导读:本文包含了靶向性非病毒载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因治疗,靶向,腺病毒,载体,淋巴瘤,肿瘤,基因。
靶向性非病毒载体论文文献综述
薛淑雅,杨月峰[1]（2014）在《重组腺病毒载体靶向性策略的研究进展》一文中研究指出近年来,研究者致力于突破基因治疗的瓶颈,极大推动了基因治疗的发展。载体系统是基因治疗的基础,截止2013年7月,在"Gene Therapy Clinical Trial Worldwide"网站登记注册的基因治疗方案中,重组腺病毒载体占476项(23.5%)。在6个亚群(A-F)、50多种血清型的腺病毒载体中,5型腺病毒(adenovirus type 5,Ad5)可特异性识(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2014年02期）
张国海,王启钊,张景红,许瑞安[2]（2010）在《microRNA调控的靶向性病毒载体在基因治疗中的应用》一文中研究指出安全、有效、具有靶向性的病毒载体是基因治疗药物在临床上得以应用的关键。microRNA是一类单链、内源性的转录后调控小分子,它的发现为开发具有靶向性调控能力的病毒载体提供了新的研究方法。以下在介绍microRNA调节病毒载体靶向性原理的基础上,着重介绍microRNA在清除复制能力病毒的污染、消除转基因特异性免疫、增强肿瘤靶向性基因治疗、开发活体疫苗等领域的应用。(本文来源于《生物工程学报》期刊2010年06期）
温银田,张丙芳,叶菁,吴雅岚,王净[3]（2010）在《人肝癌靶向性CD80基因表达重组腺病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建人肝癌靶向性CD80基因重组腺病毒载体。方法:首先,从人基因组DNA中克隆AFP增强子、启动子,利用腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShutte-CMV,采用AFP增强子替换CMV启动子,构建含有AFP启动子和增强子的穿梭质粒,命名为pShuttle-AFP。将人CD80基因克隆到pShuttle-AFP的AFP增强子和启动子之后,构建pShuttle-AFP-CD80质粒。再将其与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coliBJ5183,利用同源重组构建腺病毒质粒pAd-AFP-CD80。以获得的重组子转染AD293细胞后制备重组腺病毒,并对重组的病毒进行鉴定和病毒滴度测定。结果:测序结果与Genebank中公布的AFP启动子、核心增强子和CD80基因序列相符。双酶切结果与预期结果相符。PacI酶切结果与目的结果一致。穿梭质粒pShutte-AFP-CD80和腺病毒质粒pAd-AFP-CD80经酶切和PCR鉴定均获得期望大小的目的片段。结论:成功的构建了人肝癌靶向性pAd-AFP-CD80腺病毒载体,为CD80基因在肝癌靶向性治疗的研究奠定了基础。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2010年04期）
毛晨宇[4]（2009）在《腺病毒载体介导的靶向性肿瘤基因治疗研究》一文中研究指出基因转运技术是肿瘤基因治疗的重要环节之一,寻找合适的基因转运载体一直是人们的研究热点。腺病毒载体因具有宿主范围宽广、感染效率高、可插入外源基因片断大、病毒相对容易制备和不会与受染细胞发生整合等诸多优点而受到特别的重视,成为肿瘤基因治疗中应用最为广泛的载体系统。目前有多种策略和方法用于对腺病毒进行改造,使其对肿瘤细胞具有靶向性和杀伤力,包括改造病毒衣壳蛋白或利用双功能连接物把腺病毒靶向导入肿瘤细胞;利用一些肿瘤特异性启动子、组织特异性启动子和可调控性启动子进行转录水平的基因表达调控。根据杀伤肿瘤细胞的作用机理的不同,可把腺病毒分为复制缺陷型腺病毒和条件增殖型腺病毒两大类。复制缺陷型腺病毒能起到运输载体的作用,携带外源基因(抑癌基因、细胞凋亡诱导基因、免疫调节因子、血管生成抑制因子、自杀基因等等)靶向转导入肿瘤细胞,从而引起细胞的死亡;条件增殖型腺病毒是一类经过转录调节修饰的病毒,可以以高度的特异性在靶细胞中复制增殖并最终裂解该细胞,同时释放出子代病毒再感染邻近的细胞,直至把所有肿瘤细胞杀死为止,而对非靶细胞无杀伤力。