导读:本文包含了表达试验论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:爱德华,禽流感病毒,佐剂,鞭毛,曲线,蛋白,硝酸甘油。
表达试验论文文献综述
张冰清,段梦园,张保中,龙波,王冬梅[1](2019)在《葡萄糖转运子9和尿酸转运子1在软骨细胞中表达的体外试验》一文中研究指出目的观察在软骨细胞中葡萄糖转运子(GLUT)9和尿酸转运子(URAT)1的表达,探讨软骨细胞中是否存在尿酸转运。方法选择2017年11月至2018年4月5例外伤性股骨颈骨折患者(排除痛风性等关节炎和病理性骨折)的软骨组织作为对象,用Western blot和免疫组化法测定软骨组织中GLUT9和URAT1蛋白表达水平,并以Ⅱ型胶原蛋白作为阳性对照。结果 Western blot结果表明,5例标本Ⅱ型胶原蛋白均为阳性,Ⅱ型胶原蛋白是软骨细胞的特征性蛋白,其染色阳性证实取材标本中包含软骨细胞。5例标本在59 kDa和70 kDa均有阳性条带,分别对应兔抗人GLUT9和兔抗人URAT1;免疫组化结果表明,软骨细胞样本中可见特征性的软骨窝结构;软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白抗体染色后细胞质均显现为褐色,URAT1和GLUT9两种抗体染色下,软骨细胞的细胞膜可见均一的褐色染色,细胞质内亦有褐色染色分布。结论 GLUT9和URAT1在软骨组织中呈高表达,可能存在尿酸转运过程,其是否参与痛风性关节炎的发生、发展,有待进一步研究。(本文来源于《中国临床研究》期刊2019年07期)
张园,王文骞,宋雨心,王婷婷,刘琳琳[2](2019)在《正交试验法在优化重组乳酸乳球菌诱导表达中的应用研究》一文中研究指出为提高重组乳酸菌NICE诱导表达系统表达外源蛋白的能力,研究选取Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间这4个主要影响表达的因素,每个因素设置3个水平,设计4因素3水平(43)正交试验。通过优化Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间,从而确定重组乳酸菌表达外源蛋白最佳条件。结果显示:当Nisin的量为1 ng/mL、OD值为0.3、诱导温度为30℃、诱导时间为7 h时,其重组乳酸菌表达外源蛋白的量最高。研究结果为由Nisin控制表达基因系统的重组乳酸乳球菌疫苗开发奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年05期)
杨蕊珂,杨丽红,徐金义[3](2019)在《舌下含服硝酸甘油直立倾斜试验对诊断血管迷走性晕厥的临床意义表达》一文中研究指出目的探究舌下含服硝酸甘油直立倾斜试验(SNHUT)对诊断血管迷走性晕厥的临床意义。方法选取河南省人民医院2016年1月—2018年1月诊断为血管迷走性晕厥的患者160例为观察组,同期选取40例无晕厥史者为对照组。对比两组阳性率及各型(血管抑制型、心脏抑制型、混和型)占比;BHUT和SNHUT敏感性、特异性;阳性反应者基础状态、晕厥即刻血压(收缩压、平均动脉压、舒张压)、心率;BHUT和SNHUT阳性反应时间。结果观察组BHUT阳性率、SNHUT阳性率、总阳性率高于对照组(P<0.05);观察组血管抑制型占比高于心脏抑制型、混和型(P<0.05);观察组SNHUT阳性高于BHUT阳性率(P<0.05);SNHUT敏感性(70.11%)高于BHUT(23.13%)(P<0.05);阳性反应者晕厥即刻收缩压、平均动脉压、舒张压低于基础状态(P<0.05);SNHUT阳性反应时间短于BHUT阳性反应时间(P<0.05)。结论血管迷走性晕厥患者阳性反应率较高,舌下含服硝酸甘油HUT诊断血管迷走性晕厥,可提高阳性率、敏感性,缩短出现阳性反应时间,且特异性高,同时阳性反应中血管抑制型占比较高。(本文来源于《医药论坛杂志》期刊2019年02期)
