（武警四川省消防总队医院四川成都610000）
【摘要】目的：探讨不同梅毒抗体检测方法的特异性、灵敏性，为临床医师合理选择梅毒血清抗体检测方法提供参考依据。方法:主要是使用梅毒苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)、梅毒螺旋体特异性抗原血清实验(RPR)、梅毒螺旋体血凝实验(TPHA)、梅毒酶联免疫吸附测定(TP-ELISA)以及梅毒螺旋体明胶凝集实验(TPPA)这五种检测方法来检测免疫标本且是阳性的280例，通过对五种检测方法的比较来分析存在的阳性率、灵敏性以及特异性。结果：结果表明ELISA组中是属于阳性的比率最高达到了99.29%，比TPPA检测略低之外，都优于其他三种检测方法(均P<0.05)，但是出现的假阳性率存在较高，达到了10.72%，而应用TPPA进行检测的假阳性率是最低的为0.00%，明显优于其他四种检测方法(均P<0.05);TRUST的检测结果显示其灵敏度(85.62%)以及特异性(88.64%)都是属于最低的，这组检测结果明显低于其他四种检测方法(均P<0.05)。结论：五种方法比较后得知，ELISA是作为检测梅毒中最为理想的检测方法，RPR是适用于检测梅毒非特异性抗体，TPPA是适用于筛查后的阳性标本梅毒抗体的确证试验，那么TRUST及TPHA的检测方法则是不适合用于梅毒螺旋抗体检测试验。
【关键词】梅毒螺旋体抗体；血清学检验；TPPA；ELISA；RPR
【中图分类号】R446.6;R759.1【文献标识码】A【文章编号】1004-6194（2015）02-0239-02
Comparisonofdetectionmethodsofsyphilisantibodies
【Abstract】Objective:Toinvestigatethespecificity,sensitivityofdetectionmethodsofsyphilisantibody,provideareferencebasisforreasonableselectionofsyphilisserumantibodycliniciansdetectionmethod.Method:mainlyusesyphilistoluidineredunheatedserumreagintest(TRUST),Treponemapallidumspecificantigenserumtest(RPR),Treponemapallidumhemagglutinationassay(TPHA),syphilisenzyme-linkedimmunosorbentassay(TP-ELISA)andTreponemapallidumgelatinagglutinationtest(TPPA)ofthefivekindsofdetectionmethodstodetecttheimmunespecimensand280positivecases,throughthecomparisonofthefivekindsofdetectionmethodstoanalyzethepositiverate,sensitivityandspecificityofexistence.Results:theresultsshowedthatintheELISAgroupbelongstothepositiveratioreachesto99.29%,slightlylowerthantheTPPAdetection,arebetterthantheotherthreemethodsforthedetectionof(allP<0.05),butthereexistshighfalsepositiverate,falsepositiveratereached10.72%,andtheapplicationofTPPAdetectionisthelowestfor0%,significantlybetterthantheotherfourmethodsforthedetectionof(allP<0.05);resultsofTRUSTdetectionshowedthesensitivity(85.62%)andspecificity(88.64%)belongedtothelowest,thisgroupoftestresultsshowsthatthecurrentislowerthantheotherfourmethodsforthedetectionof(P<0.05).Conclusion:thecomparisonoffivemethodsforthat,ELISAisusedasadetectionofsyphilisinthemostidealdetectionmethod,RPRissuitablefordetectingsyphilisnon-specificantibody,TPPAisaconfirmatorytestspecimenspositivesyphilisantibodyissuitableforscreeningafter,sothedetectionmethodofTRUSTandTPHAarenotsuitableforsyphilisantibodytest.
