导读:本文包含了内皮细胞系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:shRNA,M2型瞬时受体电位离子通道,PMVEC,慢病毒载体
内皮细胞系论文文献综述
梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军[1]（2019）在《稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定》一文中研究指出应用短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),对其M2型瞬时受体电位(TRPM2)基因进行干扰,以建立稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株。结果表明,正常PMVEC对胰酶的最大耐受浓度和嘌呤霉素最小致死剂量分别为0.4μg/mL和0.6μg/mL;然后加入0.6、2.0、4.0、8.0μg/mL嘌呤霉素筛选稳定抑制TRPM2表达的shRNA TRPM2 PMVEC株,结果在嘌呤霉素达到8μg/mL时该细胞株仍细胞生长良好; Semi-quantitative PCR和Western blot对获得阳性细胞株进行TRPM2基因和蛋白表达的检测显示, shRNA TRPM2阳性PMVEC的TRPM2基因和蛋白表达相对量显着低于阴性对照和正常对照组(P<0.01)。该研究通过shRNA慢病毒载体成功建立了稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株,为进一步开展TRPM2在流感病毒诱导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制奠定了基础。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2019年03期）
刁婷婷,田骋,王洪亮,姜玉珍[2]（2018）在《淫羊藿苷通过VEGF通路对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞系RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的调节作用》一文中研究指出目的:探索淫羊藿苷对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法:MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;蛋白印迹检测VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平。结果:与对照组相比,缺氧组细胞增殖明显升高,侵袭和迁移能力明显增强(P<0. 05)。淫羊藿苷处理缺氧组细胞后,细胞增殖能力明显下降,侵袭和迁移能力明显减弱(P<0. 05)。而且,缺氧组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平显着高于正常组(P<0. 01)。与缺氧组相比,缺氧加药组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平明显降低(P<0. 01)。结论:淫羊藿苷通过VEGF通路抑制缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2018年12期）
程科,刘洪,张矛,赵渝,罗鸿[3]（2017）在《低氧增加人皮肤微血管内皮细胞系迁移并促进凋亡》一文中研究指出目的研究低氧环境对人皮肤微血管内皮细胞(HDMEC)迁移、凋亡及相关因子HIF-1α、VEGF、i NOS基因及蛋白表达的影响。方法低氧培养人微血管内皮细胞,分为常氧组(对照组)和低氧组(Co Cl2模拟化学低氧)。CCK-8细胞生存实验确定合适处理浓度(200μmol/L Co Cl2),划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞技术观察细胞凋亡;用RT-PCR和Western blot技术检测HIF-1α、VEGF、i NOS mRNA和蛋白表达。结果与常氧组比较,低氧组细胞迁移能力增加(P<0.05),凋亡增多(P<0.05),均呈时间依赖性。低氧组HIF-1α、HIF-1β、VEGF、i NOS mRNA表达较常氧组比较均增加(P<0.05),HIF-1α、VEGF、i NOS蛋白表达较常氧组比较均增加(P<0.05),具有一定时间依赖性。结论低氧能增强人皮肤微血管内皮细胞迁移能力,并促进其细胞凋亡,其可能机制与HIF-1α、VEGF、i NOS蛋白表达升高有关。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2017年10期）
袁东,周栋,张安平,李志勇,张亚敏[4]（2017）在《骨膜蛋白siRNA转染抑制ox-LDL诱导的人主动脉内皮细胞系损伤》一文中研究指出目的探讨骨膜蛋白(Postn)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞系(HAECs)损伤的影响及其作用机制。方法将HAECs随机分为4组:对照组、ox-LDL组、Postn siRNA组和negative siRNA组。RT-q PCR检测mRNA水平;Western blot检测蛋白表达;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;EMSA检测NF-κB的DNA结合能力。结果与对照组相比,ox-LDL组Postn的mRNA和蛋白水平显着提高(P<0.05);细胞增殖能力降低(P<0.05);细胞凋亡率升高(P<0.05);VCAM1、ICAM1、E-selectin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65和p-IκB-α的蛋白表达水平显著上调(P<0.05),且NF-κB的DNA结合能力提高(P<0.05),Postn siRNA转染能够逆转以上结果。结论 Postn siRNA转染能够抑制ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,这可能与抑制NF-κB信号通路有关。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2017年07期）