本课题主要是基于腺病毒载体就靶向性肿瘤基因治疗开展了相关的工作。主要研究内容可分为两大部分:第一部分:双重调控的靶向性肿瘤增殖腺病毒的构建及抗瘤研究。本课题引入两个在绝大多数肿瘤细胞中均高表达而在正常组织中低表达甚至不表达的肿瘤特异性启动子人端粒酶催化亚单位启动子和人环氧合酶-2启动子来分别调控腺病毒早期必需基因E1A和E1B,使经过改造的重组增殖腺病毒只能在同时表达人端粒酶和人环氧合酶-2的细胞内增殖并裂解该细胞,而在正常的细胞内不能有效增殖。在本实验中,通过将腺病毒穿梭质粒载体pD306/H181-C409和骨架质粒载体pBHGE3共转染工具细胞Hek293,经过在细胞内随机同源重组后,成功得到了一种新型的由人端粒酶催化亚单位启动子和人环氧合酶-2启动子共同调控的条件增殖型腺病毒Ad5-HC。通过Western blot法检测表明E1A和E1B可在多种被Ad5-HC作用后的肿瘤细胞中表达,而在正常细胞中不表达;病毒增殖试验表明Ad5-HC可在多种肿瘤细胞内大量扩增,其扩增倍数是正常细胞的上万倍;细胞杀伤试验表明Ad5-HC对多种不同类型的肿瘤细胞有强大的杀伤效果;当Ad5-HC联合化疗药物作用于肿瘤细胞时,它能与包括5-FU、表柔比星、紫杉醇在内的多种化疗药物产生协同疗效;裸鼠移植瘤抗瘤活性试验表明Ad5-HC在动物体内能有效抑制瘤体的生长。本实验采用一系列体外试验和体内试验,全面验证了由hTERT启动子和Cox-2启动子双重调控的肿瘤增殖腺病毒Ad5-HC良好的肿瘤细胞特异性和细胞杀伤作用,从而为肿瘤的病毒基因治疗提供了一种新的思路和方法。第二部分:由AFP启动子调控且携带人工合成微小RNA的重组腺病毒的构建及抗瘤研究。本课题用人工合成的方式合成多段能直接静默细胞正常新陈代谢所必需的基因的微小RNA序列,包括磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphatedehydrogenase,GAPDH)、真核起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor4E,eIF4E)和DNA聚合酶α(DNA polymeraseα)。通过利用复制缺陷型腺病毒载体携带这些人工合成的微小RNA进入细胞,同时利用AFP启动子在肝癌细胞内特异性高表达的特性来调控外源基因的表达,使得这些微小RNA能被靶向导入到AFP阳性的肝癌细胞内,从而下调靶基因的表达进而影响其生理功能。在本实验中,一系列携带微小RNA的复制缺陷型腺病毒被成功构建,包括Ad5-miRNA5G、Ad5-miRNA6E、Ad5-miRNA6P和Ad5-GFP。通过采用一系列体外试验(包括RT-PCR检测靶基因的mRNA水平、Western blot检测靶基因蛋白的表达、病毒细胞毒性试验、细胞活性检测)和体内试验(裸鼠移植瘤抗瘤活性试验),全面验证了重组腺病毒良好的肝癌细胞特异性和杀伤力;通过对病毒感染后的细胞进行细胞周期分析、ATP酶含量检测、总蛋白含量检测等方法进一步从作用机理上进行了分析,发现携带微小RNA的重组腺病毒不仅可导致肿瘤细胞在G2/M期阻滞,还可使细胞内ATP酶和总蛋白含量下降。总之,利用腺病毒的载体作用携带人工合成的微小RNA,通过组织特异性启动子靶向转导基因表达,可以使重组腺病毒在靶细胞内发挥明显的细胞杀伤作用。(本文来源于《浙江大学》期刊2009-05-01）
李子博,曾赵军,孙开胜,罗洁[5]（2009）在《携带靶向性可调控自杀基因的重组相关腺病毒载体的构建及其活性检测》一文中研究指出目的:构建携带受Tet-On以及VEGF启动子双调控自杀基因HSVtk的重组腺相关病毒载体,研究其在乳腺癌细胞MCF-7中的可调控表达。方法:用PCR方法扩增VEGF启动子,将其插入pAAV/TRE/HSVtk/Tet-On中形成重组载体pAAV/VEGF/TRE/HSVtk/Tet-On质粒。进行病毒包装后得到了rAAV/VEGF/TRE/HSVtk/Tet-On重组腺相关病毒。用重组腺相关病毒感染乳腺癌细胞株MCF-7和正常乳腺HBL-100细胞,用MTT法及RT-PCR检测在Dox诱导下,GCV对rAAV感染的MCF-7细胞和HBL-100细胞的杀伤作用以及HSVtk基因在MCF-7细胞内的表达情况。结果:在rAAV+Dox+GCV组,GCV对rAAV感染的MCF-7细胞的杀伤作用明显高于rAAV+Dox组,rAAV+Dox组以及HBL-100组,并且RT-PCR结果显示经Dox诱导HSVtk表达较明显。结论:成功构建了携带双调控自杀基因的重组腺相关病毒载体,该病毒载体能有效的感染乳腺癌细胞MCF-7,并能联合GCV治疗,抑制肿瘤细胞生长,而且具有靶向性。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2009年08期）
