神经分泌细胞论文_伍校琼,罗明英,朱武,杨宝林,罗华

导读:本文包含了神经分泌细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:神经,细胞,中华,甲壳动物,器官,帕金森,河蟹。

神经分泌细胞论文文献综述

伍校琼,罗明英,朱武,杨宝林,罗华[1](2012)在《神经分泌素对体外培养血管平滑肌细胞VCAM、MCP-1和Ki67表达的影响》一文中研究指出目的观察神经分泌素(Secretoneurin,SN)对体外培养血管平滑肌细胞(vascular smoothmuscle cells,VSMC)粘附分子(VCAM)、单核细胞趋化因子(MCP-1)和Ki67(细胞增殖标记物)表达的影响。方法将体外培养的成年大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞随机分成正常对照组和SN实验组,应用免疫荧光细胞化学技术检测VCAM、MCP-1和Ki67的表达,Nikon共聚焦显微镜观察并拍照,图片用EZ-C1 3.70 FreeViewer进行处理。结果免疫荧光显示,正常对照组VCAM和MCP-1表达微弱,Ki67阳性细胞很少;SN作用24 h后,VCAM、MCP-1的表达和Ki67的阳性细胞数目明显增多。其中VCAM-1、MCP-1的免疫细胞荧光强度和Ki67的阳性细胞率在两组间差异有显着性(P<0.05)。结论SN可上调粘附分子和单核趋化因子的表达,同时促进血管平滑肌细胞的增殖。(本文来源于《中国临床解剖学杂志》期刊2012年01期)

孙宗鹏[2](2011)在《大脑多巴胺神经营养因子在神经分泌细胞中的运输和分泌》一文中研究指出一、研究背景及目的大脑多巴胺神经营养因子(Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor, CDNF),是一种新发现的进化保守的蛋白,在大鼠帕金森病动物模型中,大脑多巴胺神经营养因子CDNF是一种潜在的能够保护和恢复多巴胺能神经元的功能的关键治疗蛋白。CDNF在包括大脑皮层,海马,黑质,纹状体和中脑等多个脑区的神经元中广泛表达。人的CDNF可以糖基化,并从瞬时转染细胞中分泌,然而,目前CDNF分泌的调控机制还不清楚。作为一个新发现的神经营养因子,关于CDNF运输和分泌的一些基本问题还没有解决。首先,CDNF是怎么分泌的,是通过组成型分泌途径还是调节型分泌途径?主要通过哪条途径?第二,CDNF蛋白合成中发生什么类型的糖基化?N-连接的糖基化还是O-连接的糖基化?糖基化是否影响CDNF蛋白的运输和分泌?最后,人们已经知道人的CDNF没有前原序列,但是在CDNF蛋白中是否存在能够影响胞内运输和分泌的一些结构域。二、实验方法1.各种表达质粒的构建2.测定过表达的CDNF在PC12及HEK293细胞中的分泌3. CDNF在大鼠海马神经元及PC12细胞中的免疫荧光细胞化学染色4.利用alanine-scanning技术,寻找关键氨基酸5.在PC12细胞中各种突变体与内质网和高尔基体标志物的共定位检测6.COS-7细胞中CDNF的运输情况检测7.在PC12细胞中各突变体与分泌囊泡标志物的共定位检测叁、实验结果1、CDNF在神经分泌型细胞中的分布与分泌情况为了检测CDNF在细胞中的定位和分布情况,我们构建了带有C-末端HA标签的人类CDNF cDNA的真核表达质粒(pcDNA3.1-HA-hCDNF)。然后通过Western Blot方法,证实CDNF即通过组成型分泌途径又通过调节型分泌途径,并且主要通过调节型分泌途径分泌。利用HA标签免疫荧光化学染色方法,我们发现CDNF在海马神经元和分化的PC12细胞的胞体和突起中均有点状分布。2、证实CDNF的糖基化不影响它的分泌我们构建了影响CDNF的N-连接糖基化和O-连接糖基化的点突变的突变体:N57A(57位N-连接糖基化位点N突变为A)和T181A(181位O-连接糖基化位点T突变为A),通过Western Blot的方法证明在HEK293细胞中破坏CDNF的N-连接糖基化,不影响CDNF的组成型分泌。随后,我们发现在PC12细胞中不发生CDNF的N-连接糖基化,因此我们构建了抑制O-连接糖基化的突变体T181A,并证明破坏CDNF在PC12细胞中的O-连接糖基化不影响CDNF的分泌。3、探索CDNF中调控其分泌的关键区域通过在α-Helix中插入脯氨酸破坏α-Helix结构,我们构建了一系列CDNF的突变体。通过Western Blot的方法证明,破坏第一个α-Helix (M1)会影响CDNF的组成型和调节型分泌,然而,破坏第七个α-Helix (M7)只影响CDNF的调节型分泌。其它突变体不影响CDNF的分泌。利用免疫荧光细胞化学染色方法,发现M1在分化的PC12细胞中的分布出现异常(M1更多聚集在胞体而很少在突起分布),但是,跟Wt相比M7的分布无明显变化。为了排除插入脯氨酸对蛋白的整体空间结构的影响,我们利用alanine-scanning技术构建一系列突变体,发现41-48氨基酸序列在CDNF的分泌中发挥重要作用。4, CDNF分泌运输缺陷的关键步骤鉴定利用免疫荧光细胞化学染色方法,我们发现M7与Wt与内质网标志物共定位情况无明显区别。与Wt和M7相比,M1与内质网标志物calnexin有更多的共定位,然而通过研究它们与高尔基体的标志物TGN38的共定位证实:跟Wt与M7相比,仅有很少部分的M1与TGN38共定位。为了进一步证实M1不能有效地从内质网运输到高尔基体,我们利用一种带荧光的温度敏感蛋白pEGFP-VSVG,在COS-7细胞中利用免疫荧光细胞化学染色方法发现,当温度从39.5℃C降到20℃C时,部分Wt-CDNF和M7聚集到高尔基体。但是跟Wt,M7和VSVG不同,在20℃C时M1不能有效聚集到高尔基体。5、M7不能有效地分选到调节型分泌途径我们推测M7的分泌异常可能是由于Golgi以后的运输出现了问题,因此检测了M7与一种分泌囊泡的标志物Secll的共定位,与Wt跟Secll的共定位不同,M1和M7跟Secll的共定位都很少。四、实验结论在PC12细胞中,CDNF主要通过调节型分泌途径分泌,CDNF的糖基化不影响它的分泌。并且发现影响CDNF分泌的两个关键区域:当破坏Helix-1,组成型分泌和调节型分泌都降低,并且Helix-1突变体在内质网聚集;当破坏Helix-7,组成型分泌不受影响只有调节型分泌减少。并且Helix-7突变体与分泌囊泡标志物的共定位减少。(本文来源于《山东大学》期刊2011-05-08)

