导读:本文包含了重组人血清白蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白蛋白,血清,蛋白,干扰素,乙醇,分离法,复性。
重组人血清白蛋白论文文献综述
张娜,杜莹莹,李月,常早荣,薛冲[1]（2019）在《重组人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白中聚乙二醇1500残余量测定方法研究》一文中研究指出目的:探讨重组人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白中聚乙二醇1500(PEG1500)残留量的检测方法。方法:选择3个不同批次重组人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白原液作为供试品,采用聚乙二醇残余量测定法,参照药品质量标准分析方法验证指导原则,分别设计专属性、线性范围、准确性、精密性、定量限实验进行测定。结果:该实验方法专属性、准确性、精密度及5.05～50.50μg/mL范围的线性关系良好,定量限为1.94μg/mL。结论:该实验方法用于人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白原液的PEG1500残余量检测,结果准确、可靠。(本文来源于《长治医学院学报》期刊2019年05期）
余谦,王勇,钱小红,秦伟捷,张普民[2]（2019）在《一种转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化新方法》一文中研究指出基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热乙醇沉淀法可从猪血浆中获得rHSA粗提取液,此时rHSA的纯度可达69.5%,回收率达51.3%。进一步采用多级色谱分离法,即阴离子交换色谱和反相色谱法进一步纯化,得到rHSA的最终纯度约为100.0%,总回收率为41.1%。该方法为从转基因猪血浆中大规模纯化用于临床和生化研究的高纯度rHSA提供可能,同时也为rHSA替代HSA奠定了基础。(本文来源于《分析测试学报》期刊2019年05期）
彭榜娅[3]（2019）在《重组凝血因子Ⅻ的构建及功能鉴定和两种新型抗凝药与人血清白蛋白结合位点初探》一文中研究指出目的:利用毕赤酵母系统表达活性凝血因子Ⅻ催化结构域(Coagulation factor XII-Serine protease domain,FXII-SPD)及其功能鉴定。方法:蛋白质数据库中查询凝血因子Ⅻ催化结构域的cDNA序列并按照该序列合成,通过XhoI和SalI双酶切位点插入到pPICZαA质粒载体上,电转导入到感受态毕赤酵母X33菌株中进行表达。表达的重组蛋白用镍离子金属螯合亲和层析进行初步纯化,然后用分子排阻层析进一步纯化,用蛋白免疫印迹和高效液相色谱-质谱鉴定目的蛋白的表达情况,再进一步测定与其特异性生色底物S-2302的米氏常数来分析目的蛋白的活性,并检测其对血液中凝血过程的影响。结果:利用巴斯德毕赤酵母系统能表达rFXII-SPD(Recombinat coagulation factor XII-Serine protease domain,rFXII-SPD),表达量可达20mg/L;提取的rFXII-SPD纯度较高,未见其他杂带;表达的rFXII-SPD在体外具有酰胺分解活性和可以加速血浆中凝块形成。结论:1.在巴斯德毕赤酵母系统中顺利表达了rFXII-SPD蛋白。2.成功使用Ni ~(2+)-NTA亲和层析以及凝胶过滤方法纯化了表达的rFXII-SPD蛋白,提取的rFXII-SPD纯度较高。3.rFXII-SPD蛋白具有体外酰胺分解活性和促进凝血发生的作用。