导读:本文包含了毒力缺失论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:布鲁氏菌,疫苗,clpP基因,毒力
毒力缺失论文文献综述
彭小薇,吴方达,刘郁夫,董浩,孙永健[1]（2019）在《牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株的毒力和免疫保护力评价》一文中研究指出为研究布鲁氏菌clpP基因与细菌毒力的关系,采用同源重组的方法,构建牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株,用巨噬细胞RAW264.7感染模型和小鼠感染模型评价clpP基因缺失株的毒力,同时测定该缺失株免疫小鼠后产生的免疫保护力。研究发现:牛种布鲁氏菌clpP基因缺失后,在细胞感染模型和小鼠感染模型中的毒力显着降低;clpP基因缺失株感染小鼠后,不引起脾脏肿胀,并且在脾脏内的持续期短于A19疫苗株,说明该基因缺失株具有更高的安全性;使用clpP基因缺失株免疫小鼠后,该基因缺失株无法抵御牛种布鲁氏菌2308株和羊种布鲁氏菌M28株的感染。本研究为揭示布鲁氏菌致病机制和新型布病疫苗研发提供了参考。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年11期）
高海侠,李锐,徐军,王瑞,李琳[2]（2019）在《baeSR和acrB基因缺失对鼠伤寒沙门菌毒力的影响》一文中研究指出[目的]本研究旨在探索baeSR和acrB基因缺失后对鼠伤寒沙门菌毒力的影响。[方法]利用鼠伤寒沙门菌体外诱导环丙耐药株CR、acrB基因缺失株(CRΔacrB)、baeSR和acrB基因双缺失株(CRΔbaeSRΔacrB)进行Hela细胞内存活实验、RAW264.7细胞黏附与侵袭试验。采用RNA-Seq技术筛选叁个菌株之间的差异表达基因,对筛选的基因进行GO富集和KEGG通路富集分析,进一步探究差异表达基因的主要功能及涉及的生物过程,并随机选出7个差异基因进行荧光定量PCR验证。[结果]结果发现:与CR相比,CRΔacrB在Hela细胞内存活能力和对RAW264.7细胞的侵袭与黏附能力均下降(P<0.05),CRΔbaeSRΔacrB在Hela细胞内存活能力和对RAW264.7细胞的侵袭与黏附能力均显着下降(P<0.01)。RNA-Seq结果表明:CRΔacrB与CR相比较,共筛选到1 320个差异表达基因(Fold change的绝对值>2,Q-value<0.005),其中上调426个,下调894个;CRΔbaeSRΔacrB与CR相比较,共筛选到1377个差异表达基因(Fold change的绝对值≥2,Q-value<0.005),其中上调405个,下调972个。两个比较组筛选到的毒力相关基因均主要富集在双组分系统(ompR、ompN、ompS、rpoS)、鞭毛组件(fliA、fliC、flgB、flHA)、沙门菌感染(sipC、sopB、sopE2、sseI、sseJ)和细菌分泌系统(ssaB、ssaC、ssaJ)等通路中。荧光定量PCR验证结果与RNA-Seq结果基本一致。[结论]本研究通过细胞黏附和侵袭试验发现baeSR和acrB缺失后鼠伤寒沙门菌的毒力下降,RNA-Seq技术筛选出了baeSR和acrB缺失后差异表达的毒力基因和代谢通路,为进一步研究baeSR和acrB基因对鼠伤寒沙门菌的致病机理奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13）
吴化叶,牟唐维,徐兴丽,冯骁,王丽春[3]（2019）在《us3基因的缺失对单纯疱疹病毒1型毒力和抗凋亡功能的影响》一文中研究指出利用CRISPR/Cas9系统使单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)ul7、ul41、LAT基因缺失构建M3减毒株(M3株),在M3株基础上通过缺失us3得到M4突变株(M4株)。本研究旨在分析野毒株(McKrae株)、M3株与M4株在毒力和抗细胞凋亡方面的差异。结果表明,McKrae组出现明显的临床症状,且100%死亡(P<0.001),而M3、M4组未出现临床症状。M4组小鼠组织中病毒载量明显低于McKrae组和M3组;病理学检测表明,McKrae组出现蛛网膜出血、胶质小结等现象,而M3、M4组未见病理损伤,M4组炎性因子表达与McKrae、M3组相比也显着下降(P<0.01);免疫后M4组较M3组出现高水平的中和抗体、γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)和白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)抗原特异性T细胞;McKrae株再次感染时,M4组小鼠组织中病毒载量明显低于对照组和M3组;在人急性T细胞淋巴瘤细胞中,M4株相比McKrae株和M3株可明显诱导细胞凋亡。(本文来源于《微生物与感染》期刊2019年03期）