胡志良[5]（2017）在《IL-8对人脐静脉内皮细胞系（HUVEC）功能影响的研究》一文中研究指出背景冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary atherosclerotic heart disease),简称冠心病,是引起人类死亡的主要原因之一。冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变与血管内皮细胞增殖、炎症细胞浸润密切相关,进而出现管腔狭窄或阻塞,造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病。临床症状与疾病程度有明显相关性,患者可不同程度的表现心前区不适、心悸、心绞痛,甚至心力衰竭、猝死。白细胞介素8(Interleukin-8,IL-8)是一种多细胞源性细胞因子,可由浸润的单核细胞、巨噬细胞及活化的内皮细胞分泌,进一步募集中性粒细胞聚集、诱导粘附分子及趋化因子表达,以对抗感染的病原菌和组织损伤。研究表明冠心病患者外周血IL-8水平明显高于健康对照者,且急性期患者高于缓解期患者,IL-8的表达水平与冠状动脉狭窄程度呈现正相关。血管粘附分子-1(VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)是粘附分子家族中的重要成员,可介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间相互作用,进而参与细胞增值、迁移等功能的调控。研究表明,冠心病患者伴随细胞粘附分子表达增加,其随访死亡率明显高于粘附分子表达正常的患者。本实验拟采用人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)为模型,在体外培养及基础上分析IL-8对血管内皮细胞多种炎症细胞因子分泌的影响,如IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α等,同时分析IL-8对HUVEC细胞粘附分子表达的影响,通过阻断IL-8R,进一步探讨IL-8对血管内皮细胞功能影响的机制,为阐述冠心病发病机制及阻断IL-8/IL-8R通路治疗冠心病提供一定理论依据。目的本实验拟采用人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)为模型,分析IL-8对血管内皮细胞多种炎症细胞因子分泌的影响,同时分析IL-8对HUVEC细胞粘附分子表达的影响,通过阻断IL-8R,进一步探讨IL-8对血管内皮细胞功能影响的机制,为阐述冠心病发病机制及阻断IL-8/IL-8R通路治疗冠心病提供一定理论依据。方法1.IL-8刺激HUVEC细胞增殖检测:分别采用不同浓度梯度包括1ng/ml、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml浓度IL-8刺激HUVEC细胞,24h后观察细胞形态,并用MTT法检测细胞增殖情况。2.ELISA法检测HUVEC细胞炎症细胞因子分泌:选取HUVEC细胞铺板,每孔1ml,细胞浓度5×105/ml,加入4ng/ml浓度IL-8刺激24h,采用ELISA法检测培养上清IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α浓度。3.免疫荧光结合激光共聚焦检测HUVEC细胞粘附分子表达:HUVEC细胞经IL-8刺激后,采用免疫荧光结合激光共聚焦检测HUVEC细胞VCAM-1和ICAM-1表达情况。4.IL-8R抗体抑制HUVEC细胞炎症因子分泌:在培养体系中加入IL-8后,再加入IL-8R抗体,以封闭IL-8R进而阻断IL-8的结合。刺激后采用采用ELISA法检测培养上清IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α浓度。5.IL-8R抗体抑制HUVEC细胞粘附分子表达:在培养体系中加入IL-8后,再加入IL-8R抗体,以封闭IL-8R进而阻断IL-8的结合。采用免疫荧光结合激光共聚焦检测HUVEC细胞VCAM-1和ICAM-1表达情况。6.统计学方法:计量数据以均数加减标准差()表示,两组间差异比较采用t检验。检验水准α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。结果1.IL-8刺激HUVEC细胞增殖:采用不同浓度梯度包括1ng/ml、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml浓度IL-8刺激HUVEC细胞,在IL-8浓度小于8ng/ml时,随着IL-8浓度增加,HUVEC细胞增殖率呈现上升趋势。