DPP-4抑制剂高产菌株的筛选、鉴定及发酵特性

DPP-4抑制剂高产菌株的筛选、鉴定及发酵特性

论文摘要

目的:高产DPP-4抑制剂发酵菌株的筛选,并对菌株进行鉴定以及发酵特性的研究。方法:采用逐级稀释法从江南传统发酵食品中,利用DPP-4抑制剂体外筛选模型,筛选具有DPP-4抑制活性的菌株,以及通过形态学、生理生化和16S rRNA基因,对菌株进行观察、分析和序列比对,确定其种属关系。在以DPP-4抑制活性为指标下,通过与其他乳酸菌的比较、不同培养介质的选择、在脱脂乳(SKM)培养基中发酵条件的优化和发酵特性等。结果:从江南传统酸豆角汁中,在分离纯化得到11株具有乳蛋白水解能力的菌株中,经形态学、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析,筛选得到一株多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) BD3736。P.polymyxa BD3736以10%(W/V)脱脂乳(SKM)为培养基,厌氧培养2 d所得的发酵乳,对DPP-4抑制率为66.4%±2.9%,其抑制活性远大于乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属等。P.polymyxa BD3736在10%(W/V) SKM液体培养基中,在30℃、180 r/min培养条件下,培养12 h时活菌数达到峰值为1.05×109CFU/mL,培养36 h时发酵体系的pH为5.58。在同等发酵条件下,P. polymyxa BD3736发酵2 d的发酵液上清,对DPP-4的抑制率为90.6%±2.6%,IC50值为(14.2±2.0) mg/m L。本研究为后续进一步开发新型、副作用低的口服降糖药物或功能性食品配料提供理论指导和技术支持。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 培养基的制备
  •       1.2.1. 1 分离培养基
  •       1.2.1. 2 2%(W/V)脱脂乳(SKM)琼脂平板
  •       1.2.1. 3 LB液体培养基
  •     1.2.2 菌株分离和纯化
  •     1.2.3 发酵种子液的制备
  •     1.2.4具有DPP-4抑制活性菌株的筛选
  •     1.2.5 菌株鉴定
  •       1.2.5. 1 形态学分析
  •       1.2.5. 2 生理生化特征分析
  •       1.2.5. 3 菌株的分子生物学鉴定
  •     1.2.6 P.polymyxa BD3736的发酵特性
  •       1.2.6. 1 不同乳酸菌的发酵乳对DPP-4的抑制活性
  •       1.2.6. 2 P.polymyxa BD3736在不同培养介质中对DPP-4的抑制活性
  •       1.2.6. 3 不同发酵条件对P.polymyxa
  •       1.2.6. 4 P.polymyxa BD3736在SKM培养基中p H和活菌数的变化
  •     1.2.7 DPP-4抑制活性及IC50值测定
  •   1.3 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 具有DPP-4抑制活性菌株的筛选
  •   2.2 菌株BD3736鉴定结果
  •     2.2.1 形态学特征
  •     2.2.2 生理生化特征
  •     2.2.3 菌株BD3736基因序列分析结果
  •   2.3 P.polymyxa BD3736与其他乳酸菌的比较
  •   2.4 P.polymyxa D3736在不同培养介质中产DPP-4抑制活性
  •   2.5 发酵条件对P.polymyxa BD3736的DPP-4抑制活性影响
  •   2.6 P.polymyxa BD3736在SKM培养基中的生长情况
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 冯华峰

    关键词: 抑制剂,多粘类芽孢杆菌,发酵脱脂乳,发酵特性

    来源: 食品工业科技 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 光明乳业股份有限公司乳业研究院上海乳业生物工程技术研究中心乳业生物技术国家重点实验室

    基金: 上海乳业生物工程技术研究中心能力提升项目(16DZ2280600)

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.23.014

    页码: 81-87

    总页数: 7

    文件大小: 1646K

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