楚电峰[4](2018)在《表达H9亚型禽流感病毒血凝素的重组火鸡疱疹病毒构建及其安全性与免疫效力试验》一文中研究指出H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)对鸡的致病性低,仅引起轻微的呼吸道症状和短时间产蛋下降,但混合感染或继发感染其他病原可导致较高的发病率和死亡率。H9亚型禽流感对养鸡业危害较大,免疫接种是防控该病的主要策略之一。目前生产上常用的H9亚型禽流感疫苗为全病毒灭活疫苗,这类疫苗仅能诱导产生高水平的循环抗体,而不能有效地激发细胞免疫和黏膜免疫应答。近年来,以火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkey,HVT)为载体的重组病毒活疫苗已经成为研究热点。一方面,HVT具有较多的复制非必需区可供外源基因插入;另一方面HVT是常用的家禽疫苗,可供1日龄雏鸡免疫或18日龄胚内注射免疫,能够更早地诱导免疫应答。本研究旨在以HVT为载体,构建能稳定表达H9亚型AIV血凝素(HA)的重组病毒活疫苗候选毒株,与现有灭活疫苗组合使用,以提供更加有效的免疫保护。1.rHVT-YBF003株的构建及其遗传稳定性与安全性评价重组病毒构建:对近年分离的21株H9亚型AIV进行HA基因测序和遗传进化分析,发现这些毒株处于h9.4.2.5分支,为目前H9亚型AIV的优势流行毒株。因此,本研究选取其中的YBF003株,用于重组病毒的构建。采用RT-PCR扩增H9亚型AIV YBF003株的HA基因,将HA基因插入到含HVT FC-126疫苗株同源臂和CMV启动子的载体,构建转移载体pFR-H9。将pFR-H9与表达绿色荧光蛋白(EGFP)的重组HVT(rHVT-EGFP)基因组共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),以同源重组的方式将rHVT-EGFP的EGFP基因替换为HA基因表达盒,获得重组病毒rHVT-YBF003株。在CEF单层上反复纯化rHVT-YBF003株,直至所有重组病毒空斑均不带绿色荧光。经PCR鉴定,HA基因表达盒正确插入到HVT基因组;进一步进行Western-blot和IFA鉴定,rHVT-YBF003株能够表达HA蛋白。分别用rHVT-YBF003株和HVTFC-126株感染CEF,两者的生长特性并无显着差异。将rHVT-YBF003株在CEF上连续传20代,再接种于CEF单层,待形成典型空斑后,通过PCR从随机挑选的20个空斑中均能检测到HA基因表达盒;将第20代rHVT-YBF003株接种于CEF单层,通过间接免疫荧光试验(IFA)证明rHVT-YBF003株能够稳定表达H9亚型AIV的HA蛋白。重组病毒的遗传稳定性:1日龄SPF鸡颈部皮下接种rHVT-YBF003株,5.0×103 PFU/只;21日龄时,从血液中分离淋巴细胞,再接种于另一批次1日龄SPF鸡(3.0×106个淋巴细胞/羽份)。如此反复传代6次,经PCR检测传代后的rHVT-YBF003株中均存在HA基因,IFA证明传代后的重组病毒仍能稳定表达H9亚型AIV的HA蛋白。1日龄SPF鸡颈部皮下接种rHVT-YBF003株,5.0×103PFU/羽份;每隔7天采血分离淋巴细胞,再接种于CEF单层,进行病毒分离和计数。结果显示,rHVT-YBF003株在鸡体内的病毒载量不断提高,至9周龄时,病毒载量达到峰值,此后呈下降趋势,直到第20周龄时仍能检测到少量重组病毒存在,说明该重组病毒可在鸡体内维持较长时间。重组病毒的安全性:以5.0X 104PFU/羽份的rHVT-YBF003株接种1日龄SPF鸡,对鸡群进行连续8周的临床观察、生长状况监测,结果显示接种重组病毒的试验鸡精神、采食、饮水均正常,剖检和组织切片检查均未发现病理变化。以5.0×104PFU/头份的rHVT-YBF003株接种4周龄ICR小鼠,接种后ICR小鼠的采食、精神均正常;接种后14天,对小鼠内脏器官检查并称重,显示接种重组病毒对小鼠无不良影响。因此,重组病毒对易感动物和非易感动物均具有良好的安全性。2.rHVT-YBF003株的免疫效力评价对SPF鸡的免疫保护效力试验:试验分为4组,分别为胚内免疫组、1日龄免疫组、灭活疫苗组和空白对照组;分别对18日龄SPF鸡胚胚内注射5.0X 103PFU/羽份的rHVT-YBF003株、1日龄SPF雏鸡皮下注射5.0X 103PFU/羽份的rHVT-YBF003株、14日龄SPF雏鸡肌肉注射H9亚型禽流感病毒灭活疫苗(YBF003株)、1日龄SPF雏鸡皮下注射0.5 mLPBS/只。28日龄时,采血测定各试验组针对H9亚型AIV的HI抗体效价,并以H9亚型AIV YBF003株攻毒(静脉注射1.0X 1 07 5 EID50/羽份)。28日龄时,胚内免疫组和1日龄免疫组的HI抗体效价分别为4.7±0.60和4.5±0.30,胚内免疫组比1日龄免疫组的HI抗体最大提高0.3±0.62个滴度,两组均能提供一定的早期保护;灭活疫苗组的HI抗体效价为6.5±0.75,攻毒保护率为50%;空白对照组的抗体为1.3±0.12,攻毒保护率为0%。对商品鸡的免疫保护效力试验:对商品鸡的分组及处理方式同SPF鸡。