导读:本文包含了凋亡蛋白酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白酶,凋亡,天冬,半胱氨酸,因子,尾蚴,蛋白。
凋亡蛋白酶论文文献综述
刘佳琳[1]（2018）在《P2X4过表达对帕金森病模型大鼠脑内凋亡蛋白酶的作用》一文中研究指出背景及目的:帕金森氏病(Parkinson’s Disease,PD)作为患病率仅次于老年性痴呆(Alzheimer’s Disease,AD)的神经退行性疾病,发病机制目前尚不明了。在既往研究中,认为是环境因素、遗传因素、衰老、氧化应激、线粒体功能衰竭、钙超载等多种因素协同作用的结果。近来,神经免疫炎症机制在PD发病中的作用受到了研究者们的广泛关注。对相关信号通路调控机制的研究,对阐明PD发病机制具有重要意义,可以为PD的防治提供方向,而ATP-P2X4R信号轴介导NLRP3炎性小体活化就是这些关键通路之一。明确ATP-P2X4R信号轴介导的神经免疫炎症机制在PD发病中的作用,过表达P2X4R基因可能通过上调P2X4R介导的信号通路的表达,增强PD的炎性反应,对DA能神经元的损伤作用增强,从侧面证明抑制P2X4R介导的炎性通路对PD的保护作用。探讨过表达P2X4基因对6-OHDA诱导的帕金森病(PD)大鼠模型中凋亡蛋白酶caspase-1表达的影响。揭示P2X4对PD发病机制等作用,为PD的防治提供一个新靶点。方法:120只体重约200-250g Wistar雄性大鼠随机分为6组:6-OHDA组;对照组;目的基因(RNA-P2X4)+6-OHDA组;单纯目的基因(RNA-P2X4)组;阴性病毒(P2X4-NC)+6-OHDA组;单纯阴性病毒(P2X4-NC)组。携带空载RNA的P2X4-NC慢病毒与上调P2X4表达的目的RNA-P2X4慢病毒经脑立体定位仪定向注射于大鼠左侧黑质,根据分组情况经脑立体定位仪于大鼠左侧黑质定向注射6-OHDA(8ug/2ul)或等量生理盐水(仅含0.2%抗坏血酸2ul)。模型建立后采用腹腔注射APO诱发旋转实验观察大鼠行为学变化,筛选成功PD大鼠。4周后予大鼠断头取脑,利用免疫组织荧光染色法检测各组大鼠脑组织黑质中TH阳性DA神经元数量变化情况,采用Western blot检测各组P2X4R蛋白、NLRP3蛋白、caspase-1蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测各组P2X4R、NLRP3、caspase-1 m RNA表达水平变化。结果:与P2X4-NC+6-OHDA组比较,RNA-P2X4+6-OHDA组P2X4R(1.099±0.05569vs 0.7821±0.02008,P(27)0.001)、NLRP3(0.9875±0.01932 vs 0.6645±0.01747,P(27)0.001)、caspase-1(0.9948±0.01788 vs 0.8276±0.04543,P(27)0.001)蛋白表达量均显着升高,差异有统计学意义。结论:在PD动物模型中,P2X4基因过表达可提高PD多巴胺能神经元模型中caspase-1蛋白表达水平,促进凋亡反应,有潜在的神经损害作用。P2X4在PD发生发展中发挥重要作用。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-18）
刘心睿[2]（2018）在《凋亡蛋白酶依赖的氧化应激在人U251胶质瘤细胞中的作用和机制研究》一文中研究指出研究背景和意义胶质瘤是临床最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,瘤细胞的无限生长和侵袭浸润是其最大的生物学特征,也是患者预后不良的最主要原因。活性氧(Reactive oxygen species,ROS)是机体正常氧代谢的副产物。ROS和氧化应激对胶质瘤的关系极其复杂,尚未完全阐明。观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平下胶质瘤增殖、周期、凋亡的生物学效应,对于阐明胶质瘤的发病机制和寻找新的临床治疗策略具有重要意义。利用基因芯片技术和生物信息学分析方法,从全转录水平或全DNA层面了解胶质瘤细胞的基因表达情况,筛选与胶质瘤疾病过程有关的基因表达集,为研究胶质瘤的发病机制、开发靶向性药物等提供了思路和线索。目的我们拟观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平对胶质瘤增殖、周期、凋亡等生物学效应的影响及机制,探索胶质瘤氧化应激水平和线粒体Caspase途径是否能作为胶质瘤治疗的潜在靶点。其次,我们分析了不同氧化应激状态下胶质瘤细胞全转录组水平的基因表达数据,从整体观察基因表达变化,筛选Caspsae 3抑制剂影响的基因集,为寻找靶向治疗胶质瘤的方法和药物等提供新的研究方向和策略。方法首先,体外培养人胶质瘤U251细胞系,用H2O2处理后,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡,四唑盐比色(MTT)法检测细胞增殖、免疫印迹法(Western blot,WB)检测细胞内凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP的表达;接下来,对H2O2处理的胶质瘤U251细胞系加适当浓度的Caspase 3抑制剂干预,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡、MTT法检测细胞增殖、WB检测凋亡相关蛋白的表达。