锌结合态金属硫蛋白论文_杨洪

锌结合态金属硫蛋白论文_杨洪

导读:本文包含了锌结合态金属硫蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:小球藻,蛋白,金属,酪氨酸,活性,表征,诱导。

锌结合态金属硫蛋白论文文献综述

杨洪[1](2013)在《小球藻锌结合类金属硫蛋白的提取及其功能研究》一文中研究指出金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类分子量小、巯基含量高的蛋白质,具有抗氧化、抗肿瘤、调节机体平衡等功能。目前商品化的MT大多从兔肝提取,其技术难度大、生产成本高,故开发MT的原材料资源具有重要意义。研究发现微藻细胞含有类金属硫蛋白,且通过重金属胁迫可显着提高其含量。基于此,本论文通过Zn~(2+)胁迫小球藻诱导产生类金属硫蛋白,经分离、纯化得到小球藻类金属硫蛋白,并且对其抑制酪氨酸酶、抗紫外辐射和抗镉损伤的功能进行试验。本学位论文由六章组成:第一章,介绍了金属硫蛋白的来源、结构、生理功能、检测方法与应用领域,并对微藻类金属硫蛋白的提取、结构表征和应用进行综述。第二章,通过不同浓度(5、10、20、50、100μmol/L)Zn~(2+)胁迫培养小球藻,考察Zn~(2+)胁迫下小球藻细胞的生理学响应机制。发现Zn~(2+)胁迫将降低小球藻细胞的叶绿素含量,影响其抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT、POD)的活性,并促进其脂质过氧化,进而抑制小球藻细胞的生长。但Zn~(2+)同时也具有促进小球藻Zn-MT-like蛋白生物合成的作用,当用50μmol/L Zn~(2+)胁迫培养72 h,可使小球藻Zn-MT-like蛋白含量提高2.5倍以上。此外,通过差速离心法考察Zn在小球藻细胞的亚细胞分布,发现锌主要分布于热稳定蛋白(HSF)组分中,且其含量随Zn~(2+)胁迫浓度的提高而增加,说明小球藻可通过HSF组分结合进入细胞内的锌,从而起到降低其损伤细胞的作用。第叁章,小球藻经50μmol/L Zn~(2+)胁迫培养72 h,离心收集藻细胞,经细胞破碎、离心后,提取小球藻蛋白质溶液。蛋白溶液分别经葡聚糖凝胶G-75、G-25层析柱分离、纯化后,经冷冻干燥得到小球藻Zn-MT-like蛋白制品,每克鲜藻可提取20 mg的小球藻类金属硫蛋白。经试验,发现该小球藻Zn-MT-like蛋白纯度为91.8%,且其分子量与MT相近。第四章,研究小球藻类金属硫蛋白对酪氨酸酶的抑制作用。发现小球藻Zn-MT-like蛋白具有延长单酚酶迟滞时间,并具有抑制单酚酶稳定态酶和二酚酶活性的作用,10mg/mL的小球藻Zn-MT-like蛋白可延长单酚酶迟滞时间至2300 s、几乎能完全抑制单酚酶稳定态酶的活性,且对二酚酶活性的抑制率高达87%。第五章,建立NIH/3T3细胞紫外辐射和镉损伤的模型,考察小球藻Zn-MT-like蛋白抗紫外辐射和抗镉损伤的作用。结果表明:小球藻Zn-MT-like蛋白具有较强的抗紫外辐射作用,10 mg/mL的小球藻Zn-MT-like蛋白可减少NIH/3T3细胞空泡、降低细胞裂解程度,使经辐射的NIH/3T3细胞活性从对照组的0.52增加到0.84。此外,发现小球藻Zn-MT-like蛋白具有抗镉损伤的作用,用10 mg/mL的小球藻Zn-MT-like蛋白处理NIH/3T3细胞,可显着降低其镉损失的程度。(本文来源于《集美大学》期刊2013-04-15)

李连平,张小东,黄志勇,鄢庆枇,梁英[2](2010)在《小球藻锌结合类金属硫蛋白的结构表征及抗菌活性》一文中研究指出小球藻经60μmol/L的锌胁迫培养5d后,离心收集藻泥,经超声波细胞破碎后,离心得到上清液即蛋白质粗提液,再经葡聚糖凝胶层析柱G-75及脱盐柱G-25分离、纯化后,收集的蛋白组分经真空冷冻干燥后获得小球藻锌结合蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE电泳、氨基酸组成及紫外光谱等方法进行表征,测得该蛋白的分子量约为8.2ku,半胱氨酸含量为15.4%,具有金属硫蛋白典型的紫外光谱特征,称为类金属硫蛋白(Zn-MT-like proteins)。试验采用琼脂糖孔穴扩散法,研究了小球藻Zn-MT-like蛋白对3种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌)和3种真菌(青霉菌、曲霉菌、酵母菌)的抗菌活性,并与兔肝Zn-MTs的抗菌能力进行比较。结果表明,小球藻Zn-MT-like蛋白对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌)和霉菌(青霉、曲霉)具有显着的抗菌活性,1mg/mL的Zn-MT-like蛋白对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉和曲霉的抑菌圈直径分别为13.2、17.4、7.2和9.8mm;而对大肠杆菌、酵母菌则无抗菌活性。同样条件下,未加锌胁迫的小球藻蛋白质本身和兔肝Zn-MTs并不具有这些抗菌能力。小球藻Zn-MT-like蛋白抗菌活性的发现为进一步综合开发利用小球藻提供了实验基础。(本文来源于《水产学报》期刊2010年02期)

