羰基还原酶基因工程菌产酶和不对称合成(R)-苯乙醇的条件优化

羰基还原酶基因工程菌产酶和不对称合成(R)-苯乙醇的条件优化

论文摘要

以羰基还原酶基因工程菌全细胞为催化剂,探讨不对称合成(R)-苯乙醇的各种影响因素,优化其产酶和转化条件。结果表明,优化后的发酵培养基为甘油10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L,(NH4)2SO4 5 g/L、NaCl 10 g/L,氨苄青霉素50μg/mL,pH 7.2;诱导剂IPTG的浓度为0.25 mmol/L,诱导时间为20 h,诱导温度为18℃,此条件下测得基因工程菌粗酶活最高为6.65 U/mL。建立的最佳转化条件:羰基还原酶基因工程菌发酵20 h后的细胞浓度为0.3 g/mL,转化体系初始pH为7.0,温度为37℃,辅助底物异丙醇浓度为10%,底物终浓度为60 mmol/L,转化时间为24 h。此时底物转化率最高可达98.88%,产物对映体过量值(e.e.值)为99.43%。反应体系扩增至3 000 mL后,产物e.e.值仍保持在99.0%左右,底物转化率可为92%以上,(R)-苯乙醇的产量也可达到6.67 g/L。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郝军莉,章英,杨天兵,王婷,杨宇,王丹

关键词: 羰基还原酶,基因工程菌,不对称合成,产酶条件,转化条件

来源: 中国测试 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅱ辑,工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工,一般化学工业

单位: 成都医学院生物科学与技术学院

基金: 四川省科技厅科技支撑项目(No.2016GZ0364),四川省教育厅科研项目(16ZA0287,17ZA0102),四川省卫生厅项目(18PJ586,16PJ103),成都医学院科研创新团队项目(CYTD16-04)

分类号: TQ925;TQ243.4

页码: 73-79

总页数: 7

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