导读:本文包含了尿卟啉原甲基化酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:尿卟啉原Ⅲ甲基化酶,红色荧光报告蛋白,谷氨酸-1-半醛氨基转移酶,共同表达
尿卟啉原甲基化酶论文文献综述
叶爱华,张宽亮,陈宗梅,荣亮,汪苗[1]（2010）在《表达大肠杆菌谷氨酸-1-半醛氨基转移酶对红色荧光报告蛋白尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的影响》一文中研究指出谷氨酸-1-半醛氨基转移酶(Glutamate-1-semiadhyde aminotransferase,GSAT)是尿卟啉原Ⅲ生物合成上游途径的一个酶,尿卟啉原Ⅲ是红色荧光报告蛋白尿卟啉原Ⅲ甲基化酶(Uroporphyrinogen Ⅲ methyltransferase,UPMT)的底物。为了探明大肠杆菌共表达GSAT对UPMT荧光强度的影响,通过PCR扩增玉米upmt基因,将其插入pETDuet-1质粒中第2个顺反子中,构建的载体命名为pETU,表达UPMT的N端含有组氨酸标签;通过PCR扩增大肠杆菌编码GSAT的hemL基因,定点突变去除hemL基因中NcoⅠ序列,亚克隆至pET-51b质粒,再将获得的hemL基因插入pETU质粒的第一个顺反子中,构建pETeGU载体。表达GSAT的N端含有Strep标签。和单独表达upmt基因相比,表达2个基因后,蛋白印迹分析表明没有明显改变UPMT表达量,光谱扫描分析显示没有改变荧光物质的组成,但是增强了重组细胞的红色荧光物质叁甲基咕啉的含量,该物质在354nm有特异吸收。用2mmol/L的GSAT抑制剂3-氨基-2,3二羟基苯甲酸处理后,表达两种酶的菌落荧光消失,表明重组GSAT可能增加内源尿卟啉原Ⅲ水平,从而增强重组UPMT催化产生的红色荧光。(本文来源于《生物工程学报》期刊2010年12期）
潘海韵,程郢,朱苏文,范军[2]（2007）在《定点突变改善红色荧光指示蛋白玉米尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的水溶性研究》一文中研究指出尿卟啉原Ⅲ甲基化酶是一种新型的红色荧光指示蛋白,但是,在大肠杆菌重组表达的SUMT水溶性相对较低,限制了它的应用范围,而且对于结合在蛋白的色素组分尚不清楚。利用定点突变产生玉米尿卟啉原Ⅲ甲基化酶L88R/L89G双突变体和L166A突变体,两种突变体分别在大肠杆菌中重组表达,Ni-NTA一步纯化。紫外可见光谱扫描和质谱分析确定从纯化的L88R/L89G双突变体蛋白分离的色素组分。L88R/L89G双突变体在大肠杆菌细胞内有酶活,而L166A突变体胞内酶活丧失。结合蛋白的主要组分为叁甲基化咕啉。纯化的双突变体蛋白水溶性增加,为提高它作为荧光指示蛋白检测外源融合蛋白的水溶性打下基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2007年02期）
潘海韵[3]（2004）在《玉米尿卟啉原甲基化酶的不同片段表达、纯化及性质的初步研究》一文中研究指出尿卟啉原甲基化酶(SUMT)催化尿卟啉原Ⅲ在C-2和C-7位甲基化产生前咕啉-2，是合成西罗血红素、维生素B_(12)、血红素d_1和F_(430)因子第一个分支代谢的酶。本论文中，我们将玉米尿卟啉原甲基化酶基因的不同片断分别导入含有His-tag的pQE载体，在E.Coli中重组表达，结果表明，含有成熟酶(L92-W423)和去除成熟酶C端51个氨基酸(L92-S372)的截尾酶表达质粒的菌斑会产生红色荧光，而含去除成熟酶N端36个氨基酸(G93-W423)的截头酶菌斑则不显示红色荧光，诱导表达证明去除成熟酶N端36个氨基酸残基(SAM结构域)的截头酶以包涵体形式表达。用亲和层析Ni-NTA柱一步纯化了成熟酶和去除C端51个氨基酸残基截尾酶。SDS／PAGE显示成熟酶和截尾酶亚基分子量分别约为34KD和33KD，分子筛层析证明成熟全酶分子量约66KD左右，表明该酶是同亚基二聚体。纯化的尿卟啉原甲基化酶呈红色，从酶中分离的色素通过紫外可见光扫描光谱、荧光光谱和质谱测定红色荧光物质主要是叁甲基咕啉。圆二色性表明酶在去除红色荧光物质后，酶的二级结构中β折叠含量增加，动态光散射表明酶在红色色素去除后蛋白的聚合度增加。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2004-06-30）
尿卟啉原甲基化酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
尿卟啉原Ⅲ甲基化酶是一种新型的红色荧光指示蛋白,但是,在大肠杆菌重组表达的SUMT水溶性相对较低,限制了它的应用范围,而且对于结合在蛋白的色素组分尚不清楚。利用定点突变产生玉米尿卟啉原Ⅲ甲基化酶L88R/L89G双突变体和L166A突变体,两种突变体分别在大肠杆菌中重组表达,Ni-NTA一步纯化。紫外可见光谱扫描和质谱分析确定从纯化的L88R/L89G双突变体蛋白分离的色素组分。L88R/L89G双突变体在大肠杆菌细胞内有酶活,而L166A突变体胞内酶活丧失。结合蛋白的主要组分为叁甲基化咕啉。纯化的双突变体蛋白水溶性增加,为提高它作为荧光指示蛋白检测外源融合蛋白的水溶性打下基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
尿卟啉原甲基化酶论文参考文献
[1].叶爱华,张宽亮,陈宗梅,荣亮,汪苗.表达大肠杆菌谷氨酸-1-半醛氨基转移酶对红色荧光报告蛋白尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的影响[J].生物工程学报.2010
[2].潘海韵,程郢,朱苏文,范军.定点突变改善红色荧光指示蛋白玉米尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的水溶性研究[J].生物工程学报.2007
[3].潘海韵.玉米尿卟啉原甲基化酶的不同片段表达、纯化及性质的初步研究[D].安徽农业大学.2004
标签：尿卟啉原Ⅲ甲基化酶; 红色荧光报告蛋白; 谷氨酸-1-半醛氨基转移酶; 共同表达;