导读:本文包含了人晶状体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:晶状体,白内障,半胱氨酸,上皮细胞,甲基,损伤,衰老。
人晶状体论文文献综述
周海燕,薛雨顺,严宏,李迪,王新川[1]（2019）在《BHMT对同型半胱氨酸诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用》一文中研究指出目的:观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。方法:构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组:正常组:正常培养的HLEC;对照组:感染了空载体的HLEC-B3,BHMT过表达组(OE):感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3,均培养于10%FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性,Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78,Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。结果:BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示,正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%,过表达组与正常组有差异(P<0.05);GSH活性检测显示:相比于正常组与对照组,BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05);Western blotting结果显示:GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组,Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。结论:BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用,降低ROS水平,升高GSH活性,减轻内质网应激反应,抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2019年10期）
陈文静,刘平[2]（2019）在《高糖诱导的人晶状体上皮细胞葡萄糖关键代谢酶的表达》一文中研究指出目的:探讨葡萄糖关键代谢酶在高糖诱导的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中的表达情况。方法:将体外培养的HLEB3细胞分为正常对照组(采用DMEM培养液培养,含葡萄糖5mmol/L)、氧化应激组(采用含H_2O_2 200μmol/L的DMEM培养液培养)、高糖诱导组(采用含葡萄糖30mmol/L的培养液培养),培养24h后检测细胞凋亡情况和细胞活力及6种葡萄糖关键代谢酶(6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶、己糖激酶、柠檬酸合成酶、α-酮戊二酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶)的mRNA表达情况。结果:高糖诱导HLEB3细胞凋亡,高糖诱导组(63.43%±3.40%)细胞活力低于正常对照组(100.00%±0.00%)和氧化应激组(91.90%±5.11%),且高糖诱导组细胞6种葡萄糖代谢关键酶的mRNA表达水平均低于正常对照组和氧化应激组(均P<0.05)。结论:高糖可以诱导HLEB3细胞葡萄糖关键代谢酶的表达水平降低,诱导细胞凋亡,影响细胞活性。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2019年09期）
周海燕,薛雨顺,王新川,高宁宁[3]（2019）在《人晶状体上皮细胞BHMT基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)基因过表达慢病毒载体,并检测其在人晶状体上皮细胞中的表达效果。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增制备目的基因片段,构建BHMT慢病毒过表达载体,转染至293T细胞。运用免疫荧光法行病毒滴度检测,并利用荧光显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白的表达,运用RT-PCR、Western blot检测鉴定BHMT mRNA蛋白的表达水平。将构建成功的慢病毒载体BHMT-GV358感染人晶状体上皮细胞,观察目的基因表达。结果:重组慢病毒转染293T细胞后可观察到荧光,在稳定转染的细胞中BHMT及蛋白的表达水平较未转染细胞显着增高(P<0.05),体外转染人晶状体上皮细胞,荧光显微镜下可见BHMT表达。结论:成功构建过表达BHMT的慢病毒载体,并有效感染人晶状体上皮细胞,为进一步研究BHMT在白内障发生发展中的作用提供生物学基础。(本文来源于《陕西医学杂志》期刊2019年08期）