另外,增加重组病毒与灭活疫苗联合免疫组,该组于1日龄时颈部皮下注射5.0×103PFU/羽份的rHVT-YBF003株,14日龄时经肌肉注射H9亚型禽流感病毒灭活疫苗(YBF003株)。28日龄时,采血测定各试验组针对H9亚型AIV的HI抗体效价,并以H9亚型AIV YBF003株攻毒(静脉注射1.0×107.5EID50/羽份)。28日龄时,胚内免疫组、1日龄免疫组和灭活疫苗免疫组的HI抗体效价分别为4.3±0.49、4.1 ±0.89和6.2±0.34,攻毒保护率均为50%以上,差异不显着;而联合免疫组的抗体效价为7.8±0.45,攻毒保护率为70%;空白对照组的抗体为1.0±0.74,攻毒保护率为10%。3.重组病毒种子批建立与大规模培养工艺研究培养工艺研究:为提高重组病毒的效价,同时获得规模化生产条件下的重组病毒培养技术参数。我们对采用细胞工厂进行大规模培养的方法进行了研究。结合该病毒的培养特性,分别从宿主细胞的接种密度、种毒接种剂量和收毒时间等方面对培养工艺进行摸索,最终制定了最优的病毒培养技术工艺:即采用十层细胞工厂(总面积为6335 cm2,培养液为1200mL),CEF密度为2.5×106个/mL时,接种3.0×106PFU的重组病毒,培养72 h,收获感染细胞,按照每个细胞工厂分装50支冻存管的标准进行收获,每支冻存管分装量为1.8mL,其收获的病毒效价可达5.0×106PFU/支以上,即成品疫苗可达5000 PFU/羽份以上,远高于2000 PFU/羽份的国家标准。种子批建立:将所收获的重组病毒分为原始种子、基础种子和生产种子。原始种子包括重组病毒的F1~F6代,基础种子包括F7~F12代,生产种子包括F13~F17代。并在各级种子批中随机选取一个代次的种子进行无菌检验、支原体检验、鉴别检验、安全性检验、免疫原性检验和外源病毒检验。无菌检验和支原体检验中,叁个代次种毒的检验结果均为阴性;鉴别检验中,对HVT鉴定部分采用间接免疫荧光试验,结果显示,叁个代次种毒形成的病毒空斑均呈现绿色荧光,说明形成的病毒空斑为HVT,对HVT表达的HA蛋白鉴定采用Western-blot方法鉴定,结果显示,叁个代次种毒均能表达HA蛋白;安全性检验中,叁个代次的种毒接种1日龄SPF鸡,免疫剂量为3.0×104PFU/羽,免疫后观察90天,所有免疫鸡均未观察到临床症状;外源病毒检验中,分别于1日龄和21日龄时,采用滴鼻、点眼(剂量为3.0×104PFU/羽份)和肌肉注射(剂量为3.0×104PFU/羽份)叁种途径同时接种重组病毒,42日龄时采集血清,均未检测到外源病毒的抗体。结果显示,叁个代次的重组病毒均符合种毒质量标准。综上所述,本研究构建了一株表达H9亚型AIV HA蛋白的重组HVT(rHVT-YBF003株)。在体内和体外传代过程中,rHVT-YBF003株所插入的HA基因均能稳定表达。在安全性评价方面,该重组病毒对易感和非易感动物均不具有致病性。该重组病毒可用于1日龄雏鸡和18日龄鸡胚内的早期免疫,虽然HI抗体低于灭活疫苗,但对H9亚型AIV的保护率等同于灭活疫苗。重组病毒与灭活疫苗联合使用具有协同效应,对H9防控效果更好。本研究还建立了种子批,并制定了符合大规模生产的重组病毒培养工艺,为将来工厂化生产打下了基础。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-12-01)
蒋文明,侯广宇,李金平,程善菊,王素春[5](2018)在《利用一种流感病毒载体同时表达H5和H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白双价疫苗的构建与免疫效力试验》一文中研究指出2014年以来,第2.3.4.4分支的H5亚型高致病性禽流感病毒在我国广泛流行,成为主要的H5病毒流行分支。2017年以来,H7N9亚型禽流感病毒由低致病性病毒变异为高致病性病毒,给家禽业造成了巨大的经济损失。2017年9月以来,农业部在全国实施H5和H7N9疫苗的强制性免疫。在疫苗生产过程中,需要将Re-8和H7 Re1两个疫苗毒株分别经鸡胚增殖后,进行浓缩和配比,因此需要更多的鸡胚(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21)
