轮环藤碱对小胶质细胞活化的抑制作用研究

论文摘要

考察了轮环藤碱对脂多糖（LPS）诱导小胶质细胞过度活化的抑制作用.培养BV2小鼠小胶质细胞系,以脂多糖（1μg/mL）激活小胶质细胞,同时给予不同浓度的轮环藤碱（0.1～10μmol/L）处理细胞,以四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞存活率,Griess法测定细胞释放一氧化氮（NO）水平,酶联免疫吸附分析实验（ELISA）检测细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）的水平.进一步在无细胞体系中考察了轮环藤碱对NO的直接清除能力;以及对DPPH、羟自由基（·OH）、过氧亚硝酸根离子自由基（ONOO-）和超氧阴离子（·O2-）自由基的清除作用.结果表明,轮环藤碱可显著抑制LPS激活的小胶质细胞释放NO及三种炎症因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）,且对细胞存活率无明显影响;此外,轮环藤碱对NO、DPPH、·OH、ONOO-和·O2-自由基均具有显著清除能力.综上,轮环藤碱可能对小胶质细胞过度激活引起的神经炎性相关疾病具有潜在的防治作用.

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 细胞培养和药物配制
•       1.3.1.1 小胶质细胞培养
•       1.3.1.2 药物配制
•     1.3.2 小胶质细胞存活率的测定-MTT法
•     1.3.3 小胶质细胞释放NO水平的测定-Griess法
•     1.3.4 小胶质细胞释放炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的测定-ELISA法
•     1.3.5 轮环藤碱对NO清除作用的测定-硝普钠法
•     1.3.6 轮环藤碱对自由基清除能力的测定
•       1.3.6.1 DPPH自由基清除能力的测定
•       1.3.6.2 羟自由基（·OH）清除能力的测定-水杨酸法
•       1.3.6.3 过氧亚硝酸根离子自由基（ONOO-）清除能力的测定-L-酪氨酸法
•       1.3.6.4 超氧阴离子（·O-2）清除能力的测定-邻苯三酚自氧法
•     1.3.7 统计学处理
• 2 结果与分析
•   2.1 轮环藤碱对小胶质细胞存活率的影响
•   2.2 轮环藤碱对过度活化的小胶质细胞释放NO的影响
•   2.3 轮环藤碱对过度活化的小胶质细胞释放IL-6、IL-1β和TNF-α的影响
•   2.4 轮环藤碱对NO的清除作用
•   2.5 轮环藤碱对DPPH、·OH、ONOO-和·O-2自由基的清除作用
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孟雪莲,苟江敏,赵艺淼,刘佳,郑良超,吕晶,王丹,陈长兰

关键词: 轮环藤碱,小胶质细胞活化,脂多糖,一氧化氮,炎症因子

来源: 辽宁大学学报(自然科学版) 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 辽宁大学药学院,辽宁省天然产物制药工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金项目(81503085),辽宁省科技厅自然科学基金项目(20180551168),辽宁大学“大学生创新创业训练计划”项目(x201810140295)

分类号: R285.5

DOI: 10.16197/j.cnki.lnunse.2019.04.004

页码: 306-313

总页数: 8

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