苹果酸乳酸酶基因论文_董华,刘天明,吴克学

导读:本文包含了苹果酸乳酸酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:苹果酸,乳酸,基因,球菌,酒类,论文,MLE。

苹果酸乳酸酶基因论文文献综述

董华,刘天明,吴克学[1](2006)在《乳酸乳球菌苹果酸-乳酸酶基因的克隆》一文中研究指出用酚抽提的方法提取乳酸乳球菌的基因组DNA,利用PCR方法从乳酸菌的基因组DNA中扩增出含有苹果酸-乳酸酶基因(malolactic enzyme gene,mle)的约1.6kb的DNA片断,用1%的琼脂糖凝胶分离扩增的片断,用试剂盒回收目的基因。将回收的目的基因与pGEM-T载体连接构建mle-T载体并转化大肠杆菌DH5a,挑取阳性克隆(白色菌落),酶切鉴定并测序。SalI酶切mle-T,回收mle DNA片断,与表达载体pET-28a载体连接,构建细菌Escherichia coli表达载体。(本文来源于《生物技术通报》期刊2006年05期)

刘延琳,蒋思欣,何秀萍,李华,张博润[2](2005)在《Oenococcusoeni苹果酸-乳酸酶基因克隆及其在酿酒酵母中的表达》一文中研究指出苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶。在进行酒酒球菌SD2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒并转化酿酒酵母YS58。酵母转化子用SD/Ura平板筛选鉴定。斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDSPAGE检测表明获得的转化子表达了约60kDa的目标蛋白。获得的转化子在添加了L苹果酸的培养基中培养4d;取培养液上清用HPLC检测L苹果酸及L乳酸含量,采用t检验进行差异显着性分析,结果表明mleA基因进行了功能性的表达,将L苹果酸转化成L乳酸,L苹果酸和L乳酸含量分别与对照差异极显着和显着,苹果酸的相对降低率平均为20.95%。在有选择压力条件下,重组质粒相对稳定,而在无选择压力条件下,传代培养10d后大约有65%的重组质粒丢失。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2005年12期)

董华,刘天明,吴克学[3](2005)在《苹果酸—乳酸酶基因的研究进展》一文中研究指出近年来,随着分子生物学技术的飞速发展和对苹果酸-乳酸酶(MLE)基因的深入研究,使得苹果酸-乳酸工程菌的构建成为可能。简要阐述了国内外对MLE最新的研究进展。(本文来源于《农产品加工(学刊)》期刊2005年08期)

刘延琳,蒋思欣,李华,何秀萍,张博润[4](2004)在《酒酒球菌苹果酸-乳酸酶基因的测序及分析》一文中研究指出苹果酸乳酸酶是乳酸菌进行苹果酸乳酸发酵(MLF)的关键酶。以携带酒酒球菌(Oenococcusoeni)优良菌系OenococcusoeniSD2a的苹果酸乳酸酶基因mleA的重组质粒pLmleA作为测序质粒,进行测序分析。测序结果表明,克隆到的mleA基因序列与已报道的序列同源性为99%。mleA基因序列中有2个碱基与报道不同,其中1614碱基的改变导致错意突变,编码的氨基酸由报道的Asp变为Glu,这一改变使得原有的BamHI位点不再存在。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2004年06期)

张春晖,夏双梅,刘天明[5](2003)在《酒类酒球菌苹果酸乳酸酶基因的克隆》一文中研究指出利用PCR方法从酒类酒球菌 (Oenococcusoeni)基因组中扩增出 6 5 1bp的DNA片段 ,将之克隆到pUC19 T载体上并转化大肠杆菌 (E .coli)JM10 9菌株。重组质粒的测序结果表明 ,克隆到了苹果酸 乳酸酶基因 (mle) ,它含有 5 2 7bp的阅读框架 ,其核苷酸序列与文献报道相同。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2003年03期)

苹果酸乳酸酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶。在进行酒酒球菌SD2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒并转化酿酒酵母YS58。酵母转化子用SD/Ura平板筛选鉴定。斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDSPAGE检测表明获得的转化子表达了约60kDa的目标蛋白。获得的转化子在添加了L苹果酸的培养基中培养4d;取培养液上清用HPLC检测L苹果酸及L乳酸含量,采用t检验进行差异显着性分析,结果表明mleA基因进行了功能性的表达,将L苹果酸转化成L乳酸,L苹果酸和L乳酸含量分别与对照差异极显着和显着,苹果酸的相对降低率平均为20.95%。在有选择压力条件下,重组质粒相对稳定,而在无选择压力条件下,传代培养10d后大约有65%的重组质粒丢失。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

苹果酸乳酸酶基因论文参考文献

[1].董华,刘天明,吴克学.乳酸乳球菌苹果酸-乳酸酶基因的克隆[J].生物技术通报.2006

[2].刘延琳,蒋思欣,何秀萍,李华,张博润.Oenococcusoeni苹果酸-乳酸酶基因克隆及其在酿酒酵母中的表达[J].中国生物工程杂志.2005

[3].董华,刘天明,吴克学.苹果酸—乳酸酶基因的研究进展[J].农产品加工(学刊).2005

[4].刘延琳,蒋思欣,李华,何秀萍,张博润.酒酒球菌苹果酸-乳酸酶基因的测序及分析[J].微生物学杂志.2004

[5].张春晖,夏双梅,刘天明.酒类酒球菌苹果酸乳酸酶基因的克隆[J].微生物学杂志.2003

论文知识图

O.oen-iSD-2a苹果酸-乳酸酶基因的核苷...重组质位mk一丁酶切电泳图渭以CTAB(A),溶菌t}(B)法所提DNA为模板的...葡萄酒酵母和融合子F-20-7质粒DNAMle...转化子Y SA质粒稳定性PCR扩建产物的酶切分析

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