HAND2对脑微血管发育阶段周细胞增殖和迁移的影响

论文摘要

目的探讨人脑原代微血管周细胞（HBVPs）和人肾脏原代微血管周细胞（HRVPs）差异表达基因及其对脑微血管周细胞迁移和增殖功能的影响。方法利用RNA-seq检测对HBVPs和HRVPs进行转录组测序,qPCR及Western blot检测HAND2 mRNA及蛋白水平,构建HAND2基因的sh-RNA下调脑微血管周细胞HAND2表达,分别利用CCK-8检测HBVPs增殖活性和Transwell小室迁移实验检测迁移能力。结果 RNA-seq检测结果显示胚胎期HBVPs相对HRVPs有1 906个高表达基因,进一步的聚类分析发现这些基因可显著地聚类为4类功能富集的亚群;与血管发育密切相关的第Ⅱ群中HAND2在HBVPs中显著高表达(lg2FoldChange=11.93,P<0.05)。此外,qPCR和/或Western blot检测发现在小鼠胚胎第10.5天HAND2表达量较高,在第14.5天时最高,出生后几乎不表达（P<0.05）,并且HAND2主要表达在HBVPs（P<0.05）。当sh-RNA下调HBVPs的HAND2表达后,发现其在24 h时迁移能力增强（P<0.05）,48 h和72 h时增殖活性显著增加（P<0.05）。结论 HAND2对胚胎脑微血管发育和成熟期周细胞的增殖和迁移能力具有重要的调控作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞培养
•   1.2转录组测序
•   1.3 HAND2 sh-RNA制备与鉴定
•   1.4 CCK-8检测细胞活性
•   1.5 Transwell小室迁移实验
•   1.6 q-PCR
•   1.7 Western blot
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 HAND2在脑微血管周细胞中表达显著高于肾微血管周细胞
•   2.2 HAND2主要在脑微血管周细胞中表达
•   2.3 HAND2在小鼠脑微血管不同发育阶段的表达变化特征
•   2.4 下调HAND2后对HBVPs增殖和迁移功能的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 龚昌雄,张钦,黄嘉诚,杨国强,袁俊杰,熊小檍,李芳菲,杨清武

关键词: 周细胞,转录组测序,增殖,迁移

来源: 免疫学杂志 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 陆军军医大学第二附属医院神经内科

基金: 国家杰出青年科学基金(81525008)

分类号: R338

DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20190032

页码: 200-206

总页数: 7

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