2.IL-8刺激HUVEC细胞炎症因子分泌:HUVEC细胞经IL-8刺激后,培养上清中IL-4和IL-6浓度分别为(1.62±0.33)ng/ml和(4.23±1.03)ng/ml,均高于空白组上清IL-4和IL-6浓度,且有统计学差异;刺激后上清IL-2、IFN-γ和TNF-α浓度分别为(0.54±0.16)ng/ml、(0.88±0.22)ng/ml和(0.36±0.10)ng/ml,与空白组相比无统计学差异。3.IL-8刺激HUVEC细胞粘附分子表达:HUVEC细胞经IL-8刺激后,细胞表面VCAM-1和ICAM-1表达增加。4.IL-8R抗体抑制HUVEC细胞炎症因子分泌:加入IL-8R受体阻断后培养上清IL-4和IL-6浓度为(0.79±0.10)ng/ml和(1.52±0.12)ng/ml,均低于未加入IL-8R抗体组IL-4和IL-6浓度(1.62±0.33)ng/ml和(4.23±1.03)ng/ml,且有统计学差异。加入IL-8R受体阻断后培养上清IL-2、IFN-γ、TNF-α浓度分别为(0.36±0.06)ng/ml、(0.81±0.12)ng/ml和(0.31±0.14)ng/ml,与为加入抗体组相比无统计学差异。5.IL-8R抗体抑制HUVEC细胞粘附分子表达:加入IL-8R抗体组VCAM和ICAM相对荧光强度分别为(15.71±5.17)和(34.26±5.34),未加入IL-8R抗体组VCAM和ICAM相对荧光强度分别为(103.11±11.53)和(61.99±9.36),后者较前组相比两个粘附分子表达均增加,且有统计学差异。结论1.IL-8能刺激人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)增殖,且能促进其炎症因子IL-4、IL-6的分泌,同时促进其粘附分子VCAM-1和ICAM-1表达。2.IL-8主要通过与IL-8R受体结合进而影响HUVEC细胞功能,采用IL-8R抗体阻断可抑制HUVEC细胞IL-4、IL-6分泌及VCAM-1和ICAM-1表达。(本文来源于《新乡医学院》期刊2017-03-01）
林琳,李阳,刘云奇,张文波,殷胜利[6]（2016）在《CTSB对人脐静脉血管内皮细胞系增殖及凋亡的影响》一文中研究指出目的:探索组织蛋白酶B(CTSB)对人脐静脉血管内皮细胞系(HUVEC)增殖及凋亡的影响。方法:采用细胞转染法得到慢病毒空载体转染HU-MOCK细胞及CTSB过表达的HU-CTSB细胞,与正常的HUVEC细胞进行比较。采用MTT法检测HUVEC增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法检测Bal-2/Bax及Caspase家族(Caspase-3/9)的表达情况。结果:HU-CTSB组各时间点HUVEC的增殖率明显低于其他两组,且差异具有统计学意义(P<0.05);HU-CTSB组的HUVEC早期凋亡率(右下象限)和晚期凋亡率(右上象限)显着高于HUVEC组和HU-MOCK组,且组间差异具有统计学意义(P<0.05);HU-CTSB组的抑制凋亡蛋白Bcl-2表达量明显低于其他两组,且促凋亡蛋白Bax表达量显着高于其他两组,差异均具有统计学意义(P<0.05);HU-CTSB组caspases-3和caspases-9的活化片段显着高于其他两组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:CSTB通过激活Caspase-3/9信号通路来上调Bax,并下调Bal-2,显着抑制HUVEC的增殖,并促进其凋亡,进而影响心血管疾病的发展。。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年04期）
陆宇,刘硕硕[7]（2015）在《婴幼儿血管瘤源性血管内皮细胞系XPTS-1中p-Akt及Bcl-xL的表达及意义》一文中研究指出目的观察活化的蛋白激酶B(p-Akt)及B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-x L)在婴幼儿血管瘤源性血管内皮细胞系(Hem EC)XPTS-1中的表达变化并探讨其意义。方法取处于对数生长期的XPTS-1细胞,经特异性PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002处理的XPTS-1作为实验组,未经处理的XPTS-1作为对照组,采用流式细胞仪检测两组细胞周期分布和凋亡率,应用Western blotting法检测p-Akt和Bcl-x L在各组中的表达。结果实验组G0/G1期细胞比例明显增加(P<0.01),S期和G2/M期细胞明显减少(P<0.05);实验组细胞凋亡率高于对照组(P<0.01);实验组p-Akt和Bcl-x L表达均比对照组明显降低(P均<0.01)。结论 p-Akt及Bcl-x L在婴幼儿血管瘤细胞中的表达明显降低,二者可能在XPTS-1细胞凋亡中发挥重要作用。(本文来源于《山东医药》期刊2015年33期）
王琦,王弘凯,刘丽君,何菲,汪克建[8]（2015）在《高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系产生炎性因子》一文中研究指出目的研究高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系(HBMECs)产生炎性因子及其机制。方法以相同渗透压的甘露醇为对照,高浓度尿素(25 mmol/L)干预HBMECs 3、6、12和24 h后,免疫荧光法观察细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α、i NOS、环氧合酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)、核因子κB(NF-κB)/P65和p-P65的表达水平。一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞NO含量。结果高浓度尿素增强细胞内TNF-α和i NOS表达。细胞TNF-α、COX-2和p-P65蛋白水平在3和6 h明显高于对照组(P<0.01);i NOS蛋白水平持续增高(P<0.01)。NO含量在3 h明显增多(P<0.05)。结论高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞产生炎性因子。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2015年02期）
