cytochrome,Cyt C)、细胞凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)、Bcl-2(B-cell lymphoma-2)、Bax(BCL2-Associated X Protein),以及线粒体转录因子A(mitochondria transcription factor A,mtTFA)的mRNA和蛋白表达水平,以期比较两组线粒体的功能是否有改变,ALR过表达质粒的转入对受损线粒体有无修复的作用。结果:我们成功构建了重组腺病毒Ad-Nrf2和Nrf2-siRNA,经qRT-PCR和WB验证,Nrf2 mRNA水平和蛋白表达得到增强/抑制。然而在常氧状态下,无论Nrf2表达如何变化,ALR的mRNA水平和蛋白表达并无相应变化。我们运用氯化钴诱导PLC细胞缺氧,经过浓度筛选和低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)的有效表达,成功构建出PLC细胞缺氧模型。在此基础上,经过WB及IF的检测,可以观察到Nrf2在缺氧状态下,由细胞浆转位进入细胞核。在缺氧状态下加入胡芦巴碱后,经WB检测,可发现Nrf2蛋白在胞浆中的表达高于胞核,而IF检测观察到Nrf2仍然定位于细胞浆,说明胡芦巴碱成功阻断了Nrf2的转位。ALR蛋白表达在PLC细胞缺氧状态下表达增强;在缺氧胡芦巴碱阻断组中,ALR蛋白表达减弱,说明Nrf2转位受到阻断后,也阻断了对ALR的调控,ALR基因的表达受到抑制。通过对比PLC细胞缺氧组和缺氧/trigl组线粒体的功能指标,发现hypoxia/trigl组ATP、膜电位水平较缺氧组低,透射电镜也发现hypoxia/trigl组线粒体形态的损伤较缺氧组更为严重,说明抑制了Nrf2转位入核,细胞缺少Nrf2抗氧化应激的保护,由此线粒体受到的损伤更为严重。在验证了ALR过表达质粒(pBudCE-ALR)的有效性后,将其和空载体(con)分别转入hypoxia/trigl组中,通过检测发现,hypoxia/trigl/ALR组的ATP水平及膜电位表达较hypoxia/trigl/con组高,差异具有统计意义(P<0.001)。hypoxia/trigl/ALR组和hypoxia/trigl/con组对比,Cyt C、AIF在线粒体中的表达增多,Bcl-2蛋白的表达增强,Bax蛋白表达下降,差异均具有统计意义(P<0.001)。mtTFA mRNA和蛋白水平有增加。透射电镜显示,hypoxia/trigl/ALR组的线粒体形态较hypoxia/trigl/con组相比,线粒体固缩、嵴紊乱有一定改善。以上实验均证明了ALR对受损线粒体能起到修复的作用。结论:在缺氧等应激状态下,Nrf2转位入核后启动对ALR基因的调控,两者在肝癌细胞中共同发挥抗氧化应激的作用。缺氧状态下阻断Nrf2转位,ALR表达下降,线粒体受到的氧化打击更为严重。23KDa ALR不但能在氧化应激状态下保护线粒体,还能使已经受到损伤的线粒体得到一定程度上结构和功能的修复,为ALR参与肝癌细胞的抗氧化应激提供了新的证据。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
肝再生增强因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
PCR扩增人肝细胞再生增强因子(Human augmenter of liver regeneration,ALR)基因,将其插入质粒pIRES2-EGFP多克隆位点中,构建成新霉素(Neo)、增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescence protein,EGFP)双标记基因且EGFP和ALR基因为双顺反子的真核表达载体pAIE.另外体外培养绵羊胎儿成纤维细胞(Sheep fetal fibroblast cells,sFFCs),脂质体lipofectAMINETM介导pAIE转染sFFCs,经过筛选后形成单克隆细胞,RT-PCR和免疫组化方法进一步检测ALR基因的表达.进一步将转基因细胞饥饿培养,体外成熟培养绵羊卵母细胞146个,进行体细胞核移植,经融合、激活后,在培养液中进行发育培养,对发育到8细胞胚胎在激光共聚焦显微镜下观察;同时利用免疫组化检测ALR基因在胚胎中的表达.结果表明:由IRES连接的EGFP和ALR基因在sFFCs内同时存在并表达;得到45个8细胞体细胞克隆胚胎,其中14个发育形成囊胚,EGFP和ALR基因在体细胞克隆胚胎中同时存在并表达.因此由IRES连接标记基因和目的基因,以标记基因指示目的基因的表达,可减少检测目的基因的繁琐手段,可得到高纯度表达ALR基因的转基因细胞和胚胎,为生产药用蛋白治疗肝脏疾病奠定实验基础.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肝再生增强因子论文参考文献
[1].周光,施晓雷.肝再生增强因子调控线粒体功能稳态在棕榈酸诱导肝细胞脂毒性细胞模型中的作用[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019
[2].马玉珍,任宇,白红梅,王赛璐,云志中.人肝细胞再生增强因子双顺反子表达载体的构建及表达[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2019
[3].姜筱.肝再生增强因子对肾小管上皮细胞内质网应激的影响与机制研究[D].重庆医科大学.2019
[4].洪浩.1肝再生增强因子（ALR）对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响2甲状旁腺激素对骨折愈合有效性和安全性的荟萃分析[D].重庆医科大学.2019
[5].龙瑞婷.肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中肾小管上皮细胞线粒体动力学的影响及机制研究[D].重庆医科大学.2019
[6].夏宁,颜如玉,廖晓辉,张玲.23kDa亚型肝再生增强因子在肾纤维化过程中表达水平检测及意义研究[J].现代医药卫生.2018
[7].黄丽利,彭钧渤,龙瑞婷,姜筱,张玲.肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中线粒体生物合成的影响及机制研究[C].中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编.2018
[8].黄丽利,龙瑞婷,姜筱,张玲,廖晓辉.肝再生增强因子对缺血再灌注肾损伤中铁死亡的干预作用及机制研究[C].中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编.2018
[9].龙飞伍,李世红,刘展,李云涛,刘雁军.肝再生增强因子与大鼠肝移植急性排斥反应的相关性分析[J].实用医院临床杂志.2018
[10].林青.缺氧时肝再生增强因子对损伤线粒体的修复及核转录因子的调控机制[D].重庆医科大学.2018
论文知识图
