蛋白激酶D1对口腔鳞癌细胞在肿瘤微环境中生长代谢的调控

论文摘要

目的探讨在酸性缺氧微环境中,蛋白激酶D1（PKD1）对口腔鳞癌HSC-4细胞生长、代谢的调控作用和相关分子机制。方法口腔鳞癌HSC-4细胞稳定转染PKD1,将未转染组、对照组和转染组细胞分别置于酸性或缺氧环境下进行培养,Western blot检测细胞中PKD1敲除率及细胞自噬相关蛋白和糖酵解相关蛋白表达情况,CCK8试剂盒检测细胞增殖。结果实验成功建立了PKD1基因沉默的稳定细胞株;酸性环境下,PKD1沉默后细胞自噬活性升高;缺氧环境下,相对于对照组,PKD1基因沉默后细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和糖酵解中丙酮酸激酶（PKM2）的表达均显著降低;酸性和缺氧环境下,相对于对照组,PKD1基因沉默后细胞的生长速度显著降低。结论在酸性和缺氧环境下,PKD1基因沉默可促使口腔鳞癌细胞凋亡性自噬活性升高,且下调PKD1基因表达可抑制口腔鳞癌细胞糖酵解,进而抑制肿瘤细胞增殖。揭示PKD1在口腔鳞癌代谢和生长中的作用,使其成为口腔鳞癌治疗的可能靶点。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 细胞株及主要试剂
•   1.2 细胞培养及shRNA技术沉默PKD1基因
•   1.3 Western blot鉴定敲除效率及相关蛋白的表达情况
•   1.4 酸性和缺氧环境下的细胞培养
•   1.5 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 构建稳定转染PKD1-sh RNA质粒的HSC-4细胞系
•   2.2 酸性条件下PKD1的磷酸化
•   2.3 酸性条件下PKD1沉默对HSC-4细胞自噬的影响
•   2.4 酸性条件下PKD1沉默对HSC-4细胞生长的影响
•   2.5 缺氧环境下PKD1的表达和活化
•   2.6 缺氧环境下PKD1沉默对HSC-4细胞糖酵解的影响
•   2.7 缺氧环境下PKD1沉默对HSC-4细胞生长的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王利伟,余宇,陈娇,冯云,崔博淼,李小英,王京楠,陈红利,张平

关键词: 蛋白激酶,口腔鳞癌,肿瘤微环境,糖酵解代谢,细胞增殖

来源: 华西口腔医学杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学,口腔科学

单位: 口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院

基金: 国家自然科学基金(81372892)~~

分类号: R739.8

页码: 577-582

总页数: 6

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