赵景霞,孙金生,张子怡[3](2007)在《中华绒螯蟹眼柄端髓X器官神经分泌细胞钙激活钾通道研究》一文中研究指出采用膜片钳的内面向外式记录了中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞钙激活钾通道活动。结果表明,在对称性高钾溶液中(200mmol.L-1),钙激活钾通道的单通道活动为快速开放的矩形方波,时程长短不一,通道电导为(213.4±11.2)pS。在-80~+80mV钳制电压下,通道电流幅度及开放概率呈现明显的电压依赖性;随浴液游离Ca2+浓度的增加,通道的开放概率和开放数目增加,表现出明显的钙敏感性。药物敏感试验结果显示,80mmol.L-1四乙胺(TEA)可完全阻断通道活动。表明中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经分泌细胞钙激活钾通道(BKCa)具有大电导、电压依赖性、Ca2+敏感性和四乙胺(TEA)敏感性等特征。(本文来源于《水产学报》期刊2007年04期)

袁春营,崔青曼,韩青动[4](2006)在《中华绒螯蟹胸神经团神经分泌细胞的显微和超显微结构观察》一文中研究指出应用光学显微镜和电子显微镜技术,研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胸神经团的神经分泌细胞,描述了其显微和超显微结构。依据细胞形态、细胞核、内分泌颗粒和细胞质的特征将胸神经团神经分泌细胞分为3种类型:Ⅰ型细胞最大,胞质中存在许多大小不同的空泡,分泌颗粒数量很少;Ⅱ型细胞中等大小,细胞器发达,分泌颗粒数量较多,形态多样;Ⅲ型细胞最小,分泌颗粒数量最多,细胞器很少。(本文来源于《动物学杂志》期刊2006年03期)