【Keywords】Treponemapallidumantibody;Serologicaltest;TPPA;ELISA;RPR
梅毒螺旋体（Treponemapallidum，TP）是属于比较小而且又纤细的螺旋状微生物体，其长度大约是5~20nm，平均长度在8~10nm，直径长度是小于0.2nm，包括有6至12个螺旋[1]。梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性传染性很强的疾病（STD），对人体有着十分大的危害性[2]。最近几年以来，随着人们对性的慢慢开放，梅毒感染几率在续年的上升，出现感染梅毒病的人数也在不断的增加。由于人的身体对梅毒螺旋体缺乏应有的抵抗力，对梅毒这种病的防治工作成为摆在医学面前的一个重要问题，在新的传染病防治法中已经将梅毒这种疾病划分为乙类传染病，具有较强的传染体。当人体感染梅毒螺旋体之后有可能会自动产生多种抗体，其中IgM和IgG就是其中的一部分，这两种特异性抗体和非特异性抗体统称为反应素[3]。当前血清学试验是作为实验室诊断梅毒一种主要方法之一，因此，选择科学有效的检测方法可以有效的控制梅毒的进一步蔓延有着十分重要的意义。本文笔者对梅毒苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒酶联免疫吸附测定(ELISA)以及梅毒螺旋体特异性抗原血清试验(RPR)这五种检测方法进行比较，试图从中选择最为理想的梅毒实验检测方案。
1材料与方法
1.1血清标本
笔者选取2013年1月1日~2014年1月30日来我院门诊治疗患者样本，其中经过化学发光法筛查得出血清中TP值是属于阳性的就有280例患者(阳性组)，将这些血清标本分为阳性组，这些患者中男性有178例、女性有102例，他们的平均年龄是48岁；其中I期患者就有86例、II期患者有194例。另一组是选择同期门诊就诊患者或者健康体检的经化学发光法测得TP值是属于阴性的非梅毒患者280例(阴性组)，这里面包括了患有肝炎的有58例、属于妊娠期孕妇的有26例、患有系统性红斑狼疮的有40例、是冠心病患者的有26例、属于肿瘤患者有30例、属于脑血栓患者的有40例、有冠心病的患者是24例、余下的36例是属于健康人。
1.2试剂与器材
试剂：试验用的试剂是由北京万泰生物有限公司提供的TRUST试剂盒，TPHA与TPPA试剂盒全是由上海科华实业生物技术有限公司提供的，由上海荣盛生物药业有限公司提供的ELISA试剂盒，由日本富士株式会社所提供的RPR试剂盒。器材：80-2型离心沉淀机是由上海荣泰生化工程有限公司生产，HH-W21-600型电热恒温水温箱是由上海医用恒温设备厂生产，HY-3型多用振荡器是江苏省金坛市环宇科学仪器厂生产，AP-960全自动酶联免疫分析仪是由日本生产[4]。
1.3检测方法
全部检测方法都是严格根据试剂盒相关说明要求，来对梅毒检测进行严格的判断，对于多次检测都无法确定的，需要进行重复的检测，直至准确为止，同时试剂盒一定需要在有效期的范围内使用。
1.4统计学方法
文中所用数据是使用SPSS软件来统计及分析的，全部计数方法是使用卡方检验的方法，P<0.05是属于具有统计学的差异。
2结果
2.1阳性/阴性比率：使用五种方法检测来进行比较
对280例患者（阳性组）的梅毒阳性血清与另280例（阴性组）血清标本对照分析，并分别使用TRUST，RPR，TPHA，TPPA，ELISA五种方法进行相应的检测，结果见表1。整体的研究结果可以知道，应用ELISA的检测方法可以发现患者的梅毒阳性率最高，并且明显可以看出高于TPPA，RPR，TRUST这三组，(P值都是小于0.05);TPHA在阴性组中检测出的阳性率为1.43%(4/280)，TPPA在阴性组中检测出的阳性率为0.00%(0/280)，RPR在阴性组中检测出的阳性率为2.86%(8/280)，TRUST在阴性组中检测出的阳性率为12.86%(36/280)，ELISA在阴性组中检测出阳性比率为l0.72%(30/280>，而TPPA所检测出的假阳性率则是大多数是低于其他的4种方法，P它的均值是小于0.05。
*与TPHA，RPR，TRUST四利检测方法比较，P<0.05;与TPPA比较，P>0.05。