目的:初步探测人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)与两种新型抗凝药物(利伐沙班和阿加曲班)的结合位点。方法:1.制备HSA-新型抗凝药物(阿加曲班;利伐沙班)复合物并生长HSA-新型抗凝药物复合物晶体。2.用浸泡方法获取HSA-新型抗凝药物的二元复合物晶体,先生长单独的HSA晶体,将HSA晶体浸泡于含新型抗凝药物的池液中,使药物通过扩散进入到HSA晶体中,以形成HSA-新型抗凝药物复合物晶体。3.将获得的HSA-新型抗凝药物二元复合物晶体送去上海光源同步辐射中心进行X-ray衍射实验。4.解析HSA-新型抗凝药物复合物晶体结构。(1)构建模型:获得原始晶体数据后,采用CCP4的molrep程序,以PDB数据库中的HSA晶体结构为模板,运用快速旋转和平移函数寻找正确的原子模型。(2)修正结构:获得适合的模型后,采用Refmac和CNS以及p Henix程序对其进行修正,并确定抗凝药物的位置。(3)精修结构:一旦获得电子密度图和合适的坐标文件,再使用Coot和PyMOL程序对结构进行精修。结果:1.人血清白蛋白-阿加曲班二元复合物的结晶条件:31%~35%PEG3350,p H7.4 PB,H_2O。2.人血清白蛋白-利伐沙班二元复合物的结晶条件:31%~35%PEG3350,p H7.4 PB,H_2O。3.对收集到的人血清白蛋白-阿加曲班、人血清白蛋白-利伐沙班二元复合物共晶的结构数据进行解析,发现人血清白蛋白某些氨基酸附近有利伐沙班和阿加曲班电子云密度。结论:电子云密度提示,阿加曲班和利伐沙班可能与人血清白蛋白有结合。(本文来源于《遵义医科大学》期刊2019-05-01）
余谦[4]（2019）在《转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化方法研究》一文中研究指出目前,人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)由人血液提取,由于来源有限满足市场的需求,且人血来源极其复杂,可能存在血源污染等潜在威胁,因此,迫切需要一种安全可靠、成本相对低廉的HSA替代品。基于快速发展的基因重组技术,可利用该技术来生产重组人血清白蛋白(recombinant human serum albumin,rHSA),由于该技术能够克服传统方法存在的血源供应不足以及血源污染等缺陷,目前已经成为研究和生产rHSA的重点技术。由于临床用药和生化研究对转基因猪血中分离纯化出的rHSA的要求较高,因此,如何分离纯化rHSA成为研究是关键。本研究中建立了一种从猪血中获得高纯度和高收率的rHSA分离纯化方法,为规模化的制备rHSA奠定基础。本文由四章组成。第一章前言部分对HSA和rHSA进行了概述,简单介绍了几种常见的白蛋白的纯化方法,并提出了本课题的研究目标与意义。第二章,首先采用低温乙醇沉淀法的改良方法—热乙醇沉淀法对猪血浆中rHSA进行粗提取。我们考察并优化了热乙醇沉淀法中反应体系pH、加热温度、恒温反应时间和稀释倍数等主要影响因素对rHSA提取效果的影响。由反相高效液相色谱色谱(RP-HPLC)纯度表征结果可知,在pH6.5,65℃、40 min以及2倍稀释倍数的最优反应条件下,rHSA纯度从猪血浆中的9.3%提高到热乙醇沉淀法的69.5%。第叁章,我们考察了阳离子、阴离子、阳-阴离子相结合和阴-阳离子交换色谱相结合的方法对热乙醇沉淀粗纯化后rHSA进行精纯化的效果,并对色谱条件进行优化。结果表明采用阴离子交换色谱法,对热乙醇沉淀法粗纯化的rHSA进行精纯化,能达到最佳的纯化效果,所得产物经RP-HPLC纯度表征结果为85.0%。第四章,为了进一步提高纯度,采用两种路线(反相色谱(路线一)和凝胶色谱法(路线二))对阴离子交换色谱法纯化后的rHSA进行二次精纯化。RP-HPLC表征结果,反相色谱和凝胶色谱法的产物纯度均达到了100.0%。