闫露露,张天晓,冷云吉,罗阳,张劲松[4]（2019）在《错配修复基因MSH3在人晶状体中的表达》一文中研究指出目的研究错配修复基因MSH3在人晶状体上皮细胞系SRA01/04、年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)患者晶状体组织以及24周人胎眼晶状体组织中的表达情况,探讨其与ARC形成的关系。方法采用RT-PCR检测人晶状体上皮细胞系SRA01/04、ARC患者晶状体组织和健康人脐带(阳性对照)中MSH3基因的表达水平,免疫荧光检测24周人胎眼晶状体中MSH3蛋白的表达。结果 MSH3在晶状体上皮细胞系SRA01/04中高表达,在ARC患者晶状体组织中表达下调。MSH3在24周人胎眼晶状体纤维细胞、晶状体上皮细胞以及晶状体前囊组织中均有表达,且在晶状体上皮细胞中高表达。结论 MSH3在人胎眼晶状体组织和SRA01/04中高表达,而在ARC患者晶状体组织中表达下调,这种表达差异可能会影响DNA的错配修复过程,进而影响晶状体发育导致ARC的发生。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年06期）
胡超[5]（2019）在《lnc-PCK1-2:1在人晶状体上皮细胞上皮—间质转分化过程中的验证及功能研究》一文中研究指出目的:研究lnc-PCK1-2:1在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达并初步探讨其分子功能。方法:本课题组前期通过应用10ng/ml的TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化,然后应用基因芯片技术筛选出差异表达的lncRNAs,并筛选出上调的前10位lncRNAs。本实验选择其中一种lncRNAs—lnc-PCK1-2:1进行验证和功能研究。利用qRT-PCR验证lnc-PCK1-2:1在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达。应用10ng/ml TGF-β2的DMEM培养基,再转染siRNA-lnc-PCK1-2:1质粒,此为siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组。加入10ng/ml TGF-β2的DMEM培养基,再转染siRNA-NC质粒,此为siRNA-NC+TGF-β2组。只加入DMEM培养基,再转染siRNA-lnc-PCK1-2:1质粒,此为siRNA-lnc-PCK1-2:1组。只加入DMEM培养基,再转染siRNA-NC质粒,此为siRNA-NC组。应用细胞免疫荧光和Western blot方法观察各组细胞中EMT相关分子平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、钙黏附蛋白E(E-Cadherin)在蛋白水平的表达;应用qRT-PCR检测各组细胞中mRNA的表达变化。结果:证实lnc-PCK1-2:1在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中表达。在siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组、siRNA-NC+TGF-β2组中细胞胞浆中a-SMA荧光强度逐渐增强,蛋白表达逐渐增加;E-Cadherin荧光强度逐渐减弱,蛋白表达逐渐减少;在siRNA-lnc-PCK1-2:1组、siRNA-NC组中细胞胞浆中a-SMA荧光强度逐渐增强,蛋白表达逐渐增加;E-Cadherin荧光强度逐渐减弱,蛋白表达逐渐减少;a-SMA的荧光强度、蛋白表达量siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组大于siRNA-lnc-PCK1-2:1组,siRNA-NC+TGF-β2组大于siRNA-NC组,siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组的E-Cadherin荧光强度、蛋白表达量小于siRNA-lnc-PCK1-2:1组,siRNA-NC+TGF-β2组小于siRNA-NC组;lnc-PCK1-2:1的表达量siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组大于siRNA-NC+TGF-β2组,siRNA-lnc-PCK1-2:1组大于siRNA-NC组,siRNA-lnc-PCK1-2:1+TGF-β2组大于siRNA-lnc-PCK1-2:1组,siRNA-NC+TGF-β2组大于siRNA-NC组。结论:人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化过程中lnc-PCK1-2:1高表达并且沉默lnc-PCK1-2:1的表达可抑制晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化。(本文来源于《桂林医学院》期刊2019-06-01）
