刘峥（四川省食品药品检验所四川成都610097）
【摘要】目的探讨气相色谱法定量测定阿奇霉素注射液中乙醇量的可行性。方法采用毛细管气相色谱法，HP-INNOWax毛细管色谱柱（PolyethyleneGlyco30m×320μm×0.5μm）起始温度为50℃，维持7分钟，再以每分钟10℃的速率升温至110℃；进样口温度为190℃，检测器温度为220℃；进样量1μl。结果乙醇与内标物正丙醇分离度符合要求，其他辅料无干扰；乙醇浓度在2×10-4～8×10-4ml/ml范围内线性关系良好，r=0.9999；精密度实验RSD为0.8%；平均回收率99.3%。结论气相色谱法快速、灵敏、准确，可用于测定阿奇霉素注射液中的乙醇含量。
【关键词】阿奇霉素注射液气相色谱法乙醇量
【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）20-0379-01
阿奇霉素注射液(AzithromycinInjection)为临床常用的抗生素类药，对临床上多种常见致病菌有抗菌作用，一般用于静脉滴注。处方中加入乙醇作为溶剂，含量较高为40%以上。制剂中含醇量过高会刺激血管内壁,而含醇量过低,注射液中阿奇霉素容易析出。因此有必要控制阿奇霉素注射液中乙醇的含量。目前阿奇霉素注射液标准[1]中未对乙醇的含量提出要求。本文参考中国药典[2]采用气相色谱法测定阿奇霉素注射液中的乙醇含量，并进行了专属性、线性、稳定性及回收率实验等方法学研究。现报告如下。
1仪器与试药
Agilent公司7890气相色谱仪，FID检测器。无水乙醇（AR）天津市科密欧化学试剂有限公司批号：20080602），正丙醇（AR）成都市长联化工试剂有限公司批号：20110602）。阿奇霉素注射液（商品名Anzatax，规格2ml:0.25g，批号110706），苏州长征-欣凯制药有限公司出品。
2方法与结果
2.1溶液的制备
2.1.1对照品溶液精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别置100ml量瓶中，再精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml于同一量瓶中，分别用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml至100ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀。
2.1.2供试品溶液的制备精密量取恒温至20℃的样品适量（相当于乙醇量5ml），置100ml量瓶中，精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml至100ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀。
2.2色谱条件HP-INNOWAX毛细管色谱柱（PolyethyleneGlyco30m×0.32mm，0.5μm）起始温度为50℃，维持7分钟，再以每分钟10℃的速率升温至110℃；进样口温度为190℃，检测器温度为220℃；进样量1μl。
2.3结果
2.3.1系统适用性试验取对照溶液1μl进样，理论板数按正丙醇峰计算为21200（规定应不低于8000），乙醇峰与正丙醇峰的分离度为14.9（规定应大于2.0）。符合中国药典要求，系统适用性试验成立。
2.3.2校正因子测定精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别置100ml量瓶中，分别精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml至100ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述三种溶液各1μl，分别连续进样三次，测定峰面积，计算校正因子。所得校正因子的相对标准偏差为0.27%。色谱图见图1。
图1：对照溶液图谱（前一个峰为乙醇峰，后为正丙醇峰）
2.3.3辅料干扰试验根据处方，阿奇霉素注射液中除乙醇外，还有聚乙二醇、丙二醇、丙三醇等有机溶剂作为辅料，为考察上述物质在此方法中是否对乙醇的测定造成干扰，分别按处方比例配制上述辅料的水溶液，以1μl体积进样。结果这几种辅料在该色谱条件下均未见明显响应，因此不影响乙醇含量的测定。
2.3.4线性关系考察精密量取恒温至20℃的无水乙醇2ml、4ml、5ml、6ml、8ml，分别置100ml量瓶中，分别精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml至100ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述三种溶液各1μl，分别进样，计算乙醇峰面积与正丙醇峰面积的比。乙醇量与乙醇/正丙醇峰面积比的对应关系见图2。
图2.乙醇线性范围
Y=0.1543X,R2=0.9998，乙醇量与响应值线性相关性良好。乙醇浓度在2×10-4～8×10-4ml/ml范围内，在测定的线性范围内。
2.3.5精密度试验取乙醇浓度为4×10-4ml/ml的溶液，照上述条件，连续进样6次，记录色谱图，计算乙醇和正丙醇峰面积比的RSD，结果为0.5%。
2.3.6重复性试验取供试品溶液6份，按上述条件进样分析，记录色谱图，计算乙醇含量。结果分别为46.99%,46.66%,47.35%，46.49%,47.45%平均值为47.0％，RSD为0.8％。
2.3.7回收率试验精密量取恒温至20℃的无水乙醇2、3、4ml各3份，分别置100ml量瓶中，再精密量取已知乙醇含量的阿奇霉素注射液（批号110706）5ml及恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml置上述各量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，共制备9份。取1μl进样，记录色谱图，按内标法以峰面积计算乙醇的含量，计算乙醇回收率。加样回收率在96.2%～107.2%范围内，平均回收率99.3%，方法可行。
2.3.8稳定性试验取重复性试验项下的供试液溶液1份，分别于0、2、4、6、8、12h，精密量取2ml，照上述条件进样，记录色谱图，计算乙醇含量。结果乙醇含量在12h内平均值为47.1%，RSD=1.28%。
3讨论
3.1按该方法对2个厂家的4批阿奇霉素注射液的乙醇含量进行了测定，结果均高于处方量。鉴于乙醇引起的不良反应，我们认为有必要在标准中增加乙醇的检查，并制订合理的限度。
3.2本方法按体积量取试剂，因此试剂的温度要恒定在20℃，以免温度变化引起取样误差。
参考文献
[1]国家食品药品监督管理局.国家药品标准,WS1-(X-151)-2004Z,55-78.
[2]国家药典委员会.中国药典2010年版二部[M］.北京：中国医药科技出版社,2010；