利用NOISeq软件包筛选Caspase 3抑制剂在氧化应激状态下引起的胶质瘤细胞差异表达基因,对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析和药物富集分析。使用String在线工具对得到的差异表达基因进行蛋白与蛋白相互作用(Protein-protein interaction,PPI)关系预测,利用Cytoscape软件进行PPI网络图构建,使用cytoscape软件中的MCODE插件提取PPI网络中的子网络模块,对其进行功能分析;之后,利用webgestalt工具分别预测差异表达基因与微小RNA(micro RNA,mi RNA)和转录调控因子间的调控关系,并利用Cytoscape软件进行调控网络构建。结果(1)用超氧化物银离子探针(Dihydroethidium,DHE)测定终浓度100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤细胞内(O2.-)水平分别为(214.33±27.14)%、(589.52±35.17)%和(643.28±31.54)%,均显着高于对照组(P<0.05);且随着H2O2浓度的增加,细胞中(O2.-)水平逐渐升高(P<0.05)。(2)用终浓度为100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤U251细胞存活率为分别为(82.57±5.34)%、(23.38±6.27)%和(18.21±3.11)%,H2O2浓度越高,胶质瘤细胞存活率越低(P<0.05);(3)100μM组、300μM、500μM组胶质瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分别为(6.21±0.88)%和(10.71±0.42)%,(24.19±2.46)%和(19.59±2.33)%,(31.78±3.07)%和(37.18±4.20)%。H2O2浓度越高,细胞凋亡率越高(P<0.05)。其中100μM组胶质瘤细胞的凋亡率与对照组无显着差异(P>0.05),300μM、500μM组胶质瘤细胞的凋亡率显着高于对照组(P<0.05)。(4)100μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(28.79±3.64)%、(28.51±3.17)%和(46.67±2.16)%;300μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(21.35±1.37)%、(32.48±1.62)%和(50.69±3.73)%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占(41.54±4.78)%、(18.51±2.35)%和(43.82±2.42)%。随着H2O2浓度升高,G1期细胞较对照组显着减少(P<0.05),G2期的细胞显着增多(P<0.05),H2O2能引起胶质瘤细胞G2期阻滞。(5)H2O2处理的胶质瘤细胞内Caspase-3前体蛋白表达显着降低,Cleaved-PARP蛋白表达显着升高(P<0.05);且升高或降低程度与H2O2浓度存在剂量依赖关系。(6)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞的早期凋亡和晚期凋亡率分别为(4.95±0.89)%和(8.32±1.22)%,显着低于仅用300μM H2O2处理的细胞[(23.94±2.34)%和(17.55±2.78)%]和未加任何干预的对照组细胞[(6.71±0.69)%和(11.35±1.32)%](P<0.05)。H2O2组细胞凋亡率最高,其次为对照组,H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞凋亡率最低,Caspase 3抑制剂能显着降低H2O2诱导的胶质瘤细胞凋亡。(7)H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期、G2期和S期细胞分别占36.05%、16.91%和47.03%;H2O2组G1期、G2期和S期细胞分别占19.88%、33.64%和46.48%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占41.15%、14.19%和44.66%;各组S期细胞无显着差异(P>0.05),H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期细胞较H2O2组显着升高(P<0.05),而G2期细胞较H2O2组显着降低(P<0.05),Caspase 3抑制剂解除了H2O2引起的G2期阻滞。(8)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞内(O2.-)水平为(488.76±25.73)%,显着低于H2O2组的(728.17±33.65)%(P<0.05),高于对照组的(100.16±8.24)%(P<0.05)。Caspase 3抑制剂能降低H2O2处理的胶质瘤细胞内ROS水平。(9)共筛选出105个在氧化应激状态下Caspase 3抑制剂引起的与胶质瘤细胞增殖相关的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)和127个其他特异性DEGs。