经HPLC-MS/MS表征,两种路线得到产物的纯度分别约为97.33%和93.77%,总回收率分别约为41.1%和38.6%。尽管热乙醇沉淀-阴离子-反相色谱(路线一)的纯度和回收率相对于热乙醇沉淀-阴离子-凝胶色谱法(路线二)均较高,但反相色谱的流动相中有机溶剂可能会导致目标蛋白发生变性,可能会破环蛋白的结构从而限制了此纯化路线的应用;而凝胶色谱法采用的是低浓度盐缓冲液,条件更加温和,利于保持蛋白在纯化过程中的稳定,更适用于rHSA的纯化,因此最终采用路线二作为最终转基因猪血中rHSA的纯化方案。所建立的方法有望从转基因猪血中提取出高纯度rHSA,以实现其更广泛的应用。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-08）
武福军,杜莹莹,张娜,李月,赵洪亮[5]（2018）在《注射用重组人血清白蛋白与干扰素α2b融合蛋白稳定性研究》一文中研究指出目的考察制品注射用重组人血清白蛋白与干扰素α2b融合蛋白的稳定性。方法按照《中国药典》2015年叁部的方法进行检测,影响因素试验[(42±2)℃高温试验、(4 500±500)Lx强光照射试验、90%高湿试验]、加速试验(37℃加速试验与25℃加速试验)及长期稳定性试验,方法均按照《生物制品稳定性研究技术指导原则》进行。结果影响因素试验、加速试验及长期试验结果显示,温度对于本制品的纯度有一定的影响,随着试验温度越高,制品纯度变化越快,保存时间越短;湿度对制品的水分也有影响,其他指标相对稳定;通过长期稳定性考察发现,制品的试验样品在2~8℃密闭储存条件下保存24个月是相对稳定的,且各项考察指标均符合质量检定标准。结论本制品注射用重组人血清蛋白与干扰素α2b融合蛋白在2~8℃密闭储存条件下保存24个月,各项考察指标保持稳定,且均符合质量检定标准。(本文来源于《中国药学杂志》期刊2018年15期）
刘涛燕,崔魏,李弘夏,吴福建,兰峰[6]（2018）在《重组人血清白蛋白体外诱导干细胞向心肌细胞的分化》一文中研究指出目的探讨植物源重组人血清白蛋白能否替代传统B27细胞培养添加剂作为基础培养基分化人多潜能干细胞为心肌细胞。方法人多潜能干细胞以1.2×10~4个/cm~2的细胞密度接种,汇合度达至75%后采用含有0、50、100、200 g/L不同浓度植物源重组人血清白蛋白的分化培养基对其进行诱导分化,在光学显微镜和荧光显微镜下记录干细胞向心肌分化的全过程。用流式细胞仪检测不同浓度植物源人血清重组白蛋白心肌细胞的分化效率。用免疫荧光染色检测心肌细胞特异性标志物α-辅肌动蛋白(α-actinin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT);用电镜观察人多潜能干细胞来源心肌细胞的超显微结构以及心肌细胞对药物的反应。结果大量的自发跳动心肌细胞在诱导分化第9 d左右出现,浓度为200 g/L的重组人血清白蛋白配成的心肌分化液的分化效率达60.4%;跳动心肌细胞α-actinin和cTnT染色阳性,超显微结构有肌丝的存在,且对异丙肾上腺素和维拉帕米呈剂量依赖性。结论利用成分明确的、无动物源性的方法在体外诱导人多潜能干细胞分化为心肌细胞,分化效率达60.4%,分化方法简单且低成本,可作为临床级别使用。(本文来源于《中国胸心血管外科临床杂志》期刊2018年07期）
胡娜（Naghmeh,Abiri）[7]（2018）在《重组人血清白蛋白及其残留HCP的免疫原性和水稻人源化糖苷修饰研究》一文中研究指出水稻是高度自花授粉的作物,由于它不含有任何有害成分,因此是美国联邦食品药品管理局(FDA)公认的安全(General recognized as safe,GRAS)植物。已经证明水稻胚乳作为生物反应器生产医用蛋白闩具有成本低、提取纯化工艺简单、规模化容易、安全性好等优势,因此它可以成为重组蛋白质药物的最好平台之一。