韦荣编,邱高峰,楼允东[5](2002)在《中华绒螯蟹窦腺神经末梢及X-器官神经分泌细胞的类型(英文)》一文中研究指出在电子显微镜下观察了性未成熟的中华绒螯蟹黄蟹的窦腺及X -器官的超微结构。X -器官位于眼柄神经节终髓的腹外侧 ,与窦腺位置斜相对。窦腺主要由神经分泌细胞的末梢和胶质细胞组成。神经末梢含有大量的膜结构包围的颗粒、线粒体、粗面内质网和许多电子透明的小泡 ,末梢外周有时可见指状突起。依据颗粒的大小、形状、电子致密度以及胞质特征 ,可区分出 6种类型的窦腺神经末梢及 7种X -器官神经分泌细胞。观察了末梢中神经分泌颗粒的胞吐作用方式的释放过程 ,并且尝试对窦腺不同末梢中的颗粒及X -器官神经分泌细胞中的颗粒作了比较 ,发现二者之间具有较好的对应性 ,即电子致密度无大的变化 ,形态特征相似 ,只是大小稍有增加。(本文来源于《动物学研究》期刊2002年03期)

孙金生,刘安西,贺秉军,陈家童,相建海[6](2001)在《河蟹眼柄神经分泌细胞钾离子通道的种类和特征》一文中研究指出用全细胞膜片钳技术对培养 12~ 2 4h不同形态河蟹眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经分泌细胞表达的钾离子通道进行了种类鉴别和特征研究。结果表明 :正常蟹种、 2龄成蟹和早熟河蟹眼柄MTXO中分布的A、B、C叁种类型神经分泌细胞外向钾离子通道的种类和电压特征无明显区别 ,均表达对 4 AP敏感的快速激活、快速失活的瞬时钾离子通道电流 (IA)和对TEA敏感的缓慢激活、缓慢失活的慢钾离子通道电流 (Ik)。IA和Ik 的激活电压均为 - 4 0mV ,峰值电流与胞体大小成正比 ,并随刺激电压的升高而快速增加。IA 达到峰值的平均时间为 2 5± 0 6ms ,Ik 几乎至 80ms记录结束时达到峰值。(本文来源于《动物学报》期刊2001年S1期)

孙金生,刘安西,贺秉军,陈家童,相建海[7](2001)在《不同甾醇类物质对河蟹眼柄神经分泌细胞I_(Ca)的影响》一文中研究指出采用膜片钳技术测定了不同甾醇类物质对河蟹眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经分泌细胞钙离子通道电流 (ICa)的作用 ,探讨河蟹眼柄神经肽类激素分泌和养殖河蟹性早熟的调控机制。结果表明 ,河蟹眼柄MTXO叁种类型神经分泌细胞均表达高电压激活L型钙通道 ,激活电压为 - 3 0mV ,+1 0mV达到峰值。甾醇类物质中 ,只有胆固醇对河蟹眼柄B型神经内分泌细胞的钙电流存在抑制作用 ,其作用具有浓度依赖性 ,抑制强度不随时间的延长而加强。 1 μmol L的胆固醇作用 4h可抑制B型细胞 5 0 .49%± 5 .98%的钙电流(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2001年06期)

孙金生,刘安西,陈家童,贺秉军,马维林[8](2001)在《河蟹眼柄神经分泌细胞离子通道的膜片钳研究》一文中研究指出采用全细胞膜片钳技术对培养12~24小时不同形态河蟹眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)神经分泌细胞离子通道进行了研究。结果表明 ,河蟹眼柄MTXO中分布的A、B、C叁种类型神经分泌细胞均可记录到由内向电流和外向电流组成的正常全细胞电流。内向电流由高电压激活钙离子通道电流 (ICa)和对TTX敏感钠离子通道电流 (INa)组成。ICa 的激活电压为 -30mV,在0~ +20mV电压下达到峰值 ,在 -40mV和 -70mV保持电压下记录的ICa 激活阈值、初始峰值及I -V曲线无明显差别。外向电流明显 ,幅值较大 ,包括对4-AP敏感的快速激活、快速失活钾离子通道电流 (IA)和对TEA敏感的缓慢激活、缓慢失活钾离子通道电流 (Ik)。正常蟹种、二龄成蟹和早熟蟹种MTXO神经分泌细胞均表达电压门控钠、钾、钙离子通道 ,通道电流和电压特征无明显区别。(本文来源于《生物物理学报》期刊2001年02期)