(10)GO分析显示与增殖相关的DEGs功能注释主要富集到细胞组分的形态发生(cellular component morphogenesis),参与的基因有FIS1、ATOH1、CCK、EZR、SSBP1和CTNNB1;受体介导的信号传导途径(Intracellular receptor-mediated signaling pathway),参与的基因有DNAJA1、CALR和CTNNB1;线粒体形态发生(Mitochondrion morphogenesis),参与的基因有FIS1和SSBP1;细胞大分子复合物亚基组织途径(Cellular macromolecular complex subunit organization),参与的基因有KIF2B、TUBB2A、SNRNP200、SNRPB、CALR和细胞器裂变(Organelle fission),参与的基因有KIF2B、FIS1、TUBB2A和DCTN3。;KEGG通路富集结果显示18个通路符合阈值要求并被显着富集,主要涉及Rho A活性调节(Regulation of Rho A activity)和Rho A信号通路(Rho A signaling pathway)、RAC1活性调节(Regulation of RAC1 activity)和RAC1信号通路(RAC1 signaling pathway)、RNA代谢(Metabolism of RNA)、蛋白质代谢(Metabolismof proteins)、雄激素受体(Androgen Receptor)、糖尿病途径(Diabetes pathways)、流感病毒感染(Influenza Infection)、细胞蛋白的凋亡裂解(Apoptotic cleavage of cellular proteins)、m RNA剪接-小通道通路(m RNA Splicing-Minor Pathway)、胰岛素合成与加工(Insulin Synthesis and Processing)、整合素(Alpha6 Beta4 Integrin)、细胞凋亡执行阶段(Apoptotic execution phase)等通路等;筛选出mi R-185、mi R-7和mi R-485-5P共3个mi RNA,与6个靶基因共同构成8个调控关系对;筛选出ETS2、NFKAPPAB、NFKB、AP1、CREL、OCT1、STAT5A、PAX3等共20个转录因子(Transcription factor,TF)与8个靶基因共同构成38个调控关系对。(11)其他127个特异性DEGs功能注释主要富集到蛋白质结合的调控(Positive regulation of protein binding),参与基因有CTHRC1、HERPUD1等;RNA聚合酶II启动子的转录调控(Transcription from RNA polymerase II promoter),参与基因有ZBTB32、NRARP等、骨骼肌细胞分化(Skeletal muscle cell differentiation),参与基因有NUPR1、LEMD2和ANKRD1;肺泡发育(Lung saccule development),参与基因有ASXL1和NKX2-1;磷脂代谢过程(Phospholipid metabolic process),参与基因有TAZ、KX2-1和LA2G4B。KEGG通路富集结果显示4个通路符合阈值要求并被显着富集,主要有糖胺聚糖的生物合成-硫酸软骨素/硫酸皮肤素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-chondroitin sulfate/dermatan sulfate)、糖胺聚糖的生物合成-硫酸肝素/肝素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-heparan sulfate/heparin)、氧化磷酸化反应(Oxidative phosphorylation)和金黄色葡萄球菌感染(Staphylococcus aureus infection)。构建的PPI网络包括82个节点和209个互作关系对;1个子网络模块包括19个节点和50个互作关系对。筛选出包括mi R-192、mi R-196、mi R-215、LET-7、mi R-299等在内共17个mi RNA,与26个靶基因构成105个调控关系对;STAT5、CEBPB、PAX6、PPAR、IRF、PPARG、CHX10、USF、CREBP1、E4BP4、HLF、PAX4共12个TF,与26个靶基因构成51个调控关系对。结论氧化应激通过线粒体-Caspase依赖性途径抑制人U251胶质瘤细胞的增殖、阻滞细胞周期进展并诱导细胞凋亡;Caspase 3抑制剂引起的氧化应激状态下胶质瘤细胞中等众多基因表达谱发生变化,特别是RPL5、PSMC5、RABGAp-TBC1D25、C1s等可能在胶质瘤的发病中起到关键作用,研究结果为未来研究胶质瘤的靶向治疗提供新的方向和策略。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-05-01）
