采用PCR-RFLP法鉴别IBDV强毒BC6/85株和弱毒B87株

论文摘要

选取传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒力代表株BC6/85和弱毒力代表株B87为研究对象,根据VP2基因保守区设计一对通用引物和两个限制性内切酶位点,分别扩增两个毒株的VP2基因,然后进行BamHⅠ和PstⅠ酶切,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）分析酶切产物,并进行特异性、敏感性和重复性检测.结果表明:所设计的引物均可扩增两个毒株的VP2基因,大小约856 bp;经BamHⅠ和PstⅠ酶切后,BC6/85株的PCR产物被BamHⅠ和PstⅠ切出166、242和449 bp大小的3个片段,而B87株仅被PstⅠ切出242和615 bp大小的2个片段,且重复性好,特异性强.可见,采用PCR-RFLP分析IBDV VP2基因的方法操作简单,是一种能够快速鉴别IBDV强、弱毒株的可靠方法.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 引物的设计与合成
•     1.2.2 病毒RNA的提取
•     1.2.3 PCR扩增与鉴定
•     1.2.4 目的基因的回收与测序
•     1.2.5 酶切鉴定
•     1.2.6 特异性检测
•     1.2.7 敏感性检测
•     1.2.8 重复性检测
• 2 结果与分析
•   2.1 PCR扩增结果
•   2.2 PCR产物测序结果及酶切位点
•   2.3 酶切鉴定结果
•   2.4 特异性检测结果
•   2.5 敏感性检测结果
•   2.6 重复性检测结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈仕怡,陈媛,赖隆永,李春燕,刘梦茜,袁晓琴,郑庆礼,许丽惠,王全溪

关键词: 传染性法氏囊病病毒,限制性内切酶,鉴别诊断

来源: 福建农林大学学报(自然科学版) 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 福建农林大学动物科学学院

基金: 国家星火计划重点项目(2015GA720001)

分类号: S852.65

DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2019.03.013

页码: 359-364

总页数: 6

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