（广西壮族自治区肿瘤防治研究所广西南宁530021）
【摘要】目的：通过研究水蛭素单药及联合顺铂对鼻咽癌CNE２细胞生长的影响，探讨其抑制作用。方法：以体外培养的鼻咽癌CNE２细胞为研究对象，采用MTT法检测水蛭素单药及联合顺铂对CNE２细胞的生长抑制率。结果：水蛭素对CNE2细胞有明显的生长抑制作用，抑制率随剂量、时间的增加而增强（P＜0.05）；水蛭素和顺铂联合应用，对CNE2细胞的抑制率高于两者单独应用（P＜0.05）。结论：水蛭素有抑制鼻咽癌CNE2细胞生长的作用，并可增强顺铂的抑癌效应。
【关键词】水蛭素；顺铂；CNE2细胞；鼻咽癌
【中图分类号】R739.6【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）23-0142-02
【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryactionbystudyingtheeffectofhirudinmonotherapyorcombinedwithcisplatinonthegrowthofnasopharyngealcarcinomacell(CNE2).MethodsTheculturednasopharyngealcarcinomaofCNE2cellswereusedastheresearchobject.Methylthiazoltetrazolium(MTT)assaywasadoptedtodetectthegrowthinhibitionrateofCNE2cellstreatedwithhirudinmonotherapyandcombinationcisplatin.ResultsHirudincouldsignificantlyinhibitthegrowthofCNE2cellsinadosedependentandtimedependentmanner(P<0.05).ThecombinationofhirudinandcisplatinshowedhigherinhibitoryeffectonCNE2cellsthanbothofthem(P<0.05).ConclusionHirudincouldinhibitCNE2cellsinNPCandenhancetheanti-cancereffectofcisplatin.
【Keywords】Hirudin;DDP;CNE2cells;NPC
鼻咽癌是广东及广西高发肿瘤，治疗方式主要以放疗为主，大部分患者能取得较好疗效[1]，部分患者要辅以化疗，但化疗药物存有明显的毒副作用，而中医药在肿瘤治疗中具有增效减毒的作用，有研究发现水蛭素亦具有抗肿瘤的作用[2]，因此本课题通过水蛭素联合顺铂，对体外培养的鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制研究，初步探讨其作用机制，为水蛭素的临床应用提供理论依据。
1.材料与方法
1.1材料
CNE2细胞株，顺铂，天然水蛭素冻干粉（南宁市金海科康生物医药科技有限公司提供）。
1.2方法
1.2.1细胞培养CNE2细胞于RPMI1640培养基中，常规培养。
1.2.2MTT法检测水蛭素、顺铂对CNE2细胞的生长抑制作用设置水蛭素组（2，4，8，16ATU/ml），顺铂组（2umol/L），联合用药组（2umol/L+5ATU/ml），每组5个复孔，分别于药物作用24，48，72h后，用酶标仪490nm波长的吸光度值测定OD值。重复3次实验。抑制率=（1-药物组平均OD/对照组平均OD）×100%。
2.结果
2.1水蛭素对CNE2细胞的生长抑制作用
在同一时间段，随着水蛭素浓度的增加，抑制率逐渐增强；在同一浓度下，随着水蛭素对CNE2细胞作用时间的延长，抑制率逐渐增强，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。
3.讨论
水蛭素是从水蛭头部的唾液腺提取出来的一种活性成分[3]，其抗凝血作用已经应用于临床，近年来有研究表明水蛭素对体外培养的TCA8113细胞有明显的抑制作用，联合阿霉素后有明显的增效减毒作用[4]。顺铂是非特异性抗肿瘤药物,也是一种有效的放疗增敏剂，是目前治疗鼻咽癌的常用化疗药物之一，但其毒副反应也较多，且对肿瘤细胞的侵袭转移抑制作用较差[5]。
本研究选用水蛭素单药、水蛭素与顺铂的联合应用，分别观察其对CNE2细胞的体外生长抑制作用，结果显示水蛭素对体外培养的CNE2细胞生长有明显的抑制作用，与水蛭素的剂量及作用时间呈正相关性，随着作用剂量的增加及作用时间的延长，细胞的生长抑制作用明显增强，当水蛭素16ATU/mL，作用时间72h时，生长抑制率达到了93.3%，各组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。在水蛭素、顺铂单药与两者联合用药48h的研究中发现，水蛭素单药体外抑制率高于顺铂，这可能与药物浓度有关，主要是观察联合用药，发现联合用药有增强效应，比单药应用有更强的细胞抑制作用。
综上所述，本研究提示水蛭素对体外培养的鼻咽癌CNE2细胞有生长抑制作用，为水蛭素应用于临床抗癌提供理论依据；水蛭素联合顺铂表现出的增强效应，提示可以减少顺铂的使用剂量，从而减轻顺铂的毒副作用。
【参考文献】
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