宋崇文,王献华,林晨[6]（2007）在《腺病毒载体在肿瘤靶向性治疗中应用的研究进展》一文中研究指出肿瘤已经成为威胁人类健康和生命的重大疾病之一,有效地治疗肿瘤是当前医学研究的迫切任务。基因治疗在肿瘤治疗中的应用正在快速发展。肿瘤基因治疗常用的病毒载体有腺病毒载体、逆转录病毒载体及腺病毒相关病毒载体。腺病毒在体内能有效地感染肿瘤细胞,已经在肿瘤的基因治(本文来源于《华北煤炭医学院学报》期刊2007年05期）
吴锦昌,周俊东[7]（2007）在《靶向性基因治疗EBV阳性淋巴瘤的腺病毒载体的构建及初步鉴定》一文中研究指出目的 EB 病毒是引起人恶性淋巴瘤的主要病原体之一。利用 EBNA-1和 orip 是 EB 病毒中与复制和保持病毒基因组游离性有关的重要基因元件且 orip 与 EBNA-1 能特异性结合的特点,以及野生型 p53抑癌基因编码的 P53蛋白具有抑制细胞增殖(本文来源于《首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集》期刊2007-08-01）
司少艳,隋延仿,张秀敏,李侠,冯凯[8]（2007）在《肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体的构建及体外生物学活性鉴定》一文中研究指出[目的]构建肝癌靶向性葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因重组腺病毒载体。[方法]首先利用现有的腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShuttle-CMV,构建新的不带CMV增强子/启动子而带有polyA加尾信号穿梭质粒,命名为pShuttle2。将AFP增强子、启动子及SEA基因分别从已构建的pKS-EP载体和pMD18-T-SEA载体上,亚克隆至pShuttle2中,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coliBJ5183。以获得的重组子转染HEK293细胞后制备重组腺病毒,然后感染高表达AFP的肝癌细胞系Hepa1-6和不表达AFP的黑色素瘤细胞系B16、成纤维细胞系NIH3T3。采用间接免疫荧光法,经荧光显微镜观察和流式细胞术检测SEA在细胞膜表面的表达。采用3H掺入法检测膜表达的SEA体外诱导淋巴细胞增殖的活性。[结果]SEA能够靶向性地表达在高表达AFP的Hepa1-6细胞膜上,在不表达AFP的B16、NIH3T3细胞膜上不表达,并且体外能够诱导淋巴细胞增殖。[结论]成功地构建了肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体,为进一步研究SEA在肝癌靶向基因治疗中的应用及其抗肿瘤免疫机制奠定了基础。(本文来源于《中国肿瘤》期刊2007年07期）
周俊东,姜明红,卢大儒,吴锦昌[9]（2007）在《靶向性治疗EBV阳性淋巴瘤的腺病毒载体的构建及初步鉴定》一文中研究指出目的:构建靶向EBV阳性淋巴瘤且携带野生型P53基因的重组腺病毒。方法:构建重组质粒pDC311.orip-CMV.P53.IRES-EGFP,后将该质粒与腺病毒骨架质粒PBHGE3共转染293细胞,包装成rAd5.orip-CMV.P53。PCR方法对病毒鉴定后,TCID50法测定其滴度,同时用该病毒分别感染EBV阳性Raji细胞和EBV阴性Jurket细胞,以观察病毒的特异性。结果:成功地构建了能表达P53靶向EBV阳性淋巴瘤的重组腺病毒,病毒的滴度为3.6×1012pfu/L。体外细胞实验显示该病毒具有一定特异性。结论:成功构建rAd5.orip-CMV.P53载体,为靶向治疗EBV阳性淋巴瘤奠定基础。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2007年04期）