黄辉洋,李少菁,王桂忠,叶海辉[9](2001)在《锯缘青蟹脑的神经分泌细胞》一文中研究指出应用组织学方法和免疫组织化学技术研究了锯缘青蟹脑的神经分泌细胞的种类与分布 .依据细胞形态、细胞核、细胞质的特征 ,将脑神经分泌细胞分为 4种类型 ,并绘制了神经分泌细胞的分布示意图(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊2001年03期)

陈恒,姜建明,秦国强,从默[10](2000)在《鲫鱼尾部神经分泌系统Dahlgren细胞酶计量的季节性变化研究》一文中研究指出用光镜和彩色图象分析系统研究了雌性鲫鱼尾部神经分泌系统Dahlgren细胞酶细胞化学的季节性变化特点 ,发现尾部倒数第 4~ 6节脊髓中Dahlgren细胞的细胞色素氧化酶活性变化与蛋白质含量变化基本一致 (仅春夏间无明显变化 ) .但乙酰胆碱脂酶的活性变化与细胞色素氧化酶的变化却相反 .上述Dahlgren细胞酶计量学的变化均不同程度地呈现出与卵巢同步发育的关系 ,为鱼类尾部神经分泌系统与鱼类繁殖生物学的相关性提供了新的计量学依据(本文来源于《南京大学学报(自然科学版)》期刊2000年05期)

神经分泌细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

一、研究背景及目的大脑多巴胺神经营养因子(Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor, CDNF),是一种新发现的进化保守的蛋白,在大鼠帕金森病动物模型中,大脑多巴胺神经营养因子CDNF是一种潜在的能够保护和恢复多巴胺能神经元的功能的关键治疗蛋白。CDNF在包括大脑皮层,海马,黑质,纹状体和中脑等多个脑区的神经元中广泛表达。人的CDNF可以糖基化,并从瞬时转染细胞中分泌,然而,目前CDNF分泌的调控机制还不清楚。作为一个新发现的神经营养因子,关于CDNF运输和分泌的一些基本问题还没有解决。首先,CDNF是怎么分泌的,是通过组成型分泌途径还是调节型分泌途径?主要通过哪条途径?第二,CDNF蛋白合成中发生什么类型的糖基化?N-连接的糖基化还是O-连接的糖基化?糖基化是否影响CDNF蛋白的运输和分泌?最后,人们已经知道人的CDNF没有前原序列,但是在CDNF蛋白中是否存在能够影响胞内运输和分泌的一些结构域。二、实验方法1.各种表达质粒的构建2.测定过表达的CDNF在PC12及HEK293细胞中的分泌3. CDNF在大鼠海马神经元及PC12细胞中的免疫荧光细胞化学染色4.利用alanine-scanning技术,寻找关键氨基酸5.在PC12细胞中各种突变体与内质网和高尔基体标志物的共定位检测6.COS-7细胞中CDNF的运输情况检测7.在PC12细胞中各突变体与分泌囊泡标志物的共定位检测叁、实验结果1、CDNF在神经分泌型细胞中的分布与分泌情况为了检测CDNF在细胞中的定位和分布情况,我们构建了带有C-末端HA标签的人类CDNF cDNA的真核表达质粒(pcDNA3.1-HA-hCDNF)。然后通过Western Blot方法,证实CDNF即通过组成型分泌途径又通过调节型分泌途径,并且主要通过调节型分泌途径分泌。利用HA标签免疫荧光化学染色方法,我们发现CDNF在海马神经元和分化的PC12细胞的胞体和突起中均有点状分布。2、证实CDNF的糖基化不影响它的分泌我们构建了影响CDNF的N-连接糖基化和O-连接糖基化的点突变的突变体:N57A(57位N-连接糖基化位点N突变为A)和T181A(181位O-连接糖基化位点T突变为A),通过Western Blot的方法证明在HEK293细胞中破坏CDNF的N-连接糖基化,不影响CDNF的组成型分泌。随后,我们发现在PC12细胞中不发生CDNF的N-连接糖基化,因此我们构建了抑制O-连接糖基化的突变体T181A,并证明破坏CDNF在PC12细胞中的O-连接糖基化不影响CDNF的分泌。3、探索CDNF中调控其分泌的关键区域通过在α-Helix中插入脯氨酸破坏α-Helix结构,我们构建了一系列CDNF的突变体。通过Western Blot的方法证明,破坏第一个α-Helix (M1)会影响CDNF的组成型和调节型分泌,然而,破坏第七个α-Helix (M7)只影响CDNF的调节型分泌。其它突变体不影响CDNF的分泌。利用免疫荧光细胞化学染色方法,发现M1在分化的PC12细胞中的分布出现异常(M1更多聚集在胞体而很少在突起分布),但是,跟Wt相比M7的分布无明显变化。为了排除插入脯氨酸对蛋白的整体空间结构的影响,我们利用alanine-scanning技术构建一系列突变体,发现41-48氨基酸序列在CDNF的分泌中发挥重要作用。4, CDNF分泌运输缺陷的关键步骤鉴定利用免疫荧光细胞化学染色方法,我们发现M7与Wt与内质网标志物共定位情况无明显区别。与Wt和M7相比,M1与内质网标志物calnexin有更多的共定位,然而通过研究它们与高尔基体的标志物TGN38的共定位证实:跟Wt与M7相比,仅有很少部分的M1与TGN38共定位。为了进一步证实M1不能有效地从内质网运输到高尔基体,我们利用一种带荧光的温度敏感蛋白pEGFP-VSVG,在COS-7细胞中利用免疫荧光细胞化学染色方法发现,当温度从39.5℃C降到20℃C时,部分Wt-CDNF和M7聚集到高尔基体。但是跟Wt,M7和VSVG不同,在20℃C时M1不能有效聚集到高尔基体。5、M7不能有效地分选到调节型分泌途径我们推测M7的分泌异常可能是由于Golgi以后的运输出现了问题,因此检测了M7与一种分泌囊泡的标志物Secll的共定位,与Wt跟Secll的共定位不同,M1和M7跟Secll的共定位都很少。四、实验结论在PC12细胞中,CDNF主要通过调节型分泌途径分泌,CDNF的糖基化不影响它的分泌。并且发现影响CDNF分泌的两个关键区域:当破坏Helix-1,组成型分泌和调节型分泌都降低,并且Helix-1突变体在内质网聚集;当破坏Helix-7,组成型分泌不受影响只有调节型分泌减少。并且Helix-7突变体与分泌囊泡标志物的共定位减少。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