郭海,宋爽,才秀莲[3]（2017）在《X连锁凋亡抑制蛋白和线粒体第二激活因子在锰诱导大鼠生精细胞凋亡蛋白酶表达中的调节作用》一文中研究指出目的:研究氯化锰导致的大鼠生精细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)表达中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和线粒体第二激活因子(Smac)的调节机制,探讨锰导致的雄性不育机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组,腹腔注射MnCl_2 4周和6周,免疫组织化学检测生精细胞caspase-9、Apaf-1、XIAP和Smac表达。结果:与对照组相比较,各组生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。同时间的高剂量组与低剂量组比较,同剂量的6周组与4周组比较,生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。各组caspase-9与Apaf-1表达呈正相关,XIAP与Smac表达呈负相关。结论:锰可促进生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达,抑制XIAP表达,导致细胞凋亡,产生雄性生殖毒性效应。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年05期）
许明,张泓,刘继生,尹秀婷,张健[4]（2017）在《电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C及凋亡蛋白酶激活因子-1表达的影响》一文中研究指出目的观察电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能及脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)及凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠60只,随机抽取36只,采用改良T_(10)脊髓横断法制作完全性脊髓损伤后神经源性膀胱模型,取24只成功模型分为模型组和电针组各12只,其余未造模大鼠24只随机分为假手术组和空白组各12只。于造模后第19天取次髎、中极、叁阴交、大椎行电针,连续7 d后行尿流动力学检测,TUNEL法测定细胞凋亡率,Western blotting测定脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白的表达情况。结果与空白组和假手术组比较,模型组和电针组膀胱最大容量及膀胱顺应性均明显降低(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力增加(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率显着升高(P<0.001);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,电针组的膀胱最大容量及膀胱顺应性明显增加(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力降低(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率明显降低(P<0.01);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C及Apaf-1蛋白表达量降低(P<0.05)。结论电针次髎、中极、叁阴交、大椎可改善完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能,其作用机制可能与脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1的表达下调,凋亡减少有关。(本文来源于《中国康复理论与实践》期刊2017年06期）
郭海,宋爽,王国秀,才秀莲[5]（2017）在《染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化》一文中研究指出目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显着升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显着降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显着升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显着降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年03期）
王秋霞,苏文强,关俊勇,郭爱疆,骆学农[6]（2016）在《猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达》一文中研究指出为了探究凋亡蛋白酶抑制剂基因在猪囊尾蚴生活过程中的作用,利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂基因,并将其克隆至原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(D E3),经IPTG诱导后,用SDS-PAGE进行初步分析,在53 ku处出现明显的蛋白条带,与预期结果一致。W estern-blot结果表明,重组融合蛋白能够与抗H is特异性抗体发生反应。凋亡蛋白酶抑制剂基因的成功表达为后续对其功能进行研究奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2016年11期）
