导读:本文包含了短干扰论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干扰,基因,阿尔,细胞系,分子,基因治疗,转录。
短干扰论文文献综述
董炜疆,冯改丰,宫惠琳,刘苏虎,胡海涛[1]（2006）在《短干扰RNA对人β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达的影响(英文)》一文中研究指出目的探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNAs,siRNA)对BACE在神经母细胞瘤细胞中的表达的影响,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/ECFP-U6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果限制性内切酶酶切和测序结果均表明成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE;并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,该研究将为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供重要的实验基础。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2006年06期）
胡海涛,董炜疆,冯改丰,刘朝晖,刘苏虎[2]（2006）在《短干扰RNA特异性抑制哺乳动物β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达》一文中研究指出目的:探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(-βsite APP cleav ing enzym e,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNA s,siRNA)是否能抑制BACE在哺乳动物细胞中的表达,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法:采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U 6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果:成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论:成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供了重要的实验基础。(本文来源于《浙江大学学报(医学版)》期刊2006年06期）
熊华,于世英,张孟贤[3]（2006）在《短干扰RNA抑制人宫颈癌HeLa细胞Ku80基因表达》一文中研究指出目的针对内源性Ku80基因序列体外构建短干扰RNA(siRNA)线性DNA转录载体,观察其在细胞内产生的siRNA对该基因表达的影响。方法构建的线性DNA转录载体经脂质体导入宫颈癌HeLa细胞内,转录产生21 bp的短双链siRNA,并用免疫印迹法分析Ku80基因在蛋白水平表达的情况。结果体外成功构建出siRNA线性DNA转录载体LS1/LAS1和LS2/LAS2;载体分别导入HeLa细胞内生成相应siRNA;与空白对照组比较,实验组均能特异性抑制Ku80基因的表达;其抑制效果和时间点与所选基因靶位相关。结论由线性DNA载体转录生成的siRNA在细胞内特异性抑制内源性基因表达,为Ku80用于肿瘤靶向基因治疗提供了一个新的实验依据。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2006年03期）
侯开波,姚元庆,雷迎峰,朱晓明,陈建辉[4]（2006）在《HLA-G短干扰RNA真核表达载体的构建及其在JEG-3细胞株中抑制HLA-G表达的研究》一文中研究指出目的:构建HLA-G短干扰RNA表达质粒及探讨HLA-G的功能。方法:根据siRNA设计的原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒的特点,针对HLA-G基因设计并合成两对寡聚DNA片段,退火后将其克隆入pSilencer2.1-U6-neo,将重组真核表达质粒pSi-lencer2.1-U6-neo-HLA-G采用脂质体法转染JEG-3绒癌细胞株。应用RT-PCR、W estern-blot等方法检测转染的JEG-3细胞中HLA-G基因的表达水平;MTT法检测转染后JEG-3细胞增殖的变化。结果:RT-PCR和W estern-blot结果均表明瞬时转染重组pSilencer2.1-U6-neo-HLA-G质粒明显抑制了JEG-3细胞中HLA-G基因的表达。实验组JEG-3细胞生长较对照组明显受到抑制。结论:pSilencer2.1-U6-neo-HLA-G质粒构建成功,可下调JEG-3细胞中HLG的表达,抑制绒癌细胞生长。(本文来源于《现代妇产科进展》期刊2006年06期）
季丙元,李秋艳,胡成进,李云龙[5]（2006）在《短干扰RNA技术及其在动物体内基因功能研究的应用进展》一文中研究指出本文对哺乳动物中RNA干扰(RNAi)现象,短干扰RNA(siRNA)设计原则、经验及其体内、体外合成方法,siRNA导入真核生物体内的4条途径、剂量及干扰效果以及siRNA在体内研究的优势及其局限性等作一综述。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2006年02期）