李连平,黄志勇,王志聪,刘晓雪,黄丽娥[3](2009)在《小球藻锌结合金属硫蛋白(Zn-MT-like)的抗氧化活性研究》一文中研究指出目的:研究锌胁迫诱导小球藻类金属硫蛋白的抗氧化活性。方法:小球藻经60μmol/L锌诱导胁迫培养8d,离心收集藻细胞;超声波破碎细胞,离心,上清液经凝胶层析柱(葡聚糖G-75)及脱盐柱(葡聚糖G-25)分离、纯化,得到锌结合金属蛋白;经光谱特征分析,确认为类金属硫蛋白(Zn-MT-like)。对Zn-MT-like的抗氧化活性进行比较研究,包括基于Fenton反应体系的羟自由基(·OH),1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)产生的自由基和邻苯叁酚自氧化产生的超氧阴离子(·O2-)自由基的清除能力。结果:小球藻诱导产生的Zn-MT-like对这3种自由基均有较强的清除作用,其清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的半数抑制率浓度(IC50)分别为13.12、2.23和48.59mg/L;其抗羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力高于谷胱苷肽和兔肝锌诱导的金属硫蛋白(Zn-MTs)。结论:小球藻锌结合类金属硫蛋白具有显着的抗氧化活性能力。(本文来源于《中国食品学报》期刊2009年04期)

李连平,梁英,黄志勇,徐同玲[4](2009)在《小球藻锌结合类金属硫蛋白的提取和分离》一文中研究指出小球藻经60μmol/L的锌胁迫培养5天后,离心收集藻泥,经超声波细胞破碎后,离心得到上清液即蛋白质粗提液。粗提液经葡聚糖凝胶层析柱G-75及脱盐柱G-25分离、纯化后,收集的蛋白组分经真空冷冻干燥后获得小球藻锌结合蛋白。实验测定了在不同pH值下小球藻锌结合蛋白的紫外光谱特征,发现该蛋白质的紫外光谱特征与兔肝金属硫蛋白(Zn-MTs)十分相似。经阴离子交换层析柱(DEAE Sephadex A-25)及反相液相色谱分离表明,小球藻锌结合蛋白的色谱行为与兔肝Zn-MTs有一定的相似性。此外,经Tricine-SDS-PAGE法测定该蛋白质的分子量约为8.2kDa;蛋白质分子中半胱氨酸含量达15%以上。由此可见,小球藻在锌胁迫下可诱导生成与兔肝Zn-MTs相似的锌结合蛋白质,即类金属硫蛋白(Zn-MT-like)。每克鲜藻可诱导Zn-MT-like蛋白达0.2g以上。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2009年06期)

陶炼晖,王翔朴[5](1990)在《镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅰ.尿金属硫蛋白对镉毒性肾损害的检测价值》一文中研究指出采用Sephadex G-75凝胶柱色谱技术对亚急性镉毒性肾损害大鼠肝、肾、血、尿中金属硫蛋白(MT)进行了分离测定。结果表明,镉暴露后,肝、肾、血、尿中MT增多。MT是体内镉的主要存在形式,其在体内镉的运转、蓄积及排泄过程起最重要的作用。尿中MT增高是镉毒性肾损害最早出现的变化之一,它作为低分子蛋白质是肾小管功能障碍的灵敏指标。同时,作为一种镉金属结合蛋白,在反映镉性肾损害有其特异性。(本文来源于《职业医学》期刊1990年03期)

锌结合态金属硫蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

小球藻经60μmol/L的锌胁迫培养5d后,离心收集藻泥,经超声波细胞破碎后,离心得到上清液即蛋白质粗提液,再经葡聚糖凝胶层析柱G-75及脱盐柱G-25分离、纯化后,收集的蛋白组分经真空冷冻干燥后获得小球藻锌结合蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE电泳、氨基酸组成及紫外光谱等方法进行表征,测得该蛋白的分子量约为8.2ku,半胱氨酸含量为15.4%,具有金属硫蛋白典型的紫外光谱特征,称为类金属硫蛋白(Zn-MT-like proteins)。试验采用琼脂糖孔穴扩散法,研究了小球藻Zn-MT-like蛋白对3种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌)和3种真菌(青霉菌、曲霉菌、酵母菌)的抗菌活性,并与兔肝Zn-MTs的抗菌能力进行比较。结果表明,小球藻Zn-MT-like蛋白对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌)和霉菌(青霉、曲霉)具有显着的抗菌活性,1mg/mL的Zn-MT-like蛋白对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉和曲霉的抑菌圈直径分别为13.2、17.4、7.2和9.8mm;而对大肠杆菌、酵母菌则无抗菌活性。同样条件下,未加锌胁迫的小球藻蛋白质本身和兔肝Zn-MTs并不具有这些抗菌能力。小球藻Zn-MT-like蛋白抗菌活性的发现为进一步综合开发利用小球藻提供了实验基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

锌结合态金属硫蛋白论文参考文献

[1].杨洪.小球藻锌结合类金属硫蛋白的提取及其功能研究[D].集美大学.2013

[2].李连平,张小东,黄志勇,鄢庆枇,梁英.小球藻锌结合类金属硫蛋白的结构表征及抗菌活性[J].水产学报.2010

[3].李连平,黄志勇,王志聪,刘晓雪,黄丽娥.小球藻锌结合金属硫蛋白(Zn-MT-like)的抗氧化活性研究[J].中国食品学报.2009

[4].李连平,梁英,黄志勇,徐同玲.小球藻锌结合类金属硫蛋白的提取和分离[J].食品与发酵工业.2009

[5].陶炼晖,王翔朴.镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅰ.尿金属硫蛋白对镉毒性肾损害的检测价值[J].职业医学.1990

论文知识图

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