齐毅[4]（2019）在《副猪嗜血杆菌nanH和lsgB基因缺失株的免疫保护力和毒力研究》一文中研究指出副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)是一种定植于猪上呼吸道的革兰氏阴性条件致病菌,猪在免疫力低下或者应激状态下时,该菌可引起格拉瑟氏病(Gl?sser’s disease)。尽管副猪嗜血杆菌毒力因子及致病机理仍不清楚,但病原菌表面唾液酸化是其逃避和抵抗宿主免疫系统重要的机制,而且已有体外实验表明副猪嗜血杆菌的唾液酸酶和唾液酸转移酶与细菌毒力密切相关,所以本论文对副猪嗜血杆菌唾液酸基因缺失株JS0135△nanH和唾液酸转移酶基因缺失株SH0165△lsgB对仔猪的免疫保护效果和致病能力进行了研究,所取的主要研究结果如下。1.JS0135△nanH和SH0165△lsgB对仔猪的免疫保护将JS0135△nanH和SH0165△lsgB通过肌肉途径和腹腔途径免疫仔猪,商业灭活疫苗免疫和PBS免疫作为阳性对照和阴性对照,然后用强毒株SH0165攻毒。实验中检测仔猪血清中副猪嗜血杆菌抗体水平上升的速度,发现JS0135△nanH免疫组仔猪抗体水平上升速度快于SH0165△lsgB免疫组仔猪,SH0165△lsgB免疫组仔猪快于商业灭活疫苗免疫组仔猪;JS0135△nanH免疫组通过腹腔途径免疫的仔猪显着快于通过肌肉途径免疫的仔猪,SH0165△lsgB免疫组仔猪两种免疫途径没有明显差异。仔猪攻毒后综合评价不同免疫组的免疫保护效果,JS0135△nanH优于SH0165△lsgB,SH0165△lsgB优于商业灭活苗。2.野生株和缺失株感染细胞刺激细胞炎性因子将JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分别感染3D4/2细胞,4h后检测细胞炎性因子的mRNA表达水平,发现IL-1α、IL-8和TNF-α差异性表达。然后在2h、4h和8h时,检测IL-1α、IL-8和TNF-α的表达情况,结果显示缺失株较野生株刺激细胞产生更高的细胞炎性因子(P≤0.01)。3.野生株和缺失株对仔猪攻毒将JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分别对仔猪进行攻毒,通过记录仔猪临床症状、大体病理变化和组织器官分菌,结果表明SH0165△lsgB相对野生株SH0165对仔猪致病力明显下降,JS0135△nanH相对野生株JS0135对仔猪致病力没有明显改变;JS0135△nanH在存活下来的仔猪体内全部被清除。(本文来源于《华中农业大学》期刊2019-06-01）
王艳琳[5]（2019）在《鸡白痢沙门菌毒力相关基因缺失株的构建及免疫效力评价》一文中研究指出鸡白痢沙门菌是当前危害我国养禽业的重要病原菌,每年均造成了较为严重的经济损失。《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》明确要求实施鸡白痢净化工程,养殖企业主要采取血清学诊断方法进行鸡白痢的检疫,淘汰阳性鸡达到净化鸡群的目的。疫苗可作为净化的辅助手段,其中减毒活疫苗与灭活疫苗和亚单位疫苗相比,不仅具有持久刺激机体产生体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答的特点,还可以通过基因缺失策略设计为区分自然感染与疫苗免疫动物的DIVA疫苗,这对种群中鸡白痢的净化具有重要意义,显示出广阔的应用前景。我们在前期研究构建的鸡白痢沙门菌aroA基因缺失株S004AaroA基础上,运用λ-Red同源重组的方法进一步成功构建了鸡白痢沙门菌spB、crp和rfaG基因的多基因缺失株,并通过对其生物学特性、致病性和免疫效力进行评价,筛选出较理想的减毒疫苗候选株,为进一步研发鸡白痢沙门菌减毒疫苗奠定基础。1.鸡白痢沙门茵spB、crp和rfaG基因缺失株的构建及生物学特性的测定选择与鸡白痢沙门菌侵袭力和耐高渗能力相关的基因sipB、与菌毛表达相关的基因crp和与脂多糖合成相关的基因rfaG设计引物,以S004AaroA为母本株,利用λ-Red同源重组系统构建了 4株双基因或叁基因缺失株,分别命名为S004 AaroA△sipB、S004 △aroA △crp、S004AaroA△sipB△rfaG 和S004△aroA△crp△rfaG。