凃璨[7]（2016）在《滋阴补肾法对衰老大鼠免疫功能及凋亡蛋白酶的影响》一文中研究指出目的:通过动物实验观察滋阴补肾法对衰老大鼠免疫功能及凋亡蛋白酶的影响,并初步探讨滋阴补肾法延缓衰老的可能机制。方法:1.分组:将健康Wistar大鼠40只随机分为四组,正常组(空白组/N组)、模型组(对照组/M组)、阳性对照组(维生素E组/P组)、滋阴补肾组(六味地黄治疗组/NK组),每组10只。2.造模及给药:M组、P组及NK组给予D-半乳糖100mg/kg·d腹腔注射,N组给予同等体积生理盐水注射。随后灌胃给药,P组给予维生素E0.027g/kg·d灌胃,NK组给予六味地黄丸3.24g/kg·d灌胃,N组和M组给予同样体积生理盐水灌胃。3.观察指标及检测方式:每周观察各组大鼠的一般状态并称取体质量,根据体质量调整用药剂量。连续8周。最后一次给药2小时后,采大鼠眼眶血1.5ml。取0.5ml血应用全自动生化分析仪测定大鼠尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)。另1ml大鼠血采用硝酸酶还原法(Griess)测定一氧化氮(NO)及一氧化氮合成酶(NOS)值。麻醉并处死大鼠后,剥离各组大鼠胸腺及脾脏称重,胸腺或脾脏重量与体重的百分比分别为免疫器官指数。取各组大鼠肾脏行免疫组化:首先包埋组织石蜡中,切片,脱蜡,EDTA抗原修复液盒中行抗原修复,再将切片放入3%过氧化氢溶液中阻断内源性过氧化物酶,3%BSA封闭,后加入配置好的一抗Bcl-2、Bax及Caspase-3,然后DAB显色并复染细胞核,最后脱水,中性树胶封片,并行显微镜镜下检查,采集图像。制定免疫组化评分评价各组大鼠肾脏组织中凋亡蛋白显像及强弱的差异。统计学分析行正态和方差齐性检验后处理组间采用方差分析,两两比较用LSD-t检验。结果:1.一般情况:N组大鼠摄食正常,毛发浓密有光泽,活泼好动,不易捉取;M组大鼠逐步出现皮毛萎黄,大便稀溏,饮食明显减少,爬行跑动缓慢,反应迟钝等与自然衰老大鼠类似的症状;P组和NK情况介于两者之间。体质量方面,第3周时组间差异具有统计学意义(P<0.05),至第6周时组间差异有显着统计学意义(P<0.01);至第八周结束时,组间差异显着(P<0.01),M组(345.30±12.42)与N组(375.80±5.87)、M组与NK组(371.45±8.48)组间差异显着(P<0.01)。NK组与N组、NK组与P组有统计学差异(P<0.05)。2.各组大鼠用药后肾功能指标比较:BUN(mmol/L)、Scr(μmol/L)两项指标组间比较有显着统计学差异(P<0.01)。再经两两比较示M组(17.3±4.12,101.12±25.67)与N组(7.34±0.55,33.75±5.61)、M组与NK组(12.5±2.31,85.67±17.65)有显着统计学差异(P<0.01),NK组与N组有统计学差异(P<0.05),而NK组与P组(13.1±2.54,87.58±18.97)无明显统计学差异。3.免疫功能:3.1免疫器官指数方面,8周后各组胸腺指数有统计学差异(P<0.05),且两两比较发现M组(0.99±0.27)与N组(1.34±0.19)比较有统计学差异(P<0.05)。脾脏指数差异有统计学意义(P<0.05),且M组(1.67±0.44)与N组(2.19±0.68)比较有显着统计学差异(P<0.01),M组与NK组(2.06±0.52)比较有统计学差异(P<0.05)。3.2各组大鼠血清一氧化氮、一氧化氮合成酶指标的比较:各组一氧化氮(μmol/L)含量差异显着(P<0.01)。其中,M组一氧化氮含量(253.5±31.8)较N组(154.3±32.8)、P组(192.5±35.6)显着升高(P<0.01),较NK组(216.5±32.2)升高(P<0.05);与N组相比,P组及NK组一氧化氮升高也具有统计学意义(P<0.05),而P组与NK组之间比较无明显差异(P>0.05)。各组一氧化氮合成酶(μmol/L)含量具有统计学差异(P<0.05)。其中,M组一氧化氮合成酶含量(44.4±6.7)较N组(29.8±5.6)显着升高(P<0.01),较P组(32.6±4.8)、NK组(33.2±5.1)升高(P<0.05);与N组相比,P组及NK组一氧化氮合成酶升高也具有统计学意义(P<0.05),而P组与NK组之间比较无明显统计学差异(P>0.05)。4.各组大鼠肾脏Bcl-2、Bax及Caspase-3的比较:Bcl-2表达方面,模型组较正常组、阳性对照组、滋阴补肾组表达明显减少,细胞染色浅,阳性细胞数目少,评分有显着统计学差异(P<0.01),而滋阴补肾组与正常组无明显统计学差异(P>0.05)。Bax表达方面,模型组较正常组、阳性对照组、滋阴补肾组表达明显增多,细胞染色深,阳性细胞数目多,评分有显着统计学差异(P<0.01),而滋阴补肾组与阳性对照组无明显差异(P>0.05)。Caspase-3方面,模型组较正常组、滋阴补肾组表达明显增多,细胞染色深,阳性细胞数目多,评分有显着统计学差异(P<0.01),且滋阴补肾组与阳性对照组有统计学差异(P<0.05)。结论:衰老大鼠体质量、肾功能及免疫器官指数等均较正常大鼠减少,相反,一氧化氮、一氧化氮合成酶的分泌及细胞凋亡较正常大鼠增多,而六味地黄丸为代表的滋阴补肾法可延缓衰老大鼠体质量、肾功能及免疫器官指数的下降,抑制一氧化氮、一氧化氮合成酶的分泌及细胞过度凋亡。因而滋阴补肾法可能对衰老大鼠的免疫功能产生一定影响,进而延缓其衰老的进程。(本文来源于《湖北中医药大学》期刊2016-05-30）