神经分泌细胞论文参考文献

[1].伍校琼,罗明英,朱武,杨宝林,罗华.神经分泌素对体外培养血管平滑肌细胞VCAM、MCP-1和Ki67表达的影响[J].中国临床解剖学杂志.2012

[2].孙宗鹏.大脑多巴胺神经营养因子在神经分泌细胞中的运输和分泌[D].山东大学.2011

[3].赵景霞,孙金生,张子怡.中华绒螯蟹眼柄端髓X器官神经分泌细胞钙激活钾通道研究[J].水产学报.2007

[4].袁春营,崔青曼,韩青动.中华绒螯蟹胸神经团神经分泌细胞的显微和超显微结构观察[J].动物学杂志.2006

[5].韦荣编,邱高峰,楼允东.中华绒螯蟹窦腺神经末梢及X-器官神经分泌细胞的类型(英文)[J].动物学研究.2002

[6].孙金生,刘安西,贺秉军,陈家童,相建海.河蟹眼柄神经分泌细胞钾离子通道的种类和特征[J].动物学报.2001

[7].孙金生,刘安西,贺秉军,陈家童,相建海.不同甾醇类物质对河蟹眼柄神经分泌细胞I_(Ca)的影响[J].海洋与湖沼.2001

[8].孙金生,刘安西,陈家童,贺秉军,马维林.河蟹眼柄神经分泌细胞离子通道的膜片钳研究[J].生物物理学报.2001

[9].黄辉洋,李少菁,王桂忠,叶海辉.锯缘青蟹脑的神经分泌细胞[J].厦门大学学报(自然科学版).2001

[10].陈恒,姜建明,秦国强,从默.鲫鱼尾部神经分泌系统Dahlgren细胞酶计量的季节性变化研究[J].南京大学学报(自然科学版).2000

论文知识图

贴壁2d后在诱导液中形成的脂肪细胞F...胞‐1‐3NPY‐pH胞外给予的luorin报告...‐1突触囊泡cellularlocalentr...各组NGF和BDNF表达的情况神经递质的信息传递Fig.1-1Chemicalt...神经分泌细胞分泌颗粒及线粒体...

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