3讨论
因为梅毒既能够通过胎盘传染又能够通过性接触来传染，还有能够通过输血或者共用手术器械等方式传染于他人[5][6]。所以，不仅对于有症状的患者需要进行梅毒检测，而且孕妇产前、手术前或输血前都有必要进行相关梅毒抗体方面项目的检测。其实梅毒在早期一般只会在局部性器官看到疳，除此之外没有其它明显的症状出现，通常会被患者忽略[7][8]。而一旦到了晚期的时候，梅毒就会对人体器官带来很大的伤害，最终难以控制病情，后果不堪设想。所以准确的检测方法有利于发现梅毒及时治疗。现实中临床上对梅毒的检测更多的是通过人体血清样本来进行检验，也就是我们通常所说的进行人体梅毒抗体项目的检测。
由于TPPA的特异性和灵敏度都很高，外界因素对其影响极少，同时能够对一些患者的假阳性做出准确的诊断，但是因为TPPA价格相对来说是贵许多、操作方法也相当的复杂，难以满足大量患者的检测工作。而ELISA可以全面地检测梅毒的特异性存在的抗体，同时ELISA又是当前血清检测方法中最为流行的一种检测方法，但是假若监测病例血清过氧化酶出现很高时，就会使人体的血浆蛋白容易产生紊乱的现象，以致于出现暂时性的假阳性，通过本研究可以知道ELISA在阴性组中也可以很好地检测出一些隐闭的阳性患者结果。由于ELISA具最方便快捷的检测方法，价格也十分的低廉，能够满足大量的样本检测，如果允许当在ELISA检出是阳性时，最好再通过TPPA进行再次复检，这样可以提高其准确度。
TRUST和RPR这种方法主要是针对梅毒非特异性抗体进行检测的，只能对一些较为严重的患者能够检测出来梅毒来，轻者是难以检测出来的。本研究结果表明，由于TRUSR能够检测假阳性的比率较高，但是其灵敏度和特异性相对来说较低，所以很少应用到梅毒的诊断中，但是这种方法能够对梅毒病情进行综合的观察，检测患者用药后的治疗效果，同时也可以对治愈后的患者进行复发核查。而RPR与TRUST有着相近的特点，所以其对梅毒诊断效果较差，但也可作为一些普遍人群的初步筛查工作[9][10]。TPHA这种检测方法虽然其灵敏度和特异性较高于其它ELISA、RPR和TRUST，但是其操作方法十分复杂不利于使用，还时常出现错误和误差的现象，并且实验结果重复性也相当的差，因此，这TPHA在临床中的实际应用相对来说较少。
综上所述，ELISA价格是相当低廉的，操作方法也十分的简便，阳性检测率也很高，是作为梅毒螺旋体大样本初步筛选的首选方法，但是其假阳性率也是很高的，最好再配合TPPA方法进行再次复查;TRUST与RPR检测方法不适合于梅毒患者的诊断，但其结果可以用在梅毒治疗病情追踪以及复发情况作为参考依据。
参考文献：
[1]赵军.EL1SA法检测梅毒抗体在孕产妇初筛中的应用[J].中国妇幼保健.2011.26(31):4940~4942.
[2]熊春莲，李方才，占小梅等.毒血清学试验在梅毒诊断中的应用[J].中华医院感染学杂志.2011.21(1):199~202.
[3]李秀玉，工培昌，杨陇等.毒螺旋体检测方法及应用[J].山东医药[J]，2011.51(16):111~112.
[阵]吴劲松.RPR与TPPA毒诊断及疗效的价值分析[J].中华医院感染学杂志.2011.21(2):416~418.
[5]张津萍，尤永燕，德吉曲珍.四种酶联免疫吸附试验试剂检测梅毒抗体的比较[J].检验医学.2010.25(10):787~790.
[6]钟娜，张丽芬，郑文爱等.梅毒血清学二种检测方法的比较[J].检验医学.2009.23(10):652~6s3.
[7]武培彪.EL1SA检测梅毒螺旋体抗体影响因素探讨[J].中国输血杂志.2011.24(6):531~532.
[8]林益振.四种梅毒血清学检测方法的比较田.中国皮肤性病学杂志[J].2009.23(6):382一384.
[9]张莉，田散，林路洋等.梅毒血清和脑脊液2145测结果分析[J].中国皮肤性病学杂志.2010.24(10):939~940.
[10]靳淑雁，刘世新，李玉风.250例妊娠妇女梅毒预防知识知晓情况调查[J].现代预防学.2013，40(11):2037~2039.
作者简介：
邹洪智，男，（1973-)，大学本科，主管技师，中级职称，研究方向：医学检验免疫