肠炎沙门菌sipC缺失株构建及部分生物学特性分析

论文摘要

肠炎沙门菌（Salmonella enteritidis, SE）可长期定植于家禽的肠道与生殖道组织,造成禽蛋的直接污染和垂直传播,难于清除与预防,不仅影响产蛋量,还造成环境污染,危害人类健康。Ⅲ型分泌系统（type secretion system, T3SS）的效应蛋白在肠炎沙门菌与宿主细胞表面黏附时至关重要。为研究肠炎沙门菌T3SS1主要效应蛋白SipC （type secretion system-1 effector SipC, T3SS1-SipC）在感染中的作用,本研究利用λRed同源重组系统构建肠炎沙门菌MY1的sipC基因缺失株MY1ΔsipC,同时将sipC基因克隆至载体质粒pBR322,构建回补株MY1ΔsipC/psipC。比较分析了野生株MY1、缺失株MY1ΔsipC以及回补株MY1ΔsipC/psipC在生长特性、对人（Homo sapiens）结肠细胞（human colorectaladeno carcinoma cell line,Caco-2）、鸭（Anas platyrhynchos）卵泡颗粒细胞（duck granulosa cells, dGCs）的黏附和侵袭能力,以及雏鸭半数致死量的差异。结果显示,缺失sipC基因后,肠炎沙门菌生长特性不变;感染2 h后,对Caco-2黏附和侵袭数量分别下降44.9%和34.5%;对dGCs黏附和侵袭数量分别下降37.9%和30.4%;对雏鸭的致病性显著降低（P<0.05）。本研究初步证实sipC参与肠炎沙门菌的致病力,为进一步探索sipC在肠炎沙门菌黏附宿主的分子机制提供实验材料。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株、质粒
•     1.1.2 实验动物
•     1.1.3 主要试剂和仪器
•     1.1.4 细胞
•   1.2 sipC基因缺失株和回补株的构建
•   1.3 缺失株与回补株生长曲线测定
•   1.4 野生株、缺失株与回补株对Caco-2和dGCs的黏附能力比较
•   1.5 野生株、缺失株与回补株对Caco-2和dGCs侵袭能力的比较
•   1.6 野生株、突变株与回补株对雏鸭致病性比较
•   1.7 统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 突变株MY1ΔsipC和回补株MY1ΔsipC/psipC的构建与鉴定
•   2.2 野生株、缺失株与回补株生长曲线测定
•   2.3 野生株、缺失株与回补株对Caco-2和dGCs黏附能力的比较
•   2.4 野生株、缺失株与回补株对Caco-2和dGCs侵袭能力的比较
•   2.5 缺失株对雏鸭的毒力实验
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张钰,陈阳,徐琪,朱国强,陈国宏

关键词: 肠炎沙门菌,基因,缺失株,毒力

来源: 农业生物技术学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 扬州大学动物科学与技术学院,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室

基金: 国家自然科学基金(No.31702107),江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目(No.R1806)

分类号: S852.61

页码: 330-336

总页数: 7

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