论文摘要
目的探讨TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)在MG-63细胞成骨分化过程中的作用及可能机制。方法将表达抑制TIEG1基因的shRNA质粒用Lipofectamine2000转染到MG-63细胞中,筛选出稳定表达shRNA细胞株即MG-63/TIEG1 KD细胞。用实时定量PCR法和Western blotting法检测MG-63/TIEG1 KD细胞与正常MG-63(MG-63/WT)细胞TIEG1基因及蛋白表达,以验证TIEG1的敲减效果。用成骨分化培养液诱导MG-63/WT及MG-63/TIEG1 KD细胞分化4周,检测两种细胞碱性磷酸酶(ALP)分泌活性及形成的矿化结节,比较二者分化矿化能力的差异。之后将两种细胞用成骨分化培养液培养7 d后收集细胞,实时定量PCR法、Western blotting法检测成骨分化标志物Runx2及Wnt信号通路下游核心分子β-catenin表达;免疫荧光观察β-catenin蛋白表达情况及细胞定位。结果建立了稳定TIEG1敲减的细胞株MG-63/TIEG1 KD,其TIEG1 mRNA和蛋白表达量低于MG-63/WT细胞(P均<0.05)。诱导分化后,MG-63/TIEG1 KD的ALP分泌活性及矿化结节形成能力均低于MG-63/WT细胞(P均<0.05),其Runx2、β-catenin的mRNA及蛋白表达量均低于MG-63/WT细胞(P均<0.05)。结论 TIEG1通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进MG-63成骨分化及矿化形成能力。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 延育强,唐蓉,刘小溪,高博宇,殷霄
关键词: 成骨分化,细胞,诱导早期基因,信号通路,碱性磷酸酶
来源: 山东医药 2019年34期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学
单位: 西安交通大学医学院附属西安市中心医院,榆林市中医医院
分类号: Q254
页码: 38-41
总页数: 4
文件大小: 172K
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