虽然植物技术平台相对于微生物和动物细胞技术平台具有较多的优势,但利用植物生物反应器生产医药产品(plant-made pharmaceutical,PMP)的植物源生物药物的安全性较为关注。通常,影响生物药物的安全性主要来源于与宿主相关、药物相关和加工相关杂质,由于植物细胞的重组蛋白的糖苷修饰与人类具有相似的糖骨架,但在岩藻糖和木糖的修饰存在差异,因此植物糖修饰的免疫原性成为与药物相关的杂质,是水稻胚乳细胞生产生物医药的关键因子之一。现有研究结果表明水稻胚乳表达OsrHSA具有高效、稳定和经济有效,水稻种子中蛋白N-糖基化模式较为简单。由于不同的蛋白质表达系统具有糖苷修饰差异,植物中生产的生物药物的糖基化将植物特异性N-聚糖残基,αa-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖添加到最终的糖基化产物中。这些植物特异性N-聚糖的存在可以显着改变生物药物的稳定性和活性,一些研究已经证明,通过基因工程在植物中通过人源糖基化类型生产药物可以改变植物细胞的N-糖基化结构。人血浆主要由人血清白蛋白的蛋白质组成,它是一种单体非糖基化蛋白质。它常以高剂量用于治疗各种疾病和伤害,如手术失血,血容量不足,严重烧伤等引起的贫血。作为血浆来源的HSA替代物,重组人血清白蛋白是一种安全性高并且供应来源广泛的生物制药。中国已经在转基因水稻胚乳中大规模生产了的植物源重组人血清白蛋白(human serum albumin from Oryza Sativa,OsrHSA)OsrHSA,并且最近中国食品药品监督管理局批准它在中国进行临床试验,OsrHSA的HCPs安全性则是其中的一个关键问题。研究结果表明:OsrHSA与血浆来源人血白蛋白(Plasma HSA)在理化和物理性质上完全相同或相似。因此,OsrHSA的安全性问题不是来自HSA木身,而是来自OsrHSA加工过程中产生的杂质,尤其是残留宿主细胞蛋白(Host Cell Proteins,HCPs)。但是HCP不可能在下游加工过程中彻底去除。虽然OsrHSA中的残留HCP控制在低至1.5|μg/g的浓度,但由于HSA在临床应用中临床剂量超过50克以上,总HCP含量仍然很高。通常,生物药的安全性不仅受HCP水平,还受其种类的影响。虽然许多复杂方法已被用于去除和降低HCPs含量,但由于不能完全排除这些杂质,残留HCPs作为关键质量属性(Critical Quality Attributes,CQA)之一。而HCPs潜在的免疫原性是在OsrHSA临床应用中最关注的风险。因此,将OsrHSA中残留的HCPs作为CQA的表征以及通过不同方法评估免疫原性非常重要。目前为止,关于OsrHSA中HCPs的免疫原性尚没有报道,对残留HCPs的免疫原性在临床前或临床试验的相关研究也未见报道。因此,利用动物系统的临床前试验研究获得OsrHSA中的HCP的免疫原性和免疫毒性的直接证据显得至关重要。在本研究中,针对水稻胚乳细胞生物反应器的蛋白药物中与宿主相关的主要成分之一 HCPs安全性和与药物相关的植物类型N-糖苷的人源化进行了研究。首先,我们使用Sprague-Dawley大鼠评估了 OsrHSA及其残留HCPs的免疫原性和细胞毒性进行系统评价,对包括对动物主动脉血样进行血液学和生化分析、细胞因子、C-反应蛋白(CRP)和血浆循环免疫复合物、补体和抗药物抗体(ADA)的等关键性安全指标进行了分析。然后采用TALENs基因组编辑技术,对水稻胚乳细胞的人源化糖苷修饰进行遗传改造,以期获得具有人源岩藻糖结构和半乳糖、唾液酸结构的糖苷结构。在水稻基因组内分别敲除α-1,3-岩藻糖基转移酶(α-1,3-fucosyltransferase,OsFUT)或β-1,2-木糖基转移酶(β-1,2-xylosyltransferase,OsXylT)基因,同时将人的岩藻糖基转移酶(FUT8)和人的半乳糖苷转移酶基因(GalT)导入水稻基因组。主要结果如下:HCP组或阴性对照组中均未观察到动物死亡或异常反应。