AINT,THU,THU,WIN[6]（2019）在《人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30的改变在高钙及急性氧化应激状态的反应》一文中研究指出目的:探讨人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的改变在高钙及急性氧化应激状态下的反应,为进一步研究年龄相关性白内障发病机制提供理论依据,并且在预防白内障的发生发展中提供重要的依据。方法:1.建立SMP30过表达和沉默稳定株:将人晶状体上皮细胞株SRA01/04细胞按5x104/孔接种于6孔板细胞培养板中,待细胞生长到20%时根据MOI=5使用过表达慢病毒(LV-RGN,19544-1)及沉默慢病毒(LV-RGN_RNAi,50743-1)以及相应的空载对照组慢病毒感染细胞,按常规培养方式培养24小时后将培养液更换成正常培养液。培养72小时后在荧光显微镜下观察转染效率。细胞生长到90%时加入2μg/ml嘌呤霉素,筛选出成功转染细胞。将所得转染细胞提取所需RNA及蛋白进行实时定量聚合酶链反应及蛋白质印迹检测细胞株转染效率,确认模型构建成功。2.观察高钙培养状态下SMP30基因及蛋白的变化:将转染细胞培养至80%时加入15mmol/L Ca Cl2作用24小时,再提取所需RNA及蛋白检测SMP30基因及蛋白的表达量。3.观察急性氧化应激培养状态下SMP30基因和蛋白的变化:将转染细胞培养至80%加入300μmol/L H2O2作用2小时后提取RNA及蛋白检测此状态下的SMP30基因和蛋白的表达量。结果:1.衰老标记蛋白30过表达(Over-expression,OE)及沉默(Knock-down,KD)稳定株的转染效率:RT-PCR结果显示OE组(2.8330±0.201)与NC-OE(Over-expression negative control group,过表达空载组)组(0.987±0.888)相比表达丰度为2.83倍(t=-20.309,p=0.003<0.05);KD组(0.090±0.040)与NC-KD(Knock-down negative control group,沉默空载组)组(1.009±0.006)相比敲减率为91%(t=-0.047,p=0.000<0.05)。WB结果显示:OE组(0.923±0.013)的SMP30蛋白表达量较NC-OE组(0.599±0.013)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.610±0.002)较NC-KD组(0.742±0.013)下调(p=0.000<0.05)。2.高钙培养状态下SMP30蛋白及RGN m RNA基因表达量:RT-PCR结果显示OE组(5.234±0.512)RGN m RNA基因表达量较NC-OE组(1.007±0.149)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.510±0.023)表达量较NC-KD(1.006±0.137)组下调(p=0.022<0.05);WB结果显示OE组(0.5668±0.0113)的SMP30蛋白表达量相比NC-OE组(1.107±0.006)下调(p=0.000<0.05),KD组(1.266±0.034)表达量较NC-KD组(1.099±0.026)上调(p=0.003<0.05)。与正常状态下的OE组及KD组相比,RGN m RNA基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.002<0.05,pKD=0.000<0.05),而SMP30蛋白表达量在OE组中下调(p=0.000<0.05),KD组中上调(p=0.000<0.05)。3.急性氧化应激状态下各组基因与蛋白的表达量:RT-PCR结果显示OE组(4.332±0.264)RGN m RGN基因表达量较NC-OE组(1.001±0.050)上调(p=0.002<0.05),KD组(0.377±0.029)表达量较NC-KD组(1.004±0.112)下调(p=0.001<0.05);WB结果显示OE组(1.103±0.002)的SMP30蛋白表达量较NCOE组(0.876±0.010)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.611±0.024)的表达量与NC-KD组(0.591±0.034)相比无统计学意义(p=0.46>0.05)。与正常状态相比OE组及KD组RGN m RGN基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.001<0.05,pKD=0.001<0.05),SMP30蛋白表达量在OE组中上调(p=0.000<0.05),KD组表达量无统计学意义(p=0.967>0.05)。结论:构建过表达SMP30及沉默SMP30模型成功,可用于后续研究。在急性氧化应激状态下,与正常状态相比,SMP30过表达组SMP30表达量增加更为明显,提示在急性氧化应激时SMP30出现反应性增加,可能参与HLECs氧化应激的过程。在高钙状态下,SMP30表达量出现反应性改变,提示SMP30与细胞内钙稳态密切相关,发挥其钙调节作用。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
胡昕滢,栾洁[7]（2019）在《色素上皮衍生因子在人晶状体上皮细胞中的表达》一文中研究指出目的:探究人晶状体上皮细胞(LEC)内色素上皮衍生因子(PEDF)的表达与糖尿病视网膜病变的关系。方法:收集白内障患者术中所取晶状体前囊膜,将其分为非糖尿病(NDM)组、无糖尿病视网膜病变(NDR)组、非增殖型糖尿病视网膜病变(NPDR)组和增殖型糖尿病视网膜病变(PDR)组。免疫组织荧光法及蛋白质免疫印迹技术分别用于检测PEDF蛋白在LEC中的分布和表达。结果:PEDF蛋白主要分布于LEC胞浆中。随着糖尿病视网膜病变的出现和病情进展,LEC中PEDF蛋白的表达水平显着增加(P <0. 01)。结论:PEDF的表达水平与糖尿病视网膜病变的发生和发展呈正相关,表明人晶状体本身有助于调节虹膜新生血管。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