并对各基因缺失株进行生长曲线测定和细胞黏附与入侵试验。结果显示,S004△aroA△sipB和S004△aroA△sipBΔrfaG的生长速度与野生株相比无显着差异(P>0.05),S004AaroA△crp 和 S00A△aroA△crp△rfaG 在普通肉汤培养基中生长受限,当添加0.05%葡萄糖后可恢复与野生株相近的生长速度。遗传稳定性试验显示,所有基因缺失株在传代50代后性状均未发生改变,各个基因遗传稳定,未发生回复或突变。对HeLa细胞的黏附与入侵试验结果显示,sipB基因缺失能显着降低细菌的黏附与入侵能力。本研究为鸡白痢减毒疫苗候选株的进一步筛选奠定了基础。2.鸡白痢沙门菌基因缺失株的致病性及免疫效力评价2日龄SPF雏鸡腹腔注射攻毒,测定半数致死量(LD50)评价各缺失株的致病性。结果显示,野生株S004的LD50为6.O×1O7CFU,单基因缺失株S004△aroA的 LD50 为>1.3×109CFU,双基因缺失株 S004△aroA△sipB 和 S004△aroA△crp的LD50分别为>1.A×109CFU和>1.7×109 CFU,叁基因缺失株S004△aroAAsiprfaG和S004△aroA△crp△rfaG的LD50 分别为>2.1×109 CFU和 1.4×109CFU,S004△aroA△sipB和S004△aroA△sipB△rffaG 的毒力较母本株S004△△aroA进一步致弱。每种基因缺失株以108 CFU剂量口服免疫2日龄SPF雏鸡,免疫后14 d以109 CFU剂量腹腔注射野生型S004菌株进行人工攻毒,通过对攻毒前后的鸡只体重进行监测,结果显示,S004△aroA、S004△aaroA△sipB和S004△△aro△sipB△rfaG免疫组的体重增长情况在免疫期内与健康对照组相比差异不显着(P>0.05);免疫保护力的测定结果显示,S004△aroA△sipB和S004△aroA△sipB△rfaG组的免疫保护效果最好,提供了 83.3%的保护力,优于单基因缺失株S004△aroA(66.7%)和肠炎沙门菌疫苗对照株Sm24(50%),而S004△aroAAcrp(16.7%)和 S004△aroA△crp△rfaG(33.3%)的免疫保护效果不理想。综上所述,S004△aroA△sipB和S004△aroA△sipB△rfaG均提供了较好的免疫保护效果,其中S004△aroA△sipB△rfaG由于缺失rfaG基因具有DIVA特性,可用于区分自然感染和免疫感染家禽,因此S004△aroA△sipB△rfaG可以作为鸡白痢沙门菌DIVA减毒疫苗的候选株。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-05-01）
张玉菡,田开月,郭慧芳,李宁,杨霞[6]（2018）在《高致病性FAdV-4中国流行株缺失的1966bp与毒力无关》一文中研究指出引言肝炎-心包积液综合征(HHS)是由禽腺病毒4型(FAdV-4)引起的一种禽类重要传染病。2015年5月份以来,我国暴发了由FAdV-4新基因型引起的HHS,给我国养禽业造成了巨大经济损失。目前研究已证明,我国流行的FAdV-4新基因型与同属C群的非致病性FAdV-4毒株相比,其基因组存在1966bp的缺失,主要结构基因Penton、Hexon和Fiber也存在多位点氨基酸替换~([1])。为了确定缺失的1966bp与(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21）
杜冬冬,康立超,张奇文,李红欢,钱凌霄[7]（2018）在《单增李斯特菌lmo0331基因缺失株构建及其毒力的研究》一文中研究指出引言单核细胞增生性李斯特菌(LM)是兼性厌氧革兰氏阳性菌,对外界环境耐受力极强,可引起人与多种动物感染~([1])。人类感染李斯特菌病主要因食用被LM污染的食物,可引起脑炎、脑膜炎、流产和败血症等~([2]),其死亡率高达20%～30%。LM共有16种血清型,其中4b型的LM主要引起(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集》期刊2018-11-16）