赵明志,罗强,蒋良潍,魏明[6](2018)在《原状土e-lgp曲线的S形函数表达及简化加载固结试验方法》一文中研究指出为能够较为合理地确定土体压缩参数并简化固结试验加载过程,结合京沪高铁李窑试验段地基原状细粒土样标准固结试验数据,对比分析了多项式和叁种S形曲线函数在描述原状土e-lgp曲线发展规律时的差异性,探讨了先期固结压力的合理计算原则,提出了简化加载级数的固结试验方法。结果表明,多项式函数易受数据波动而导致整体拟合偏差,S形曲线函数的待定参数可良好稳定地反映曲线最小曲率半径点和直线段斜率,为较理想的e-lgp曲线数学函数表达式;通过分析Arvidsson法、Gregory法和Casagrande法,确定先期固结压力时的不同取值原则,获得了先期固结压力值的变化区间,提出土体由超固结过渡到欠固结状态时存在正常固结状态带的概念,用于判断土体固结特性较为客观合理;利用土体初始孔隙比和两级或叁级荷载下的变形值可确定S形曲线函数待定参数,据此建立了简化加载级数的固结试验方法。上述研究成果可为准确判定土体固结特性、快速获取土体压缩参数提供理论指导。(本文来源于《实验力学》期刊2018年05期)
郭思佳,孙增涛,李月川,吴琦,封继宏[7](2018)在《补肺颗粒对轻中度慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清IL-33/sST2轴及相关炎性因子表达的影响:多中心、双盲、随机对照试验》一文中研究指出目的观察补肺颗粒对轻中度慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的影响,并从调控血清白细胞介素-33(IL-33)/可溶型ST2(sST2)轴及相关炎性因子表达水平阐释其作用机制。方法采用随机、双盲、对照的方法,将来自4家叁甲医院的271例轻中度COPD稳定期患者按分层区组随机化方法分为治疗组(136例)和对照组(135例)。治疗组和对照组均给予疾病教育与慢病管理,在此基础上治疗组给予口服补肺颗粒,对照组给予补肺颗粒安慰剂。每袋10g,每次2袋,每日2次,疗程均为12周。观察患者COPD自我评估测试(CAT)问卷积分,圣乔治呼吸问卷(SGRQ)积分,中医证候积分,肺功能指标[包括1秒钟用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1占预计值百分比(FEV1%)和FEV1占FVC百分比(FEV1/FVC)],血清IL-33、sST2、IL-4和IL-10水平。结果与本组治疗前比较,治疗组治疗后CAT问卷积分,中医证候积分,SGRQ呼吸症状、活动受限、疾病影响单项积分和总积分,血清sST2水平降低(P<0.01),血清IL-33、IL-4和IL-10水平提高(P<0.01);且治疗组优于对照组(P<0.01)。治疗后治疗组FEV1、FVC、FEV1%和FEV1/FVC高于对照组(P<0.05)。治疗组中医证候疗效总有效率为75.74%(103/136),优于对照组[9.63%(13/135),χ2=120.929,P<0.01]。结论补肺颗粒能够有效改善轻中度COPD稳定期患者临床症状,延缓肺功能下降,提高生活质量,其作用机制可能与提高血清IL-33、IL-4和IL-10水平,降低血清sST2水平,增强机体抗炎能力有关。(本文来源于《中国中西医结合杂志》期刊2018年09期)
袁勇[8](2018)在《鸡矢藤颗粒剂干预大鼠肝纤维化模型OPN与TGF-β1水平表达的试验研究》一文中研究指出将30只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型非治疗组和肝纤维化模型治疗组。8周后采用Western blotting检测OPN蛋白表达,采用荧光实时定量法检测TGF-β1 mRNA的表达水平。结果显示,采用鸡矢藤颗粒剂治疗组(模型治疗组)的HA、LN、PCIII、CIV放射免疫数据与正常组相比有显着差异(P <0. 01),同时与模型非治疗组比有差异(P <0.05);模型非治疗组的HA、LN、PCIII、CIV放射免疫数据与治疗组相比有显着差异(P <0. 01);采用鸡矢藤治疗(模型治疗组)的OPN蛋白表达数值水平较正常组有差异(t=2. 236,P <0. 05),同时较模型非治疗组有显着差异(t=1. 024,P <0. 01);采用鸡矢藤治疗(模型治疗组)的TGF-β1 mRNA的表达数值水平较正常组有差异(t=2. 245,P <0. 05),同时较模型非治疗组有显着差异(t=1. 142,P <0. 01)。说明鸡矢藤可以抑制OPN蛋白表达,抑制TGF-β1 mRNA的表达,减缓肝纤维化的进程。研究表明OPN与TGF-β1调控的信号通路具有相关性,具体信号通路的调控有待进一步研究。(本文来源于《食品与机械》期刊2018年08期)