所有处理组的体重均有增加,但在D42与对照组未见明显的体重增加。实验发现,雄性动物体重的上升趋势远高于雌性动物,而HCP组的体重与阴性对照组相比较并没有显着变化。在HCP和阴性对照血液学和凝血相关参数也没有显着差异。结果表明:与阴性对照相比,OsrHSA的残留HCP不会引起任何血液生化的改变。对HCP的免疫毒性评估结果,通过监测CD4+和CD8 + T细胞,结果发现,在给药后的D15,HCP组与阴性对照组相比时,CD8 + T细胞没有显着差异。然而,给药后的D15,CD4 + T细胞和CD4 +/CD8 + T细胞比例在HCP组中与阴性对照组之间存在显着差异。尽管在D15的CD4 +/CD8+比例有实质性差异,但淋巴细胞百分比仍处于临床正常范围,这些变化并未显示药物剂量与给药时间之间的相关性。因此,我们并不认为这些变化与这种药物的免疫毒性有关。通过进一步对与炎症高度相关的IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-13,TNF-α,IFN-y和IL-1β等细胞因子进行研究,结果发现HCP组中没有检测到这8种细胞因了,表明OsrHSA的HCPs没有免疫毒性,也不可能出现细胞因子风暴的风险。为了研究水稻残留HCP的免疫原性,我们研究了 HCP特异性抗体,在给药后第14天,第28天和第41天分别检测了抗HCP、抗人血清白蛋白和抗OsrHSA的特异性抗体的效价和发生率。结果发现在给药后D41时,只有少数动物在OsrHSA和pHSA中检测到HCP特异性抗体,其发生率为在2/10,滴度均小于1.0,尽管检测到了特异性抗体,但发生率和滴度均较低,结果表明HCP具有较低的免疫原性。C-反应蛋白(C-reaction protein,CRP)水平会随着炎症发展而增加。在给药后D15时,OsrHSA组的雄性动物中CRP不但没有升高,反而有显着降低,并且在给药后42天时,OsrHSA和pHSA两中的CRP都显着降低。然而雌性动物的CRP显着降低;但这种变化与药物和给药时间之间没有相关性。CIC水平的上升作为抗药物抗体(Anti-drugantibody,ADA)发展的先决条件,我们检测了HCP的ADA,我们在给药后D15和D42天分别检测了CIC的水平。与阴性对照组相比,HCP组没有观察到任何与药物相关的CIC变化。进一步评估响应于HCP抗原的免疫激活反应,我们检测了补体3和补体4,结果表明:在pHSA组的补体3水平在给药后D15和D42较对照显着下降,而仅在给药后D42时,补充3水平仅在OsrHSA组的雌性动物有所增高,但所有处理组均没有检测到补体4。为了探讨在OsrHSA高剂量组可能引起的病理变化,我们对高剂量可能引起病理变化的肝、肾和脾脏等靶器官进行了组织学观察。在HCP组和阴性对照之间未观察到与药物相关的显着病理学差异,也没有发现HCP组的器官重量和系数比率的显着变化。对pHSA和OsrHSA高剂量处理组的病理学观察结果,在OsrHSA和pHSA组里发现了与药物相关的包括肝、脾和肾的器官/体重比增加;在OsrHSA和pHSA组观察到了肝细胞肥大,肝/脾造血,肾小球系膜细胞增殖和基质扩大,肾小管和肾小管变性/再生等在内的病理学变化。其发生率和严重程度与剂量高度相关,这可能是由于蛋白质过载引起渗透压增加从而降低肺功能所致,这些病变与每天高剂量注射白蛋白后的生物学特征一致。由于HSA主要用于治疗低血容量患者,因此这种现象不可能发生在病人身上。除肾小管病变在给药后D43后没有得到恢复外,其余病变均得到了恢复,这表明这些变化是一种可逆性反应,但这些病理学变化在OsrHSA和pHSA二者之间没有显着差异,表明OsrHSA与pHSA具有相似的毒性反应,说明OsrHSA是安全。为了在植物细胞中获得人源化的糖苷修饰,我们采用TALEN技术对水稻胚乳细胞编码糖苷修饰的酶进行遗传改造,总共构建了 9个靶向OsFUT的TALEN载体和11个靶向OsXylT基因TALEN载体,进行了水稻转化转化。