范斌,陈卓,刘建华,鲍子磊,胡月[8]（2018）在《马疱疹病毒1型主要毒力基因分析及TK基因缺失载体的构建》一文中研究指出为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株,本研究以EHV-1XJ2015株DNA为模板,对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析,并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR,构建质粒pUC-TKLR,将扩增后的增强绿色荧光蛋白(EGFP,含有CMV+polyA)插入pUC-TKLR质粒,构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示,XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高,分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%;与EHV-3分离株同源性均最低,分别为72.9%、59.4%和62.1%;遗传进化分析显示,3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支,与EHV-9和EHV-4进化关系较近,但与EHV-3进化关系较远,表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显,没有明显的地域性特征,功能基因保守且进化缓慢,同源基因功能相同或相近;经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定,本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建,为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年10期）
张奇文,凌晨,吴学林,马勋,薄新文[9]（2019）在《单增李斯特菌srtA基因缺失株的构建及srtA基因对其毒力的影响研究》一文中研究指出为了研究srtA基因对单增李斯特菌LM90SB2毒力的影响,本研究利用同源重组技术构建了LM90SB2 srtA基因缺失株LM90SB2-?srt A,比较分析了亲本株LM90SB2与缺失株LM90SB2-?srt A对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC 4种细胞系的粘附、侵袭、胞内增值能力及LM90SB2和LM90SB2-?srt A感染小鼠后,小鼠的LD50及肝脏、脾脏、脑载菌量变化差异。结果显示,本研究成功构建了srt A基因缺失株;与亲本株LM90SB2比较,缺失株LM90SB2-?srt A对RAW264.7和SIEC的粘附率、侵袭率及胞内细菌数量均下降,且差异具有显着统计学意义(p<0.05);小鼠LD50降低了21.38倍,肝脏、脾脏载菌量降低,差异具有显着统计学意义(p<0.05)。本研究结果表明,srt A基因对单增李斯特菌LM90SB2的毒力具有关键作用,参与粘附、侵袭BMEC,该研究结果为进一步阐明单增李斯特菌毒力因子的致病机制提供理论依据。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年04期）
王文静,杨丽玉,刘婵娟,赵进,罗勤[10]（2018）在《谷氨酸脱氢酶缺失对单核细胞增生李斯特菌生物被膜、毒力及胞外蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探究谷氨酸脱氢酶缺失对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)生物被膜、毒力及胞外蛋白表达的影响。方法:利用微孔板法,检测谷氨酸脱氢酶缺失对Lm生物被膜形成能力的影响;比较野生株、谷氨酸脱氢酶缺失株EGDeΔgdh A及回复菌株EGDeΔgdh A+p ERL3-gdh A的溶血活性和对棉铃虫幼虫的半数致死量,检测谷氨酸脱氢酶缺失对Lm毒力的影响;利用i TRAQ技术对Lm野生株EGDe与谷氨酸脱氢酶缺失株EGDeΔgdh A的胞外蛋白进行分离与鉴定,并对差异表达蛋白质进行生物信息学分析。结果:与野生株相比,缺失株形成的生物被膜量显着降低(P≤0.01),溶血活性下降,对棉铃虫幼虫的半数致死量上升了1.6倍;蛋白质组学结果显示,缺失谷氨酸脱氢酶后差异性表达的胞外蛋白有62个,其中47个蛋白质表达量下调,15个蛋白质表达量上调。进一步将这些差异表达蛋白质同COG数据库进行比对及功能聚类分析,结果显示,这些蛋白质的功能分别属于碳水化合物转运与代谢、核苷酸转运和代谢、能量合成与转运相关、转录及细胞膜细胞壁相关蛋白等16个功能类别;其中碳氮代谢及能量转运相关蛋白数量最多,为24个,占所鉴定出的差异蛋白质总量的38.71%。表明谷氨酸脱氢酶是单核细胞增生李斯特菌中碳氮代谢和能量转运中的关键酶。同时,发现有3个与细菌黏附及生物被膜形成相关的蛋白质表达量下降。以上结果较好地解释了EGDeΔgdh A在基础培养基中生长缓慢和生物量显着性下降,以及生物被膜形成能力降低的现象。结论:谷氨酸脱氢酶在单核细胞增生李斯特菌生物被膜、毒力及胞外蛋白表达方面有重要作用。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年09期）