张志强,杨楠,李永慧,王洪彬,吴同垒[9](2018)在《迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC原核表达及免疫试验》一文中研究指出为了解迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC的免疫特性,从迟缓爱德华菌基因组中克隆出鞭毛基因fliC,并将其构建到原核表达载体上,用原核表达的方法获得大量重组蛋白,将蛋白纯化后,通过动物模型确定该蛋白的免疫特性。结果表明,迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC具有较强的免疫原性,对免疫动物应对强毒株感染具有一定保护效果。将FliC与牛血清白蛋白(BSA)混合免疫小鼠能够刺激机体产生较高水平抗BSA抗体,说明其佐剂特性。研究表明,迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC具有优良的免疫原性和佐剂特性,是迟缓爱德华菌的保护性抗原,具有潜在的应用价值。(本文来源于《动物医学进展》期刊2018年07期)
[10](2018)在《表达抗菌肽枯草芽孢杆菌在白羽肉鸡上的应用试验》一文中研究指出国家肉鸡产业技术体系河北综合试验站与益生菌生产企业合作,于3月8日至4月18日在河北省沧州市孟村回族自治县大成集团合同肉鸡养殖户鸡场以及4月2日至5月22日在河北省邢台市平乡聚农养殖合作社肉鸡养殖户鸡场安排表达抗菌肽的枯草芽孢杆菌("肽健宝")在白羽肉鸡上的应用试验,主要考察抗菌肽和枯草芽孢杆菌对白羽肉鸡生产性能和养殖效益的影响。(本文来源于《北方牧业》期刊2018年12期)
表达试验论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
为提高重组乳酸菌NICE诱导表达系统表达外源蛋白的能力,研究选取Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间这4个主要影响表达的因素,每个因素设置3个水平,设计4因素3水平(43)正交试验。通过优化Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间,从而确定重组乳酸菌表达外源蛋白最佳条件。结果显示:当Nisin的量为1 ng/mL、OD值为0.3、诱导温度为30℃、诱导时间为7 h时,其重组乳酸菌表达外源蛋白的量最高。研究结果为由Nisin控制表达基因系统的重组乳酸乳球菌疫苗开发奠定了基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
表达试验论文参考文献
[1].张冰清,段梦园,张保中,龙波,王冬梅.葡萄糖转运子9和尿酸转运子1在软骨细胞中表达的体外试验[J].中国临床研究.2019
[2].张园,王文骞,宋雨心,王婷婷,刘琳琳.正交试验法在优化重组乳酸乳球菌诱导表达中的应用研究[J].中国家禽.2019
[3].杨蕊珂,杨丽红,徐金义.舌下含服硝酸甘油直立倾斜试验对诊断血管迷走性晕厥的临床意义表达[J].医药论坛杂志.2019
[4].楚电峰.表达H9亚型禽流感病毒血凝素的重组火鸡疱疹病毒构建及其安全性与免疫效力试验[D].扬州大学.2018
[5].蒋文明,侯广宇,李金平,程善菊,王素春.利用一种流感病毒载体同时表达H5和H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白双价疫苗的构建与免疫效力试验[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[6].赵明志,罗强,蒋良潍,魏明.原状土e-lgp曲线的S形函数表达及简化加载固结试验方法[J].实验力学.2018
[7].郭思佳,孙增涛,李月川,吴琦,封继宏.补肺颗粒对轻中度慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清IL-33/sST2轴及相关炎性因子表达的影响:多中心、双盲、随机对照试验[J].中国中西医结合杂志.2018
[8].袁勇.鸡矢藤颗粒剂干预大鼠肝纤维化模型OPN与TGF-β1水平表达的试验研究[J].食品与机械.2018
[9].张志强,杨楠,李永慧,王洪彬,吴同垒.迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC原核表达及免疫试验[J].动物医学进展.2018
[10]..表达抗菌肽枯草芽孢杆菌在白羽肉鸡上的应用试验[J].北方牧业.2018