李海燕,郭琳,张倩,唐莉,马波[8]（2019）在《miR-29a抑制H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤》一文中研究指出目的探究miR-29a在H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤中的作用和机制。方法使用不同浓度(0μmol·L~(-1)、100μmol·L~(-1)、200μmol·L~(-1)、300μmol·L~(-1)、400μmol·L~(-1))的H_2O_2处理人晶状体上皮细胞HLE-B3,以确定后续实验中H_2O_2使用的浓度。将HLE-B3细胞随机分成4组:对照组、H_2O_2组、H_2O_2+模拟物对照组和H_2O_2+miR-29a模拟物组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,Real-time PCR检测miR-29a和Bcl2修饰因子(Bcl2 modifying factor,BMF)、Bcl2拮抗/杀伤因子1(Bcl2-antagonist/killer 1,BAK1) mRNA表达,Western blotting检测BMF和BAK1蛋白表达。结果 HLE-B3细胞活力随着H_2O_2浓度的增加而降低,呈现剂量依赖性,后续实验H_2O_2浓度选择200μmol·L~(-1)。与对照组相比,H_2O_2组中miR-29a的表达(0.56±0.12)下调,细胞活力[(59.67±10.09)%]和SOD含量[(52.97±6.64)U·mL~(-1)]降低,细胞凋亡率[(40.30±4.76)%]和ROS水平[(299.52±43.95)%]增加,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均上调,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与H_2O_2组相比,H_2O_2+miR-29a模拟物组中miR-29a的表达(4.49±0.55)上调,细胞活力[(92.83±8.09)%]和SOD含量[(84.03±6.31)U·mL~(-1)]增加,细胞凋亡率[(18.74±2.48)%]和ROS水平[(143.13±21.32)%]降低,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均下调,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与H_2O_2组相比,H_2O_2+模拟物对照组上述指标变化均不大,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论上调miR-29a可促进H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞的细胞增殖、抑制细胞凋亡、减少氧化损伤,这些作用可能与BMF和BAK1的表达下调相关。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年03期）
韩子豪,李松蔓,李艳玮,陈曦,张鸿侃[9]（2019）在《急性氧化应激初期人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30抗氧化作用的研究》一文中研究指出目的初步探讨衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用。方法将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L~(-1)、200μmol·L~(-1)、250μmol·L~(-1)、300μmol·L~(-1)、350μmol·L~(-1)、400μmol·L~(-1)、450μmol·L~(-1)H2O2的培养基作用2 h,CCK-8法选取最佳H2O2浓度;使用慢病毒对SRA01/04进行转染建立SMP30高表达模型,实验分3组:SMP30过表达(overexpression,OE)组、SMP30过表达相应空载(negative control over expression,NCOE)组及对照(control,CON)组。通过超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)定量检测试剂盒、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/总谷胱甘肽(total glutathi-one,T-GSH)测定试剂盒测量细胞内SOD活力及GSSG/T-GSH比值的变化。结果经分析,建立模型的最佳H2O2浓度为300μmol·L~(-1)。在此浓度下,与CON组(5. 783±0. 192) U·mg~(-1)及NCOE组(5. 837±0. 182) U·mg~(-1)相比,OE组细胞内SOD活力升高,为(10. 251±0. 110) U·mg~(-1);与CON组(29. 943±0. 241)及NCOE组(30. 037±0. 433)相比,OE组细胞内GSSG/T-GSH比值(20. 990±0. 342)降低;差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。结论当SRA01/04处于H2O2诱导的急性氧化应激初期时,SMP30表达的增加可通过增加SOD活力和降低GSSG/T-GSH比值,加强SRA01/04的抗氧化能力。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年02期）