毒力缺失论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]本研究旨在探索baeSR和acrB基因缺失后对鼠伤寒沙门菌毒力的影响。[方法]利用鼠伤寒沙门菌体外诱导环丙耐药株CR、acrB基因缺失株(CRΔacrB)、baeSR和acrB基因双缺失株(CRΔbaeSRΔacrB)进行Hela细胞内存活实验、RAW264.7细胞黏附与侵袭试验。采用RNA-Seq技术筛选叁个菌株之间的差异表达基因,对筛选的基因进行GO富集和KEGG通路富集分析,进一步探究差异表达基因的主要功能及涉及的生物过程,并随机选出7个差异基因进行荧光定量PCR验证。[结果]结果发现:与CR相比,CRΔacrB在Hela细胞内存活能力和对RAW264.7细胞的侵袭与黏附能力均下降(P<0.05),CRΔbaeSRΔacrB在Hela细胞内存活能力和对RAW264.7细胞的侵袭与黏附能力均显着下降(P<0.01)。RNA-Seq结果表明:CRΔacrB与CR相比较,共筛选到1 320个差异表达基因(Fold change的绝对值>2,Q-value<0.005),其中上调426个,下调894个;CRΔbaeSRΔacrB与CR相比较,共筛选到1377个差异表达基因(Fold change的绝对值≥2,Q-value<0.005),其中上调405个,下调972个。两个比较组筛选到的毒力相关基因均主要富集在双组分系统(ompR、ompN、ompS、rpoS)、鞭毛组件(fliA、fliC、flgB、flHA)、沙门菌感染(sipC、sopB、sopE2、sseI、sseJ)和细菌分泌系统(ssaB、ssaC、ssaJ)等通路中。荧光定量PCR验证结果与RNA-Seq结果基本一致。[结论]本研究通过细胞黏附和侵袭试验发现baeSR和acrB缺失后鼠伤寒沙门菌的毒力下降,RNA-Seq技术筛选出了baeSR和acrB缺失后差异表达的毒力基因和代谢通路,为进一步研究baeSR和acrB基因对鼠伤寒沙门菌的致病机理奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
毒力缺失论文参考文献
[1].彭小薇,吴方达,刘郁夫,董浩,孙永健.牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株的毒力和免疫保护力评价[J].中国动物检疫.2019
[2].高海侠,李锐,徐军,王瑞,李琳.baeSR和acrB基因缺失对鼠伤寒沙门菌毒力的影响[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集.2019
[3].吴化叶,牟唐维,徐兴丽,冯骁,王丽春.us3基因的缺失对单纯疱疹病毒1型毒力和抗凋亡功能的影响[J].微生物与感染.2019
[4].齐毅.副猪嗜血杆菌nanH和lsgB基因缺失株的免疫保护力和毒力研究[D].华中农业大学.2019
[5].王艳琳.鸡白痢沙门菌毒力相关基因缺失株的构建及免疫效力评价[D].扬州大学.2019
[6].张玉菡,田开月,郭慧芳,李宁,杨霞.高致病性FAdV-4中国流行株缺失的1966bp与毒力无关[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[7].杜冬冬,康立超,张奇文,李红欢,钱凌霄.单增李斯特菌lmo0331基因缺失株构建及其毒力的研究[C].中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集.2018
[8].范斌,陈卓,刘建华,鲍子磊,胡月.马疱疹病毒1型主要毒力基因分析及TK基因缺失载体的构建[J].中国畜牧兽医.2018
[9].张奇文,凌晨,吴学林,马勋,薄新文.单增李斯特菌srtA基因缺失株的构建及srtA基因对其毒力的影响研究[J].中国动物传染病学报.2019
[10].王文静,杨丽玉,刘婵娟,赵进,罗勤.谷氨酸脱氢酶缺失对单核细胞增生李斯特菌生物被膜、毒力及胞外蛋白表达的影响[J].中国生物工程杂志.2018