ATRA诱导小鼠间充质干细胞棕色成脂分化的分子机制

论文摘要

目的研究全反式维甲酸(ATRA)或骨形态发生蛋白7(BMP7)诱导小鼠间充质干细胞定向分化为成熟棕色脂肪细胞的作用及机制。方法采用ATRA或BMP7对小鼠间充质干细胞C3H10T1/2进行体外诱导,使其向棕色脂肪细胞定向分化,比较二者诱导分化棕色成脂效果;采用油红O染色鉴定棕色脂肪细胞成脂能力,线粒体染色检测棕色脂肪细胞富集的线粒体,免疫印迹法检测脂肪分化相关基因、棕色脂肪标志基因表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测BMP7、线粒体相关基因及棕色脂肪细胞分化抑制因子Necdin、Wnt10a及Pref1的表达情况。结果 ATRA诱导C3H10T1/2细胞向棕色脂肪细胞分化的最适浓度为1～2μmol/L。采用1μmol/L ATRA预处理3 d(ATAR组)后,与对照组[采用二甲基亚砜(DMSO)处理]比较,ATRA组线粒体相关基因CyctoC、Tfam及Nrf1的mRNA相对表达量明显升高(P<0.05),棕色脂肪细胞分化抑制因子Necdin和其下游靶基因Pref1、Wnt10a的mRNA相对表达量明显降低(P<0.05),BMP7 mRNA相对表达量明显升高(P<0.05)。不同浓度的ATRA均可使BMP7蛋白表达量升高,且呈剂量效应。采用1μmol/L ATRA预处理0、24和48 h,BMP7蛋白表达量逐渐升高,Necdin蛋白表达量逐渐降低。ATRA与BMP7的诱导效果一致。结论 ATRA具有诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2分化为棕色脂肪细胞的能力,其机制可能是通过调控BMP7,诱导棕色前体脂肪细胞定向分化。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 棕色脂肪细胞诱导分化
•     1.2.2 脂肪细胞油红O染色
•     1.2.3 线粒体荧光探针染色
•     1.2.4 总RNA提取及RNA逆转录
•     1.2.5实时荧光定量聚合酶链反应 （polymerase chain reaction, PCR）
•     1.2.6免疫印迹法
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 ATRA诱导C3H10T1/2细胞成脂分化结果
•   2.2 ATRA诱导后线粒体相关基因的表达
•   2.3 ATRA诱导后棕色脂肪细胞分化抑制因子的表达
•   2.4 ATRA对BMP7的调控作用
•   2.5 ATRA和BMP7对C3H10T1/2细胞的诱导效果的比较
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 梁璆荔,程金科,左勇

关键词: 全反式维甲酸,骨形态发生蛋白,棕色脂肪细胞,定向分化

来源: 检验医学 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系,上海交通大学医学院基础医学院生物化学与分子细胞生物学系

分类号: R329.2

页码: 451-456

总页数: 6

文件大小: 1959K

下载量: 138