张芝琳[10]（2019）在《长链非编码RNA HOTAIR调节人晶状体上皮细胞增殖、迁移、上皮间质转分化中的作用》一文中研究指出目的:1.构建转化生长因子-β2(transforming growth factor,TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)发生上皮间质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的细胞模型,检测细胞中长链非编码RNA HOTAIR(lnc RNA HOTAIR)的表达。2.探讨HOTAIR在TGF-β2诱导的HLECs增殖、迁移、EMT过程中的作用。3.检测TGF-β/Smad通路主要信号分子在TGF-β诱导人晶状体上皮细胞EMT过程中的表达变化及HOTAIR是否通过TGF-β/Smad通路在晶状体上皮细胞EMT过程中发挥作用。方法:1.构建TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞EMT的细胞模型,检测SRA01/04细胞中HOTAIR的表达。常规体外培养人晶状体上皮细胞株SRA01/04,用10 ng/ml TGF-β2处理细胞24小时后,用倒置显微镜观察细胞形态变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫印迹(western blot)检测HLECs中EMT相关标记物基因及蛋白的表达,如上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)及间质细胞标志物波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)。应用qRT-PCR检测TGF-β2(10 ng/m L)不同作用时间(0小时,12小时,24小时,48小时,72小时)对晶状体上皮细胞HOTAIR的表达影响。2.下调HOTAIR的表达,探讨HOTAIR在HLECs增殖、迁移中的作用。应用RNA小干扰技术,在SRA01/04细胞中转染si HOTAIR-1、si HOTAIR-2和si HOTAIR-3及对照组si NC,并检测转染效率,细胞活力和增殖能力分别通过CCK-8和EDU实验检测,Transwell迁移试验用于细胞迁移能力的检测。3.观察HOTAIR在TGF-β2诱导的HLECs增殖、迁移、EMT过程中的作用,检测EMT相关转录因子的表达变化。细胞分为四组:si NC组:细胞中转染si NC,常规培养HLECs(SRA01/04)24小时;si HOTAIR:细胞中转染si HOTAIR,常规培养HLECs(SRA01/04)24小时;si NC+TGF-β2组:细胞中转染si NC,培养基加入10ng/ml TGF-β2,培养24小时;si-HOTAIR+TGF-β2组:细胞转染si HOTAIR,培养基培养加入10ng/ml TGF-β2,培养24小时。应用倒置显微镜检测观察细胞形态,免疫荧光、western blot检测EMT相关蛋白(E-cadherin、ZO-1、vimentin、α-SMA)的表达,western blot检测转录因子ZEB1、Snail、Slug的表达,细胞活力和增殖能力分别通过CCK-8和EDU实验检测,Transwell迁移及划痕试验同时用于细胞迁移能力的检测。4.TGF-β/Smad通路主要信号分子在TGF-β2作用下HLECs中的表达。下调SRA01/04细胞HOTAIR的表达,检测TGF-β/Smad通路蛋白的表达变化。10 ng/ml TGF-β2作用细胞后,western blot检测TGF-β2作用下HLECs中磷酸化Smad2,Smad3及总的Smad2,Smad3表达水平的变化,SRA01/04细胞转染si HOAIR或si NC,10 ng/ml TGF-β2作用细胞后,western blot检测HLECs中p-Smad2,Smad3及总的Smad2,Smad3表达水平的变化。结果:1.成功构建TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞EMT的细胞模型,细胞中HOTAIR的表达增加。倒置显微镜观察发现与对照组相比(未被TGF-β2处理),TGF-β2处理的实验组细胞发生EMT转变,细胞由原来的椭圆形变为长梭状。qRT-PCR、Western blot检测TGF-β2诱导SRA01/04细胞上皮间质转分化,结果发现:与未经TGF-β2处理的对照组相比,实验组的SRA01/04细胞上皮细胞标志物E-cadherin、ZO-1表达降低,间质细胞标志物vimentin、α-SMA表达增加,差异有显着统计学意义(P<0.01)。qRT-PCR技术检测TGF-β2作用不同时间晶状体上皮细胞HOTAIR的表达,结果发现TGF-β2作用12h,HOTAIR表达开始增加,48h达到最高值,差异有显着统计学意义(P<0.01)。2.成功筛选沉默HOTAIR的si HOTAIR,沉默晶状体上皮细胞HOTAIR的表达可以抑制HLECs存活、增殖及迁移。qRT-PCR技术筛选结果显示:与对照组相比,si HOTAIR-2和si HOTAIR-3可有效沉默HOTAIR的表达(*P<0.05,**P<0.01),差异具有统计学意义。最终选择si HOTAIR-3行进一步实验。SRA01/04细胞转染si HOTAIR,CCK-8、EDU、Transwell迁移实验检测结果显示:与对照组相比,下调SRA01/04细胞HOTAIR的表达,细胞存活能力、增殖能力及迁移能力明显下降(P<0.01),差异具有统计学意义。3.沉默HOTAIR的表达,抑制TGF-β2诱导的HLECs增殖、迁移、EMT过程,同时减少TGF-β2诱导的EMT相关转录因子的上调。