黄顺德,朱浩图,李展宇[8]（2016）在《强噪声对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及凋亡蛋白酶的作用》一文中研究指出目的探讨强噪声是否能诱导大鼠的耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)的凋亡,噪声对于凋亡蛋白酶的诱发作用以及SGC的凋亡与凋亡蛋白酶半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号转导之间的关系。方法选用健康雄性白色大鼠40只,随机分成4组,每组10只,将实验组动物暴露于120 d B SPL 4 k Hz窄带噪声中4 h后,分别测试在噪声刺激停止后1 d、4 d、14 d及对照组大鼠的听性脑干反应(ABR)。通过透射电镜下观察以及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测SGC的凋亡,免疫组化法检测Caspase-3的表达水平。结果本实验的噪声条件,可以引起大鼠暂时或永久性的听阈位移,通过透射电镜的观察,发现实验组中SGC出现了凋亡细胞的特征性相关改变。实验组SGC中的TUNEL染色有明显增强,Caspase-3的表达明显增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论强噪声能够诱导发生SGC的凋亡,并且对Caspase-3有诱发作用,SGC凋亡与Caspase-3的激活有着密切的相关性。(本文来源于《广东医学》期刊2016年08期）
向长港[9]（2015）在《早期自然流产蜕膜及绒毛中钙网蛋白和凋亡蛋白酶Caspase-3的表达及意义研究》一文中研究指出目的通过检测比较研究,分析在早期自然流产蜕膜及绒毛中钙网蛋白(CRT)和凋亡蛋白酶Caspase-3表达与定位,探讨两者在早期自然流产(ESA)中的意义。方法以该院2012年5月~2014年10月接诊并行人工流产的患者90例为研究对象,根据流产情况分为先兆组(先兆流产组42例)和稽留组(稽留流产48例),并以60例正常早孕并要求行人工流产者为对照组,术后采集所有对象的蜕膜及绒毛组织,HE染色比较形态学变化,对CRT和Caspase-3水平进行检测并研究相关性。结果 ESA患者蜕膜及绒毛钙网蛋白及Caspase-3表达均高于对照组;稽留组钙网蛋白及Caspase-3的表达均高于先兆组;钙网蛋白与Caspase-3呈正相关。结论钙网蛋白及Caspase-3异常表达可能参与ESA的发生机制,高表达的钙网蛋白也可作为判断是否有自然流产危险的标志之一。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2015年30期）
贾明旭,陈吉[10]（2015）在《凋亡蛋白酶活化因子-1与肿瘤相关性的研究进展》一文中研究指出凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)作为细胞凋亡的核心因子,在线粒体凋亡途径中起着极其关键的作用.Apaf-1启动子甲基化和杂合性缺失是肿瘤发生的最主要因素,Apaf-1表达下调与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,其表达情况可作为肿瘤浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分化不良等预后不佳的标志物,Apaf-1也可作为抗癌治疗和判断预后的靶分子.对其深入研究将有助于对抗肿瘤药物的研制.本文就Apaf-1的生化结构和功能、信号转导通路以及近年来关于Apaf-1在多种肿瘤中的表达、肿瘤的发生机制及其在肿瘤的耐药与治疗中的作用等方面的最新研究进展作一综述.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2015年23期）
凋亡蛋白酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景和意义胶质瘤是临床最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,瘤细胞的无限生长和侵袭浸润是其最大的生物学特征,也是患者预后不良的最主要原因。活性氧(Reactive oxygen species,ROS)是机体正常氧代谢的副产物。ROS和氧化应激对胶质瘤的关系极其复杂,尚未完全阐明。观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平下胶质瘤增殖、周期、凋亡的生物学效应,对于阐明胶质瘤的发病机制和寻找新的临床治疗策略具有重要意义。利用基因芯片技术和生物信息学分析方法,从全转录水平或全DNA层面了解胶质瘤细胞的基因表达情况,筛选与胶质瘤疾病过程有关的基因表达集,为研究胶质瘤的发病机制、开发靶向性药物等提供了思路和线索。目的我们拟观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平对胶质瘤增殖、周期、凋亡等生物学效应的影响及机制,探索胶质瘤氧化应激水平和线粒体Caspase途径是否能作为胶质瘤治疗的潜在靶点。其次,我们分析了不同氧化应激状态下胶质瘤细胞全转录组水平的基因表达数据,从整体观察基因表达变化,筛选Caspsae 3抑制剂影响的基因集,为寻找靶向治疗胶质瘤的方法和药物等提供新的研究方向和策略。