李熠,匡双玉,尹凯,匡稳定,桂庆军[9]（2014）在《脂联素减轻高糖诱导的人血管内皮细胞系损伤》一文中研究指出目的观察脂联素(APN)对高糖诱导血管内皮细胞系损伤的保护作用及NF-κB与LOX-1蛋白表达在其中的作用。方法 30 mmol/LD-葡萄糖作用于HUVEC-12(人脐静脉内皮细胞系),不同浓度的脂联素(10、20和40μg/m L)作用48 h及20μg/m L脂联素作用不同时间(12、24、48和72 h)后,倒置相差显微镜观察内皮细胞形态,Western blot检测核转录因子NF-κB和LOX-1蛋白表达,间接免疫荧光法检测NF-κB核转位情况。结果脂联素作用于D-葡萄糖诱导的HUVEC-12,内皮细胞形态改善,折光性增强,胞内颗粒物减少,细胞排列相对规整;同时,LOX-1蛋白表达下调(P<0.05),NF-κB活性降低(P<0.05),并呈现时间和浓度依赖性(n=3,P<0.05)。结论脂联素可能通过NF-κB信号通路引起LOX-1蛋白表达下调,从而发挥其对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2014年10期）
熊斌,郭云亮,谭岩,方艳秋,付嘉[10]（2014）在《用于体外实验的内皮细胞系研究进展》一文中研究指出所有的血管,包括从最大的动脉和静脉到最小的毛细血管后微静脉,其内表面都衬贴着内皮细胞。这些内皮细胞的功能很大程度上依赖于细胞的定位以及相应血管的大小〔1〕。内皮细胞不只是被动的屏障,还可主动转运小分子、巨分子和激素,并能降解脂蛋白颗粒〔1〕。在血压调节、血液凝固和纤维蛋白溶解、炎细胞从血管进入靶组织所进行的黏附和移行、肿瘤血管发生和新生血管形成中内皮细胞进一步起主要作用,所以有人提出内皮细胞是一种条件性的固有免疫细胞〔2〕。另外有研究(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2014年14期）
内皮细胞系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探索淫羊藿苷对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法:MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;蛋白印迹检测VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平。结果:与对照组相比,缺氧组细胞增殖明显升高,侵袭和迁移能力明显增强(P<0. 05)。淫羊藿苷处理缺氧组细胞后,细胞增殖能力明显下降,侵袭和迁移能力明显减弱(P<0. 05)。而且,缺氧组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平显着高于正常组(P<0. 01)。与缺氧组相比,缺氧加药组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平明显降低(P<0. 01)。结论:淫羊藿苷通过VEGF通路抑制缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
内皮细胞系论文参考文献
[1].梁亭,李佩瑶,罗强,王少华,李军.稳定抑制TRPM2基因表达肺微血管内皮细胞系的构建与鉴定[J].中国细胞生物学学报.2019
[2].刁婷婷,田骋,王洪亮,姜玉珍.淫羊藿苷通过VEGF通路对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞系RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的调节作用[J].中国免疫学杂志.2018
[3].程科,刘洪,张矛,赵渝,罗鸿.低氧增加人皮肤微血管内皮细胞系迁移并促进凋亡[J].基础医学与临床.2017
[4].袁东,周栋,张安平,李志勇,张亚敏.骨膜蛋白siRNA转染抑制ox-LDL诱导的人主动脉内皮细胞系损伤[J].基础医学与临床.2017
[5].胡志良.IL-8对人脐静脉内皮细胞系（HUVEC）功能影响的研究[D].新乡医学院.2017
[6].林琳,李阳,刘云奇,张文波,殷胜利.CTSB对人脐静脉血管内皮细胞系增殖及凋亡的影响[J].现代生物医学进展.2016
[7].陆宇,刘硕硕.婴幼儿血管瘤源性血管内皮细胞系XPTS-1中p-Akt及Bcl-xL的表达及意义[J].山东医药.2015
[8].王琦,王弘凯,刘丽君,何菲,汪克建.高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系产生炎性因子[J].基础医学与临床.2015
[9].李熠,匡双玉,尹凯,匡稳定,桂庆军.脂联素减轻高糖诱导的人血管内皮细胞系损伤[J].基础医学与临床.2014
[10].熊斌,郭云亮,谭岩,方艳秋,付嘉.用于体外实验的内皮细胞系研究进展[J].中国老年学杂志.2014
标签：shRNA; M2型瞬时受体电位离子通道; PMVEC; 慢病毒载体;