倒置显微镜观察发现:与对照组相比(未被TGF-β2处理),TGF-β2处理的实验组细胞由原来的椭圆形变为长梭状,沉默HOTAIR以后,可以逆转细胞形态的变化。细胞免疫荧光法及western blot检测发现:经TGF-β2处理24h后,si NC+TGF-β2组细胞较si NC组组相比,E-cadherin、ZO-1表达降低,Vimentin及α-SMA表达增加(P<0.01);经si HOTAIR-3沉默后,si HOTAIR+TGF-β2组较si NC+TGF-β2组相比细胞E-cadherin、ZO-1表达增加,Vimentin及α-SMA表达降低(P<0.01),差异具有统计学意义。western blot检测发现:si HOTAIR组较si NC组细胞Snail,Slug and ZEB1的表达明显下降(P<0.01),差异具有统计学意义;si NC+TGF-β2组较si NC组细胞Snail,Slug and ZEB1的表达明显表达明显增加(P<0.01),差异具有统计学意义;si HOTAIR+TGF-β2组较si NC+TGF-β2组细胞Snail,slug and ZEB1的表达明显下降(P<0.01),差异具有统计学意义。CCK-8、EDU、划痕实验及Transwell迁移实验结果发现:si HOTAIR组较si NC组细胞存活能力、增殖能力、迁移能力降低(P<0.05);si NC+TGF-β2组较si NC组细胞存活能力、增殖能力、迁移能力降低明显增加(P<0.01);si HOTAIR+TGF-β2组较si NC+TGF-β2组细胞存活能力、增殖能力、迁移能力降低明显下降(P<0.01),差异具有统计学意义。4.TGF-β/Smad通路主要信号分子参与TGF-β2诱导晶状体上皮细胞EMT过程,HOTAIR通过TGF-β/Smad通路在晶状体上皮细胞EMT过程中起作用。Western blot免疫印迹结果显示,与对照组相比,TGF-β2处理组SRA01/04细胞中磷酸化的Smad2、Smad3表达水平增加,P<0.01,差异具有统计学意义。si HOTAIR组较si NC组SRA01/04细胞中p Smad2、p Smad3表达水平降低,经TGF-β2处理的si NC+TGF-β2组较si NC组SRA01/04细胞中p Smad2、p Smad3表达水平增加,经si HOTAIR-3沉默后,si HOTAIR+TGF-β2组较si NC+TGF-β2组p Smad2、p Smad3表达水平降低。结论:1.10ng/ml TGF-β2成功诱导人晶状体上皮细胞EMT细胞模型,细胞HOTAIR表达上调。2.沉默HOTAIR的表达抑制HLECs存活、增殖及迁移。3.HOTAIR参与TGF-β2诱导的HLECs存活、增殖、迁移及EMT过程,提示HOTAIR可能在后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)病理机制中扮演重要角色,但本研究缺乏体内研究,未来尚需进一步完善。4.HOTAIR通过TGF-β/Smad通路促进HLECs存活、增殖、迁移及EMT过程。(本文来源于《西南医科大学》期刊2019-02-01）
人晶状体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨葡萄糖关键代谢酶在高糖诱导的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中的表达情况。方法:将体外培养的HLEB3细胞分为正常对照组(采用DMEM培养液培养,含葡萄糖5mmol/L)、氧化应激组(采用含H_2O_2 200μmol/L的DMEM培养液培养)、高糖诱导组(采用含葡萄糖30mmol/L的培养液培养),培养24h后检测细胞凋亡情况和细胞活力及6种葡萄糖关键代谢酶(6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶、己糖激酶、柠檬酸合成酶、α-酮戊二酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶)的mRNA表达情况。结果:高糖诱导HLEB3细胞凋亡,高糖诱导组(63.43%±3.40%)细胞活力低于正常对照组(100.00%±0.00%)和氧化应激组(91.90%±5.11%),且高糖诱导组细胞6种葡萄糖代谢关键酶的mRNA表达水平均低于正常对照组和氧化应激组(均P<0.05)。结论:高糖可以诱导HLEB3细胞葡萄糖关键代谢酶的表达水平降低,诱导细胞凋亡,影响细胞活性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人晶状体论文参考文献
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[2].陈文静,刘平.高糖诱导的人晶状体上皮细胞葡萄糖关键代谢酶的表达[J].国际眼科杂志.2019
[3].周海燕,薛雨顺,王新川,高宁宁.人晶状体上皮细胞BHMT基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定[J].陕西医学杂志.2019
[4].闫露露,张天晓,冷云吉,罗阳,张劲松.错配修复基因MSH3在人晶状体中的表达[J].眼科新进展.2019
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[10].张芝琳.长链非编码RNAHOTAIR调节人晶状体上皮细胞增殖、迁移、上皮间质转分化中的作用[D].西南医科大学.2019
论文知识图