方法首先,体外培养人胶质瘤U251细胞系,用H2O2处理后,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡,四唑盐比色(MTT)法检测细胞增殖、免疫印迹法(Western blot,WB)检测细胞内凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP的表达;接下来,对H2O2处理的胶质瘤U251细胞系加适当浓度的Caspase 3抑制剂干预,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡、MTT法检测细胞增殖、WB检测凋亡相关蛋白的表达。利用NOISeq软件包筛选Caspase 3抑制剂在氧化应激状态下引起的胶质瘤细胞差异表达基因,对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析和药物富集分析。使用String在线工具对得到的差异表达基因进行蛋白与蛋白相互作用(Protein-protein interaction,PPI)关系预测,利用Cytoscape软件进行PPI网络图构建,使用cytoscape软件中的MCODE插件提取PPI网络中的子网络模块,对其进行功能分析;之后,利用webgestalt工具分别预测差异表达基因与微小RNA(micro RNA,mi RNA)和转录调控因子间的调控关系,并利用Cytoscape软件进行调控网络构建。结果(1)用超氧化物银离子探针(Dihydroethidium,DHE)测定终浓度100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤细胞内(O2.-)水平分别为(214.33±27.14)%、(589.52±35.17)%和(643.28±31.54)%,均显着高于对照组(P<0.05);且随着H2O2浓度的增加,细胞中(O2.-)水平逐渐升高(P<0.05)。(2)用终浓度为100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤U251细胞存活率为分别为(82.57±5.34)%、(23.38±6.27)%和(18.21±3.11)%,H2O2浓度越高,胶质瘤细胞存活率越低(P<0.05);(3)100μM组、300μM、500μM组胶质瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分别为(6.21±0.88)%和(10.71±0.42)%,(24.19±2.46)%和(19.59±2.33)%,(31.78±3.07)%和(37.18±4.20)%。H2O2浓度越高,细胞凋亡率越高(P<0.05)。其中100μM组胶质瘤细胞的凋亡率与对照组无显着差异(P>0.05),300μM、500μM组胶质瘤细胞的凋亡率显着高于对照组(P<0.05)。(4)100μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(28.79±3.64)%、(28.51±3.17)%和(46.67±2.16)%;300μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(21.35±1.37)%、(32.48±1.62)%和(50.69±3.73)%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占(41.54±4.78)%、(18.51±2.35)%和(43.82±2.42)%。随着H2O2浓度升高,G1期细胞较对照组显着减少(P<0.05),G2期的细胞显着增多(P<0.05),H2O2能引起胶质瘤细胞G2期阻滞。(5)H2O2处理的胶质瘤细胞内Caspase-3前体蛋白表达显着降低,Cleaved-PARP蛋白表达显着升高(P<0.05);且升高或降低程度与H2O2浓度存在剂量依赖关系。(6)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞的早期凋亡和晚期凋亡率分别为(4.95±0.89)%和(8.32±1.22)%,显着低于仅用300μM H2O2处理的细胞[(23.94±2.34)%和(17.55±2.78)%]和未加任何干预的对照组细胞[(6.71±0.69)%和(11.35±1.32)%](P<0.05)。H2O2组细胞凋亡率最高,其次为对照组,H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞凋亡率最低,Caspase 3抑制剂能显着降低H2O2诱导的胶质瘤细胞凋亡。(7)H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期、G2期和S期细胞分别占36.05%、16.91%和47.03%;H2O2组G1期、G2期和S期细胞分别占19.88%、33.64%和46.48%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占41.15%、14.19%和44.66%;各组S期细胞无显着差异(P>0.05),H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期细胞较H2O2组显着升高(P<0.05),而G2期细胞较H2O2组显着降低(P<0.05),Caspase 3抑制剂解除了H2O2引起的G2期阻滞。(8)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞内(O2.-)水平为(488.76±25.73)%,显着低于H2O2组的(728.17±33.65)%(P<0.05),高于对照组的(100.16±8.24)%(P<0.05)。