高建青,陈海靓,中川晋作,水口裕之,梁文权[10]（2006）在《整合素靶向性病毒载体对肿瘤细胞基因转导的促进作用》一文中研究指出Aim To construct an efficient recombinant viral vector for gene therapy.Methods(First-generation) adenovirus(Ad) vector was modified with the RGD peptide inserted into the fiber.Both in vitro and in vivo experiments of gene expression in different tumor cells with conventional and recombinant vectors were conducted.RT-PCR was used for detecting the expression of coxackievirus and adenovirus receptor and integrin at the surface of Meth-A cells.Results Fiber-mutant adenovirus vector showed a notably enhanced gene expression in A2058,B16BL6,OV-HM,and Meth-A tumor cells compared with that of conventional ones.In vivo study carried out using Meth-A tumor-bearing mice also demonstrated that the intra-tumoral injection of recombinant adenovirus induced strong gene expression in these CAR-deficient tumor cells. Conclusion The recombinant vector can be a promising one for effective cancer gene therapy.(本文来源于《药学学报》期刊2006年11期）
靶向性非病毒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
安全、有效、具有靶向性的病毒载体是基因治疗药物在临床上得以应用的关键。microRNA是一类单链、内源性的转录后调控小分子,它的发现为开发具有靶向性调控能力的病毒载体提供了新的研究方法。以下在介绍microRNA调节病毒载体靶向性原理的基础上,着重介绍microRNA在清除复制能力病毒的污染、消除转基因特异性免疫、增强肿瘤靶向性基因治疗、开发活体疫苗等领域的应用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
靶向性非病毒载体论文参考文献
[1].薛淑雅,杨月峰.重组腺病毒载体靶向性策略的研究进展[J].中国医药生物技术.2014
[2].张国海,王启钊,张景红,许瑞安.microRNA调控的靶向性病毒载体在基因治疗中的应用[J].生物工程学报.2010
[3].温银田,张丙芳,叶菁,吴雅岚,王净.人肝癌靶向性CD80基因表达重组腺病毒载体的构建及鉴定[J].现代生物医学进展.2010
[4].毛晨宇.腺病毒载体介导的靶向性肿瘤基因治疗研究[D].浙江大学.2009
[5].李子博,曾赵军,孙开胜,罗洁.携带靶向性可调控自杀基因的重组相关腺病毒载体的构建及其活性检测[J].现代生物医学进展.2009
[6].宋崇文,王献华,林晨.腺病毒载体在肿瘤靶向性治疗中应用的研究进展[J].华北煤炭医学院学报.2007
[7].吴锦昌,周俊东.靶向性基因治疗EBV阳性淋巴瘤的腺病毒载体的构建及初步鉴定[C].首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集.2007
[8].司少艳,隋延仿,张秀敏,李侠,冯凯.肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体的构建及体外生物学活性鉴定[J].中国肿瘤.2007
[9].周俊东,姜明红,卢大儒,吴锦昌.靶向性治疗EBV阳性淋巴瘤的腺病毒载体的构建及初步鉴定[J].南京医科大学学报(自然科学版).2007
[10].高建青,陈海靓,中川晋作,水口裕之,梁文权.整合素靶向性病毒载体对肿瘤细胞基因转导的促进作用[J].药学学报.2006
论文知识图