我们先鉴定hpt的阳性转化植株,在此基础上,从hpt阳性植物中进一步筛选鉴定出GalT或FUT8阳性转基因植株,最终从67个hpt阳性转基因植株中获得了10个FUT8阳性转基因植株,从207个hpt阳性转基因植株中获得了46个GaIT阳性转基因植株;使用特定引物进一步鉴定目标基因是否通过NHEJ机制整合到由TALENs创建的DSB中,不幸的是,结果没有发现人类GalT或FUT8的插入到TALEN的靶标位点,显示设计的TALEN可能没有产生DSB。结果表明获得的GalT或FUT8的转基因植株均是通过随机方式整合到水稻基因组。随后,我们采用蛋白质印迹法对GalT或FUT8的阳性转基因株系的的表达进行了检测,检测结果发现:从10个FUT8阳性转基因品系检测到了3个转基因株系的胚乳中表达了FUT8,从46个GalT阳性转基因株系的胚乳中中检测到GalT的表达。进一步确定在表达FUT8和GalT蛋白的种子蛋白是否发生了N-糖基化结构改变,以TP309作为对照,采用MALDI-TOF质谱技术对阳性株系的糖苷结构进行了分析。结果显示所有表达FUT8的转基因品系种子均显示出不同的植物特异性N-糖苷结构;在过表达FUT8的转基因品系FF1-141-6的种子中,植物类型的糖苷结构较TP309显着降低了5%,只含木糖残基/无岩藻糖的N-糖苷如GnMX,MMX和GnGnX的总量显着降低,植物特异性糖苷的减少可能是由于哺乳动物特异性FUT8编码的基因表达所致。值得注意的是,在过表达GalT的转基因系胚乳中的植物类型N-糖苷的显着减少。可能是在胚乳中过表达人GalT基因,其机理可能是作用于GlcNAcMan5GlcNAc2的中心结构域并抑制植物类型N-糖苷的形成。我们发现在XG4-133-1和XG2-118-9转基因品系胚乳中缺少一种或两种植物特异性N-糖苷结构。在这个品系除了显着减少的植物类型N-糖苷结构之外,还检测到了人源特异性的半乳糖基化和唾液酸化的N-糖苷结构。在XG2-118-9转基因系中,在81%哺乳动物N-糖苷的26.44%糖苷被唾液酸化,这是首次在水稻胚乳细胞表达GalT基因产生了唾液酸化的糖苷结构。由于半乳糖基化结构作为唾液酸化的受体底物,早期研究报道在玉米、小麦和大麦等谷物作物物缺乏唾液酸化合成途径的相关基因,在植物中实现唾液酸化的N-糖苷较为困难。另一方面,已有报道在水稻基因组存在编码类似唾液酸转移酶的基因,在我们结果中,在转基因水稻中过量表达GalT,获得了具有唾液酸糖苷结构的N-糖苷,说明在水稻中较其他谷物作物具有更大的优势。由于糖基化药物的唾液酸化影响其循环半衰期和生物活性,在植物生物药物中的唾液酸与否是植物生物反应器与动物反应器的最重要差别。我们的结果提供了人源化糖苷修饰可在水稻胚乳细胞中实现的证据,也再次证明水稻基因组的唾液酸转移酶可以通过表达供唾液酸化的底物半乳糖来实现植物细胞的人源化糖苷修饰。综上所述,我们结果表明OsrHSA中的残留HCP的免疫原性较低,OsrHSA的安全性与血浆来源HSA相同。我们还证实了OsrHSA中的残留HCP对人体是安全的假说,再次证明水稻胚乳细胞是最适合的分子医药宿主之一。此外,在水稻胚乳细胞过表达人半乳糖苷转移酶(GalT)可以为唾液酸化提供半乳糖苷底物,并获得人特异的唾液酸糖苷结构和同时降低β-1,2-木糖含量。这些结果证明了 OsrHSA的HCP具有较低的免疫原性和免疫毒性,植物类型N-糖苷可以通过基因工程技术获得人源化的糖苷结构。(本文来源于《武汉大学》期刊2018-06-01）