Caspase 3抑制剂能降低H2O2处理的胶质瘤细胞内ROS水平。(9)共筛选出105个在氧化应激状态下Caspase 3抑制剂引起的与胶质瘤细胞增殖相关的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)和127个其他特异性DEGs。(10)GO分析显示与增殖相关的DEGs功能注释主要富集到细胞组分的形态发生(cellular component morphogenesis),参与的基因有FIS1、ATOH1、CCK、EZR、SSBP1和CTNNB1;受体介导的信号传导途径(Intracellular receptor-mediated signaling pathway),参与的基因有DNAJA1、CALR和CTNNB1;线粒体形态发生(Mitochondrion morphogenesis),参与的基因有FIS1和SSBP1;细胞大分子复合物亚基组织途径(Cellular macromolecular complex subunit organization),参与的基因有KIF2B、TUBB2A、SNRNP200、SNRPB、CALR和细胞器裂变(Organelle fission),参与的基因有KIF2B、FIS1、TUBB2A和DCTN3。;KEGG通路富集结果显示18个通路符合阈值要求并被显着富集,主要涉及Rho A活性调节(Regulation of Rho A activity)和Rho A信号通路(Rho A signaling pathway)、RAC1活性调节(Regulation of RAC1 activity)和RAC1信号通路(RAC1 signaling pathway)、RNA代谢(Metabolism of RNA)、蛋白质代谢(Metabolismof proteins)、雄激素受体(Androgen Receptor)、糖尿病途径(Diabetes pathways)、流感病毒感染(Influenza Infection)、细胞蛋白的凋亡裂解(Apoptotic cleavage of cellular proteins)、m RNA剪接-小通道通路(m RNA Splicing-Minor Pathway)、胰岛素合成与加工(Insulin Synthesis and Processing)、整合素(Alpha6 Beta4 Integrin)、细胞凋亡执行阶段(Apoptotic execution phase)等通路等;筛选出mi R-185、mi R-7和mi R-485-5P共3个mi RNA,与6个靶基因共同构成8个调控关系对;筛选出ETS2、NFKAPPAB、NFKB、AP1、CREL、OCT1、STAT5A、PAX3等共20个转录因子(Transcription factor,TF)与8个靶基因共同构成38个调控关系对。(11)其他127个特异性DEGs功能注释主要富集到蛋白质结合的调控(Positive regulation of protein binding),参与基因有CTHRC1、HERPUD1等;RNA聚合酶II启动子的转录调控(Transcription from RNA polymerase II promoter),参与基因有ZBTB32、NRARP等、骨骼肌细胞分化(Skeletal muscle cell differentiation),参与基因有NUPR1、LEMD2和ANKRD1;肺泡发育(Lung saccule development),参与基因有ASXL1和NKX2-1;磷脂代谢过程(Phospholipid metabolic process),参与基因有TAZ、KX2-1和LA2G4B。KEGG通路富集结果显示4个通路符合阈值要求并被显着富集,主要有糖胺聚糖的生物合成-硫酸软骨素/硫酸皮肤素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-chondroitin sulfate/dermatan sulfate)、糖胺聚糖的生物合成-硫酸肝素/肝素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-heparan sulfate/heparin)、氧化磷酸化反应(Oxidative phosphorylation)和金黄色葡萄球菌感染(Staphylococcus aureus infection)。构建的PPI网络包括82个节点和209个互作关系对;1个子网络模块包括19个节点和50个互作关系对。筛选出包括mi R-192、mi R-196、mi R-215、LET-7、mi R-299等在内共17个mi RNA,与26个靶基因构成105个调控关系对;STAT5、CEBPB、PAX6、PPAR、IRF、PPARG、CHX10、USF、CREBP1、E4BP4、HLF、PAX4共12个TF,与26个靶基因构成51个调控关系对。结论氧化应激通过线粒体-Caspase依赖性途径抑制人U251胶质瘤细胞的增殖、阻滞细胞周期进展并诱导细胞凋亡;Caspase 3抑制剂引起的氧化应激状态下胶质瘤细胞中等众多基因表达谱发生变化,特别是RPL5、PSMC5、RABGAp-TBC1D25、C1s等可能在胶质瘤的发病中起到关键作用,研究结果为未来研究胶质瘤的靶向治疗提供新的方向和策略。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
凋亡蛋白酶论文参考文献
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