陈景龙[6]（2005）在《短干扰RNA的应用和设计》一文中研究指出RNA干扰 (RNA interfering,RNAi)是由 Fire等人在1998年从线虫的研究中发现 RNA沉默 (RNA silencing)而提出的 [1 ]。RNA沉默是指一种普遍存在于植物、真菌及部分动物中的具序列特异性的基因沉默(gene(本文来源于《福建医科大学学报》期刊2005年01期）
陈华顺,潘泽政[7]（2005）在《短干扰RNA靶向制备的原则和方法》一文中研究指出RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是一种基因表达 抑制过程[1]。是一种序列特异性的由双链RNA所诱导的 基因沉默现象,即将特异性基因的双链RNA导入细胞或有 机体,从而抑制该内源性同源基因的表达[2]。RNAi的表现 形式是多种(本文来源于《实用临床医学》期刊2005年03期）
刘铁刚[8]（2004）在《短干扰RNA的抗肿瘤作用与机制研究》一文中研究指出肿瘤相关基因的异常表达是肿瘤发生的一个重要原因，因此抑制肿瘤相关基因的异常表达一直是研究与开发新型抗肿瘤药物的一个重要思路。1998年发现的RNA干扰现象已成为继传统反义技术后发展起来的一种高效特异的抑制靶基因表达的新技术。它主要是通过外源导入细胞的21.25核苷酸的短干扰核糖核酸(siRNA)特异性地识别并结合与其高度同源的靶基因mRNA序列并形成复合体，通过内源性核酸酶的作用从复合体的中部将mRNA切割，介导mRNA的降解，从而抑制靶基因的表达。因此，本研究选择了一些与肿瘤发生关系密切的靶基因，针对它们设计并合成了一些siRNA，以便能从中筛选出高效的新型抗肿瘤药物并对其作用机制进行初步研究。 肿瘤的发生受多个基因的调控，我们针对bcl2，cdk2，hras，pkc-α，mdm2，vegf六种肿瘤相关基因的mRNA序列设计并合成了相应的siRNA。将siRNA用脂质体转染至不同肿瘤细胞后，用MTT法检测siRNA的细胞毒作用。结果显示，不同siRNA对MCF-7细胞的生长抑制作用不同，bcl2-siRNA、mdm2-siRNA、cdk2-siRNA、pkcα-siRNA、hras-siRNA和vegf-siRNA的IC_(50)分别为196．7，137．7，191.5，260.1，187.0，2416.7nM。Mdm2-siRNA对人乳腺癌MCF-7，人肝癌BEL-7402，人结肠癌HT-29和人口腔上皮癌KB等4种肿瘤细胞的IC_(50)分别为137.7，240.3，1404.5，332.3nM。结果显示mdm2-siRNA对p53野生型的MCF-7细胞作用最强，对p53突变型的HT-29细胞作用最弱，两者相差10倍，提示mdm2-siRNA的抗肿瘤作用依赖于p53途径。因此，我们对mdm2-siRNA的抗肿瘤作用作进一步研究。 采用RT-PCR法对mdm2-siRNA的基因沉默作用进行mRNA水平的检测。结果显示，MCF-7细胞经100nM siRNA处理24h后，靶基因的mRNA水平明显降低，而非靶基因的mock-siRNA对靶基因的rnRNA水平没有影响，表明mdm2-siRNA能够高效特异地介导靶mRNA的降解作用。 采用H&E染色法检测mdm2-siRNA对人乳腺癌MCF-7细胞形态的影响，MCF-7细胞经300nM siRNA处理36h后，细胞出现明显的染色质凝集现象，(本文来源于《中国协和医科大学》期刊2004-05-01）
短干扰论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(-βsite APP cleav ing enzym e,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNA s,siRNA)是否能抑制BACE在哺乳动物细胞中的表达,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法:采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U 6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果:成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论:成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供了重要的实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
短干扰论文参考文献
[1].董炜疆,冯改丰,宫惠琳,刘苏虎,胡海涛.短干扰RNA对人β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达的影响(英文)[J].四川大学学报(医学版).2006
[2].胡海涛,董炜疆,冯改丰,刘朝晖,刘苏虎.短干扰RNA特异性抑制哺乳动物β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达[J].浙江大学学报(医学版).2006
[3].熊华,于世英,张孟贤.短干扰RNA抑制人宫颈癌HeLa细胞Ku80基因表达[J].华中科技大学学报(医学版).2006
[4].侯开波,姚元庆,雷迎峰,朱晓明,陈建辉.HLA-G短干扰RNA真核表达载体的构建及其在JEG-3细胞株中抑制HLA-G表达的研究[J].现代妇产科进展.2006
[5].季丙元,李秋艳,胡成进,李云龙.短干扰RNA技术及其在动物体内基因功能研究的应用进展[J].国际检验医学杂志.2006
[6].陈景龙.短干扰RNA的应用和设计[J].福建医科大学学报.2005
[7].陈华顺,潘泽政.短干扰RNA靶向制备的原则和方法[J].实用临床医学.2005
[8].刘铁刚.短干扰RNA的抗肿瘤作用与机制研究[D].中国协和医科大学.2004
论文知识图
