鱼类Ⅲ型Myosin基因家族成员的表达和功能研究

论文摘要

Ⅲ型Myosin蛋白在哺乳动物的听觉毛细胞中发挥重要功能,其突变可导致内耳毛细胞功能异常,引起听力丧失,但在鱼类胚胎中的表达及功能仍不清楚。本研究以斑马鱼（Danio rerio）作为研究对象,研究了Ⅲ型Myosin基因家族成员myo3a及myo3b在斑马鱼早期胚胎中的表达及功能。整胚原位杂交结果显示:myo3a及myo3b在早期10体节前均无明显表达;在受精后24 h胚胎中,myo3a基因的表达主要集中在脑部,并在端脑及间脑部位有强烈表达;而myo3b的表达主要集中在神经管腹部神经元细胞中。进一步双荧光原位杂交染色结果显示,myo3b主要在神经管腹部脑脊液接触神经元（CSF-cNs）中表达。此外,与人及小鼠类似,斑马鱼myo3a及myo3b基因在内耳中均有表达,暗示其功能在内耳发育中的保守性。为进一步研究其功能,本研究利用CRISPR/Cas9技术对myo3a和myo3b基因进行敲除,获得了相应的突变体。对突变体的初步研究表明,myo3a和myo3b的单独缺失对斑马鱼的内耳毛细胞以及神经管的发育均无显著影响,而双突变胚胎出现眼睛变小,鱼鳔不能形成以及毛细胞纤毛变短等表型,表明Ⅲ型Myosin基因家族在斑马鱼的胚胎发育中发挥一定的功能。

论文目录

• 1. 材料与方法
•   1.1 斑马鱼饲养
•   1.2 整胚原位杂交实验
•   1.3 基因敲除及突变体筛选
•   1.4 免疫组化
• 2 结果
•   2.1 整胚原位杂交揭示myo3a和myo3b的时空表达模式
•   2.2 myo3b的基因敲除及突变体表型分析
•   2.3 myo3a的基因敲除及突变体表型分析
•   2.4 myo3a和myo3b双突变的表型分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵呈天,陈哲,冯东

关键词: 斑马鱼,内耳,毛细胞,脑脊液接触神经元

来源: 中国海洋大学学报(自然科学版) 2019年10期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所

基金: 国家自然科学基金项目(31772456)资助~~

分类号: Q958.8

DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20190206

页码: 126-132

总页数: 7

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