姜波,孙明媛,郑维维,陈小梅,齐军元[8]（2018）在《注射用重组人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子(Ⅰ)融合蛋白在健康受试者的耐受性研究》一文中研究指出目的评价重组(酵母分泌型)人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子(Ⅰ)融合蛋白在健康受试者的耐受性和安全性。方法将26例健康受试者(男女各半)按先后顺序入组,进行4个剂量组试验(150,300,500,650μg·kg~(-1)),每组分别入组4,6,8,8例。根据体重计算给药剂量,受试者于给药当天上臂叁角肌部位皮下注射给药1次。用药后观察药物不良事件(AE),定时进行实验室检查、心电图检查。结果共25例受试者发生AE,共145例次。150,300,500及650μg·kg~(-1)剂量组的AE分别为13,11,56和65例次。其中134例次考虑与研究药物相关。常见的AE有骨痛、单核细胞计数升高、血碱性磷酸酶升高、头痛、高尿酸血症、血乳酸脱氢酶升高、脾肿大、肌肉疲劳。研究中未出现AE导致的用药暂停、受试者退出或试验提前中止。未发生严重不良事件(SAE)。未发生剂量限制性毒性。结论注射用重组(酵母分泌型)人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子(Ⅰ)融合蛋白在中国健康受试者中单次给药150,650μg·kg~(-1)剂量范围内有较好的安全性,本临床试验未探索到健康人群的最大耐受剂量。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2018年06期）
陈林涛,韦双双,黄永林,吴昊,郭子怡[9]（2018）在《重组人血清白蛋白在紫花苜蓿中的转基因表达》一文中研究指出为获得高产重组人血清白蛋白的转基因紫花苜蓿"游客"(Medicago sativa L. cv.‘Eureka’)株系用于规模化生产rHSA,构建了rHSA植物表达载体。以紫花苜蓿子叶愈伤组织为受体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,筛选出潮霉素抗性植株,提取抗性再生紫花苜蓿植株基因组DNA做PCR鉴定,结果表明重组人血清白蛋白基因片段已整合到紫花苜蓿基因组中;提取转基因植株总蛋白,Western blotting检测结果表明rHSA在转基因植株中成功表达。此结果表明转基因紫花苜蓿可稳定表达rHSA。(本文来源于《热带作物学报》期刊2018年04期）
李世杰,袁彩,郑科,陈锦灿,雪光浦[10]（2017）在《一种新颖的除去重组人血清白蛋白杂质的方法》一文中研究指出开发了一种简便高效的去除杂质的方法 (CBIR法).在含6 mol·L-1尿素、体积分数为30%酒精的不含还原剂的体系中,重组人血清白蛋白的结构被部分变性而其二硫键不被破坏,从而使吸附及包裹在其内部的色素等杂质暴露,而与重组人血清白蛋白分离.由于多对二硫键的存在,在去除变性剂情况下,人血清白蛋白恢复原来的构象.通过一系列实验对复性后的人血清白蛋白纯度和活性进行检测,确定这种CBIR法在提高人血清白蛋白纯度的同时,并不影响其活性.此外,也同样适用于重组人血清白蛋白融合蛋白的纯化,具有广泛的适用性.(本文来源于《福建师范大学学报(自然科学版)》期刊2017年04期）
重组人血清白蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热乙醇沉淀法可从猪血浆中获得rHSA粗提取液,此时rHSA的纯度可达69.5%,回收率达51.3%。进一步采用多级色谱分离法,即阴离子交换色谱和反相色谱法进一步纯化,得到rHSA的最终纯度约为100.0%,总回收率为41.1%。该方法为从转基因猪血浆中大规模纯化用于临床和生化研究的高纯度rHSA提供可能,同时也为rHSA替代HSA奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组人血清白蛋白论文参考文献
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